"HCC2185 Cell|人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：轉(zhuǎn)移性小葉乳腺癌；胸腔積液轉(zhuǎn)移；女性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

Hepa1-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Dx5細(xì)胞、CATH-a細(xì)胞、SAS細(xì)胞

TF-1a細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Karpas299細(xì)胞、786-O細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞

TE-3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 741細(xì)胞、TW01細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞

HuLEC-5a細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AG06814-M細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、Hs 742.T細(xì)胞

Y3.AG.1.2.3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC2935細(xì)胞、H322細(xì)胞、Tb 1 Lu細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

HCC2185 Cell|人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到Zui低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良HAO的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

COLO 206細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1650細(xì)胞、MC-3T3-E1細(xì)胞、HEC-1-A細(xì)胞

Panc-3_27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WiDr細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞

MonoMac6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DMS53細(xì)胞、SUM190細(xì)胞、NCI-H810細(xì)胞

HCC-827細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF-7B細(xì)胞、NCI-H1341細(xì)胞、SW 527細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

COLO 206細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1650細(xì)胞、MC-3T3-E1細(xì)胞、HEC-1-A細(xì)胞

Panc-3_27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WiDr細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞

MonoMac6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DMS53細(xì)胞、SUM190細(xì)胞、NCI-H810細(xì)胞

HCC-827細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF-7B細(xì)胞、NCI-H1341細(xì)胞、SW 527細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

Anip 973細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OE21細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞、Co 115細(xì)胞

SKG3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IOSE29細(xì)胞、B-3細(xì)胞、SW-48細(xì)胞

H1563細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM00346細(xì)胞、T98細(xì)胞、MT2細(xì)胞

HCC0202細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B-CPAP細(xì)胞、HT-29/CX-1細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞

COLO 320HSR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A 72細(xì)胞、OV90細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞

253J-BV細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VK2/E6E7細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞

NS1-Ag 4/1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞、ESC細(xì)胞

MIMVEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A2780細(xì)胞、CCLP1細(xì)胞、SW-780細(xì)胞

U373-MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞、HCC1954細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞

HEC1-A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C33A細(xì)胞、hA549細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞

HCC2185 Cell|人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細(xì)胞

RMG1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MFE-280細(xì)胞、NCI-H2110細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞

CCFSTTG1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CORL105細(xì)胞、HSAEC1-KT細(xì)胞、HCC2279細(xì)胞

OCI-Ly10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RIN-m 14B細(xì)胞、Hs 578T細(xì)胞、P388.D1細(xì)胞

IOSE-29細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LTEP-a-2細(xì)胞、SNU-C2B細(xì)胞、MAntle cell VERona-1細(xì)胞

NCTC-3960細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JVM-2細(xì)胞、HuT102細(xì)胞、TPC-1細(xì)胞

MHCC97細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK N SH細(xì)胞、BPH1細(xì)胞、LN299細(xì)胞

MHCC97細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK N SH細(xì)胞、BPH1細(xì)胞、LN299細(xì)胞

P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NHLF細(xì)胞、NCI-H524細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞

SEG1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI H929細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞、Jurkat E6細(xì)胞

SK-N-BE-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ID8/MOSEC細(xì)胞、BpRc1細(xì)胞、SK-CO-1細(xì)胞

KYSE0030細(xì)胞類似產(chǎn)品：：hOMF細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞

H1876細(xì)胞類似產(chǎn)品：：22Rv-1細(xì)胞、Mo7e細(xì)胞、GC9811-P細(xì)胞

J774A.1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：32D:cl3細(xì)胞、UCLA-SO-14細(xì)胞、U-138-MG細(xì)胞

MDAPCa2b細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE3細(xì)胞、JM1細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞

Hs-695-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H226細(xì)胞、JB6 Cl 30細(xì)胞、OVCA-420細(xì)胞

F56 [Human neoplasm]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CL-11細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞

H-929細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、ZR751細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞

TMK-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MGHU3細(xì)胞、SF 295細(xì)胞、BOWES細(xì)胞

HEK-AD293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KASUMI1細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞

NCI-H2405細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-134VI細(xì)胞、OV3121細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞

NOK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞、DoHH2細(xì)胞

PANC-08-13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM102細(xì)胞、JROECL21細(xì)胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細(xì)胞

UM-UC-14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CF-1 MEF細(xì)胞、GL261細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞

RSC-96細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKRC-52細(xì)胞、769-P細(xì)胞、SUM 52PE細(xì)胞

TR 146細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW1222細(xì)胞、SNB19細(xì)胞、KM H-2細(xì)胞

SGC996細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEI-193細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞、SNU-407細(xì)胞

PANC 813細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT GEO細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞、PM6細(xì)胞

NBL-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LC-1 sq細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞

Hs729T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIHOVCAR3細(xì)胞、EJ細(xì)胞、MDA361細(xì)胞

HCC2185 Cell|人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細(xì)胞

NK 10a細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1734細(xì)胞、alpha TC1.6細(xì)胞、MPP-89細(xì)胞

ZYM-SVEC01細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EB-1細(xì)胞、HOS-143B細(xì)胞、KTCTL-140細(xì)胞

H2196細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LA-N-6(OAN)細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞、IGR-OV1細(xì)胞

GM04154B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CG-4細(xì)胞、HCV-29細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞

SUM-149細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RAMOS2G64C10細(xì)胞、HMEC-1細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞

MDAMB330細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞、MADISON LUNG TA-109細(xì)胞

EB-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUP-M2細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞、SUD6細(xì)胞

MDA-MB-175細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293T/17細(xì)胞、MDA-MB-453細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞

SW626細(xì)胞類似產(chǎn)品：：XWLC-05細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞、HCV29細(xì)胞

U-hth74細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MEL-526細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞

NCI H548細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC 38細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞

KYSE 450細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Med 283細(xì)胞、WM239細(xì)胞、SNU354細(xì)胞

HEK293-EBNA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc 2.03細(xì)胞、Hs746T細(xì)胞、U-937細(xì)胞

HRPEpiC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HDQ-P1細(xì)胞、RSC-364細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞

Hep G2/C3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HeLa-229細(xì)胞、GM05887細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞

H-1651細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A431/P細(xì)胞、SC1細(xì)胞、LTEP-sm細(xì)胞

RC-4B/C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-948細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞

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