"NCI-H128 Cell|人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：小細(xì)胞肺癌；胸腔積液轉(zhuǎn)移；男性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

【細(xì)胞培養(yǎng)中細(xì)菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細(xì)菌：細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀，根據(jù)感染細(xì)菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯。仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況，是否在GAO壓滅菌時(shí)放氣時(shí)間足夠，壓力足夠！尤其是和儲(chǔ)存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲(chǔ)存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理；霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無(wú)雜質(zhì)，３７度孵箱培養(yǎng)２-３天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細(xì)胞仍可生長(zhǎng)，但時(shí)間長(zhǎng)之后，細(xì)胞的活力狀態(tài)變差，用酸銅溶液擦拭CO２孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉GAO鹽液體,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有細(xì)胞暫時(shí)轉(zhuǎn)移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個(gè)小時(shí)，使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后，再移入細(xì)胞。孵箱應(yīng)定期清潔(２月左右)，尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外燈照。預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加３u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗；但細(xì)胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或D或雙抗都于事無(wú)補(bǔ)，建議舍棄該污染細(xì)胞，將環(huán)境徹底消毒，如果所有細(xì)胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個(gè)別污染，可能是操作問題，就要注意操作。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

EA hy 926細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM00637B細(xì)胞、SUDHL-6細(xì)胞、HS-68細(xì)胞

MCF.7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKNEP1細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、DH-82細(xì)胞

PK(15)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW403細(xì)胞、TPC1細(xì)胞、Colo699細(xì)胞

SKNEP1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PG-LH7細(xì)胞、MEC1細(xì)胞、MOLT-3細(xì)胞

NS-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LNCaP-ATCC細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

NCI-H128 Cell|人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng)，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營(yíng)養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶?jī)?nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動(dòng)作要輕，以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液?jiǎn)为?dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營(yíng)養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

JM-Jurkat細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PFSK-1細(xì)胞、TE85細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞

EFO27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2171細(xì)胞、H1417細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞

Keio University-19-19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SF539細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞

U-266細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EA.hy 926細(xì)胞、NCI H508細(xì)胞、HCC-1500細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

JM-Jurkat細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PFSK-1細(xì)胞、TE85細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞

EFO27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2171細(xì)胞、H1417細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞

Keio University-19-19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SF539細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞

U-266細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EA.hy 926細(xì)胞、NCI H508細(xì)胞、HCC-1500細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

Caco-2/BBe 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW620細(xì)胞、RA-FLSs細(xì)胞、SK HEP-1細(xì)胞

CL 1-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PANC-1細(xì)胞、H-1563細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞

RWPE-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2073細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞、TE3細(xì)胞

AM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFLS-RA細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞

MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SJSA1細(xì)胞、DHL-16細(xì)胞、GM02131A細(xì)胞

HeLa S 3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：YD-38細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞、L-363細(xì)胞

SKOV-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOLT 3細(xì)胞、MADB-106細(xì)胞、G-292細(xì)胞

Meat Animal Research Center-145細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hu-P-T3細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞

8305C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MKN28細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞、SK-MEL2細(xì)胞

U266 Bl細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1651細(xì)胞、TM4細(xì)胞、SU.86.86細(xì)胞

NCI-H128 Cell|人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

639V細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs695T細(xì)胞、OPM2細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞

MFHL-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Normal fibroblast-10細(xì)胞、KLN205細(xì)胞、H-2198細(xì)胞

3D4/21細(xì)胞類似產(chǎn)品：：32D CL3細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、TFH細(xì)胞

NCI-H2023細(xì)胞類似產(chǎn)品：：G-292細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HOS (TE85)細(xì)胞

OCI Ly1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1437細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-2細(xì)胞

HBdSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM 52細(xì)胞、IHH細(xì)胞、H526細(xì)胞

HBdSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM 52細(xì)胞、IHH細(xì)胞、H526細(xì)胞

Beta-TC-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK 293-F細(xì)胞、2T細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞

AE1201細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 357細(xì)胞、WM-266-mel細(xì)胞、MM1S細(xì)胞

SK.OV.3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HME1細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞、Emory University-2細(xì)胞

BE(2)-C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H209細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞、COLO679細(xì)胞

OSC19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BL-6細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞、SU86_86細(xì)胞

PC.3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-NM-C細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞

UM2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞、Molm 14細(xì)胞

GP2d細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD19Lu細(xì)胞、GM2131細(xì)胞、GM637細(xì)胞

NL20細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RIN m5F細(xì)胞、MLFC細(xì)胞、LTEP-sm 1細(xì)胞

PC 61.5.3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：alpha TC1 clone 6細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞

Panc-8_13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HUV-EC-C細(xì)胞、KMST6細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞

HCC-1954BL細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Walker256-TC細(xì)胞、WSUDLCL2細(xì)胞、MEF細(xì)胞

SK-N-BE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ROS 17/2.8細(xì)胞、CCD841CoN細(xì)胞、KYSE-410細(xì)胞

Mel-RM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDAMB436細(xì)胞、DR2R1610細(xì)胞、SCC 4細(xì)胞

Cor L88細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1573細(xì)胞、SW-900細(xì)胞、CV1細(xì)胞

B16-F1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Huh7.5.1細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞、143B TK-細(xì)胞

HCC366細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L-363細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞、GM00637H細(xì)胞

HEL-299細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EoL-1細(xì)胞、TE3A細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞

LL/2(LLc1)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHL/IU細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞

BA/F3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DSL-6A-C1細(xì)胞、HEP-3B2細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞

NCI-HUT-292細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2291細(xì)胞、H322T細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞

HIBEpiC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK 293A細(xì)胞、Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞、H2107細(xì)胞

NCI-H128 Cell|人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

T.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU5細(xì)胞、H1838細(xì)胞、KNS81細(xì)胞

Tu-686細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK-AD 293細(xì)胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞

VP229細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-1222細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞

H2141細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Reuber H-35細(xì)胞、LP-1細(xì)胞、NCI-Hut 125細(xì)胞

NCI-H1568細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC26細(xì)胞、H2030細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞

BCaP 37細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LA-N-1細(xì)胞、PC615.3細(xì)胞、AG06814-N細(xì)胞

FRhK4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH508細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞、Tn 5B1-4細(xì)胞

RPE D407細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM115F細(xì)胞、MGHU3細(xì)胞、SW-480細(xì)胞

Bowes melanoma cells細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-1187細(xì)胞、Panc327細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞

NKT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MASMC細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞

GM00637I細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH292細(xì)胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞、HS-940-T細(xì)胞

Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-172MG細(xì)胞、Tu177細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞

CNE-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPBALL細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞

QGY7701細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U343細(xì)胞、CX1細(xì)胞、AM細(xì)胞

MRCV細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H524細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞、D-283細(xì)胞

TE-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DMS-79細(xì)胞、MCF/Adr細(xì)胞、ECC10細(xì)胞

SNU-354細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK RC 20細(xì)胞、Ketr-3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞

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