"C8161 Cell|人黑色素瘤細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：皮膚黑色素瘤；腹壁轉(zhuǎn)移；女性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

【細(xì)胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細(xì)胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不HAO，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會與細(xì)胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞站YOU勢所以不會影響到細(xì)胞的正常生長，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時就會影響到細(xì)胞的生長，Zui終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細(xì)菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細(xì)胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細(xì)胞某項指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。１)孵箱應(yīng)定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風(fēng)機不能過大，風(fēng)機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進(jìn)入操作。

細(xì)胞生長：貼壁

Bat lung細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LTEP-sm細(xì)胞、SHI1細(xì)胞、H-187細(xì)胞

AA-Mel細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW1463細(xì)胞、B10BR細(xì)胞、LN 229細(xì)胞

OsACL細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、BT-20細(xì)胞、H-2170細(xì)胞

Caco2-BBE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs729細(xì)胞、C33-A細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞

MA-c細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 695T細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞、Pa017C細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

C8161 Cell|人黑色素瘤細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時，動作要輕，以免把已松動的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

HOSEpiC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Toledo細(xì)胞、Hs-27細(xì)胞、P-36細(xì)胞

SNU620細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H196細(xì)胞、NCI-H1838細(xì)胞、DU-145細(xì)胞

LY-R細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EJ1細(xì)胞、A498細(xì)胞、Colon-26細(xì)胞

Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MPC-11細(xì)胞、H-128細(xì)胞、LAPC4細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

HOSEpiC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Toledo細(xì)胞、Hs-27細(xì)胞、P-36細(xì)胞

SNU620細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H196細(xì)胞、NCI-H1838細(xì)胞、DU-145細(xì)胞

LY-R細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EJ1細(xì)胞、A498細(xì)胞、Colon-26細(xì)胞

Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MPC-11細(xì)胞、H-128細(xì)胞、LAPC4細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動物細(xì)胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

Kit225 K6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：2780細(xì)胞、PA12細(xì)胞、NCI-H508細(xì)胞

NCIH1385細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P 815細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞

COV434細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SRS-82細(xì)胞、NWA細(xì)胞、FL83B細(xì)胞

Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SGC-7901/DDP細(xì)胞、BAEC細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞

SKG-IIIa細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IOSE80細(xì)胞、BC-019細(xì)胞、H-2196細(xì)胞

C-4 I細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞、THP-1(ATCC)細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞

DMS-53細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPDEC細(xì)胞、Hs 695.T細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞

MC57G細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HTR8svn細(xì)胞、MIA Paca2細(xì)胞、HT144細(xì)胞

GT38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TOG細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞、Mv 1 Lu細(xì)胞

OVCA433_Bast細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AE 1201細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞、T1-73細(xì)胞

C8161 Cell|人黑色素瘤細(xì)胞

BALB/3T3 clone A31細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHO-ori細(xì)胞、RC-2細(xì)胞、LS-174細(xì)胞

190PT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 888.T細(xì)胞、OCM1A細(xì)胞、Calu 3細(xì)胞

C4-I細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BpRc1細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞

BRL-3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Calu-6細(xì)胞、Hi5細(xì)胞、KM.12細(xì)胞

SCC90細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO.205細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞、W256細(xì)胞

HPAEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Vero細(xì)胞、FBHE細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞

HPAEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Vero細(xì)胞、FBHE細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞

Panc5.04細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs281T細(xì)胞、H2342細(xì)胞、TOV21細(xì)胞

SNU869細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞、A2780CP70細(xì)胞

Kit-225-K6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCA-420細(xì)胞、H4IIEC3細(xì)胞、ABE-8.1/2細(xì)胞

Tsup-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCFSTTG1細(xì)胞、58F細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞

DR2R1610細(xì)胞類似產(chǎn)品：：253J細(xì)胞、50.B1細(xì)胞、Tregs細(xì)胞

L-6TG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P-2003細(xì)胞、A875細(xì)胞、GS-9L細(xì)胞

PK (15)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM07404D細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞

SK-NEP-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCL II細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞

MCA38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-hth74細(xì)胞、DMS 273細(xì)胞、P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞

HLE-SRA-01/04細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc2.03細(xì)胞、CEMC7細(xì)胞、NTera 2細(xì)胞

L- cell細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMR 106細(xì)胞、32D CL3細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞

HEK293EBNA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OACP4 C細(xì)胞、NCIH2110細(xì)胞、3AA細(xì)胞

NCIH647細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Kit 225-K6細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞、CX1細(xì)胞

RBSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LNCaP-C4-2細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞、HFT 8810細(xì)胞

MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞、FHL124細(xì)胞

NT2/D1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2170細(xì)胞、KYSE0410細(xì)胞、Y79細(xì)胞

T47-D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L 1210細(xì)胞、EFM-19細(xì)胞、CAL 33細(xì)胞

HCT15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P-3J細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞、OVCAR 8細(xì)胞

IB-RS2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-1417細(xì)胞、MKN-45細(xì)胞、OUMS-23細(xì)胞

KLN-205細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RCS細(xì)胞、H1437細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞

MDA231-LM2-4175細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CSQT-2細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞

Lewis Lung Cancer細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞、HEL-1細(xì)胞、Caki-1細(xì)胞

C8161 Cell|人黑色素瘤細(xì)胞

IM9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Chang Cells細(xì)胞、W256細(xì)胞、FTC133細(xì)胞

Mevo細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Sci-1細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞、MDA2B細(xì)胞

SUM 149PT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3-LL細(xì)胞、SHEE細(xì)胞、PE CA PJ34細(xì)胞

FC33細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MonoMac1細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞、AM38細(xì)胞

SVHUC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2052細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞

ZR751細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PK (15)細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞、CHP-212細(xì)胞

PT-67細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、C666-1細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞

McARH7777細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIADR.RES細(xì)胞、MRCV細(xì)胞、MASMC細(xì)胞

HMCB細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞、NPC-TW 01細(xì)胞

ECC 12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GC-2細(xì)胞、J774細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞

MLE 12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MLA144細(xì)胞、MDA MB 453細(xì)胞、GM03569細(xì)胞

HuTu-80細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞

SJ-Rh 30細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LLC PK1細(xì)胞、H716細(xì)胞、RKN細(xì)胞

NS1-Ag4/1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MHH-CALL2細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞、BHK細(xì)胞

HCEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HARAB細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞

B958細(xì)胞類似產(chǎn)品：：J774A.1細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞

HEK/EBNA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：K 562細(xì)胞、HT3細(xì)胞、NCI-H1693細(xì)胞

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