"MKN74 Cell|人胃癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：胃癌；女性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞接收操作說明：請(qǐng)仔細(xì)閱讀本操作說明及相應(yīng)的細(xì)胞說明書。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會(huì)用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長期經(jīng)驗(yàn)來說，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(Zui主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個(gè)人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用，如細(xì)胞密度GAO于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時(shí)T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會(huì)長得很慢，嚴(yán)重的，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn))，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。

細(xì)胞生長：貼壁

OAW-42細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKNDZ細(xì)胞、Granta519細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞

HAC-84細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc-3_27細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞、JHH7細(xì)胞

A549-Taxol細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MLM細(xì)胞、HT144mel細(xì)胞、Tu177細(xì)胞

Hs695T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、H-35細(xì)胞、COV-362細(xì)胞

OCI-Ly 10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE 520細(xì)胞、HIT clone T15細(xì)胞、QGY7701細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

MKN74 Cell|人胃癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時(shí)間過長或過短：時(shí)間過長，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

NCI-H1238細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1668細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞、SKMEL-31細(xì)胞

SNU-C2A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AAV293細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞、SNU-5細(xì)胞

OCIAML3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BetaTC6細(xì)胞、GM2132細(xì)胞、HS-5細(xì)胞

Ly19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CRFK細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞、NB9細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

NCI-H1238細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1668細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞、SKMEL-31細(xì)胞

SNU-C2A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AAV293細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞、SNU-5細(xì)胞

OCIAML3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BetaTC6細(xì)胞、GM2132細(xì)胞、HS-5細(xì)胞

Ly19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CRFK細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞、NB9細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

SO-RB50細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U118-MG細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞、H-660細(xì)胞

MADB 106細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT FET細(xì)胞、KMS18細(xì)胞、KMS18細(xì)胞

Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HL-60 clone15細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞、HOK細(xì)胞

FL 62891細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HL60細(xì)胞、NCI-SNU-216細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞

OCILY-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 888Lu細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞

MCAEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM15452細(xì)胞、293T細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞

PLA802細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CaES-17細(xì)胞、HS-5細(xì)胞、CCD-19Lu細(xì)胞

OB2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Lieming Xu-2細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞、A2780細(xì)胞

PC 61 5.3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NE1-E6E7細(xì)胞、ST2細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞

RSC-96細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKRC-52細(xì)胞、769-P細(xì)胞、SUM 52PE細(xì)胞

MKN74 Cell|人胃癌細(xì)胞

293 Ad5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MO59J細(xì)胞、639V細(xì)胞、NCIADR.RES細(xì)胞

RCC10 RGB細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC1187細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞

Hs821T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ATC241細(xì)胞、HCC2279細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞

L- cell細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMR 106細(xì)胞、32D CL3細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞

Hs 739.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U138-MG細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞

JJN-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOC1細(xì)胞、CW2細(xì)胞、UMUC14細(xì)胞

JJN-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOC1細(xì)胞、CW2細(xì)胞、UMUC14細(xì)胞

NCI-H2405細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-134VI細(xì)胞、OV3121細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞

NCI-H1770細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKGIIIA細(xì)胞、HuH28細(xì)胞、TK.10細(xì)胞

Balb/c3T3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IPLB-SF 21AE細(xì)胞、DLM8細(xì)胞、BL6細(xì)胞

OVCAR-10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IAR20細(xì)胞、NK-92MI細(xì)胞、Hs 895.T細(xì)胞

MO59J細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PIG3細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞、TE7細(xì)胞

Keio University-19-19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SF539細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞

SUM-102PT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MZCRC1細(xì)胞、UWB1289細(xì)胞、D283細(xì)胞

KU-19-19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MM1.S細(xì)胞、SK-NEP-1細(xì)胞、HT細(xì)胞

ME16C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H250細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞

G361細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EBNA-293細(xì)胞、H-1755細(xì)胞、Ly10細(xì)胞

NCI-H2085細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L-6細(xì)胞、H-7721細(xì)胞、HT55細(xì)胞

OVCAR 8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCRF-CEM/S細(xì)胞、Ball 1細(xì)胞、JIMT細(xì)胞

H2286細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KU-812F細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞、SuDHL 8細(xì)胞

HuNS1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HHFK細(xì)胞、MPASMC細(xì)胞、ACHN細(xì)胞

HEK293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-343-MG細(xì)胞、HIMEC細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞

SF 126細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16/BL6細(xì)胞、BSC-1細(xì)胞、SUM102細(xì)胞

RPPVEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H209細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞、UACC893細(xì)胞

H187細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H748細(xì)胞、TE-7細(xì)胞、H2342細(xì)胞

KNS42細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MV4II細(xì)胞、HCC0095細(xì)胞、NCI-H526細(xì)胞

NHRF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：D-341 Med細(xì)胞、MB 157細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞

IPI-2I細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞、TE-14細(xì)胞

Ly18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH28細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞、P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞

MKN74 Cell|人胃癌細(xì)胞

COLO-394細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H810細(xì)胞、T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞、NBL-12細(xì)胞

T 84細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SACC83細(xì)胞、Strain L-929細(xì)胞、BCP1細(xì)胞

Hs 604.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2073細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞

MDAMB453細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-436細(xì)胞、H-1651細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞

BT 20細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-HUT-460細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞

3T3 J2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Henrietta Lacks cells細(xì)胞、RPMI 8402細(xì)胞、G-401細(xì)胞

H-1792細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Detroit 562細(xì)胞、NTERA-2 clone D1細(xì)胞、HuPT3細(xì)胞

JEKO細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-520細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞、33604細(xì)胞

B4G12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MUM2B細(xì)胞、PCI:SG231細(xì)胞、Hs-578Bst細(xì)胞

Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B10BR細(xì)胞、C-33A細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞

CAL 39細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MM1S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞、MMAc.SF細(xì)胞

HCC-1171細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF-10A細(xì)胞、LNCaP.FGC細(xì)胞、FDC-P1細(xì)胞

HCV29細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GS9L細(xì)胞、HCC-1171細(xì)胞、WEHI 164細(xì)胞

Sp 2817細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI1846細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞

LTEP-a2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：S37細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞、WRL68細(xì)胞

SupB15WT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1944細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞、ME 180細(xì)胞

MBT-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEY-A8細(xì)胞、HT-1376細(xì)胞、EC109細(xì)胞

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