"M21 Cell|人黑色素瘤細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：黑色素瘤；女性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

Hi-five細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HTh-74細(xì)胞、CAL851細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞

22Rv1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA.MB.231細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞、Farage Original Line細(xì)胞

EA. hy 926細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM190PT細(xì)胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、HL-60細(xì)胞

DF-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1184細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞

Tb 1 Lu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ChaGo-K1細(xì)胞、MMVECs細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

M21 Cell|人黑色素瘤細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

LC-1/sq細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc 10.05細(xì)胞、Scott細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞

TGHAVSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC70細(xì)胞、Hs839.T細(xì)胞、Raji細(xì)胞

MDA-MB-468細(xì)胞類似產(chǎn)品：：V79-4細(xì)胞、H82細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞

COR-L23細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CF Pac1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞、NFS 60細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

LC-1/sq細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc 10.05細(xì)胞、Scott細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞

TGHAVSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC70細(xì)胞、Hs839.T細(xì)胞、Raji細(xì)胞

MDA-MB-468細(xì)胞類似產(chǎn)品：：V79-4細(xì)胞、H82細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞

COR-L23細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CF Pac1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞、NFS 60細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

EBC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCMEC細(xì)胞、Institute for Medical Research-32細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞

Cloudman S91 melanoma細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 206細(xì)胞、CAL39細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MeWo細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞、H-520細(xì)胞

RK13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCLP1細(xì)胞、AMJ2C8細(xì)胞、H-2444細(xì)胞

Functional Liver Cell-7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OK-WT細(xì)胞、BC-3H-1細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞

SKLU01細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM 239細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞

TK-10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc 03.27細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞、Hep2細(xì)胞

NCI-H508細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293-H細(xì)胞、NCI660細(xì)胞、JVM3細(xì)胞

DMS-273細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs840_T細(xì)胞、2780細(xì)胞、201T細(xì)胞

UWB1289細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A 2780 CP細(xì)胞、Panc_05_04細(xì)胞、NCIH2081細(xì)胞

M21 Cell|人黑色素瘤細(xì)胞

WERI Rb-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LY細(xì)胞、SW1116細(xì)胞、U-343 MG細(xì)胞

M4e細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GBCSD細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞、H676B細(xì)胞

COS1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Pa14C細(xì)胞、H-1373細(xì)胞、YT細(xì)胞

NCIH1436細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞

G361-mel細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KBM-5細(xì)胞、TK-1細(xì)胞、REC 1細(xì)胞

SK-NSH細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COV-362細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞、C4-1細(xì)胞

KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1299細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞、C6細(xì)胞

KHYG1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：no-11細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞、P30OHK細(xì)胞

BC-022細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EL-4細(xì)胞、COLO 206F細(xì)胞、RPMI-7666細(xì)胞

SUM52PE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AtT-20細(xì)胞、451Lu細(xì)胞、JM1細(xì)胞

M14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK MEL-28細(xì)胞、T1-73細(xì)胞、Douglas Foster-1細(xì)胞

SW839細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RC-2細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞、SNU182細(xì)胞

HEK-293-F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：201T細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞、STO細(xì)胞

PL-12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOLT-3細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞

HHL-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PL 5細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞、LAD2細(xì)胞

SGC7901細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Daoy細(xì)胞、Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞、MDA-415細(xì)胞

293 H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RGC5細(xì)胞、NCI-H2291細(xì)胞、H-125細(xì)胞

Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH747細(xì)胞、JeKo-1細(xì)胞、NCI747細(xì)胞

C3H10T1/2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1573細(xì)胞、PCI-04B細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞

LM6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NFS 60細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞、P30-OHKUBO細(xì)胞

SK-ES1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS-5細(xì)胞、PSN1細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞

RCC10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LAPC4細(xì)胞、H2108細(xì)胞、P116細(xì)胞

P116細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MH-22a細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞

LMH細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SAOS 2細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞、NCI-H920細(xì)胞

MSTO-211細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HSC2細(xì)胞、TFK1細(xì)胞、SK.MEL.2細(xì)胞

PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2009細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞、CL11細(xì)胞

HEMCSS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：STTG1細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞、RL95細(xì)胞

TE13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1944細(xì)胞、GM05372細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞

L-M[TK-]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FRTL 5細(xì)胞、H2286細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞

M21 Cell|人黑色素瘤細(xì)胞

TPC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE-4細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞、U-373MG細(xì)胞

H-II-E-C3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：beta-TC6細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞、NE1細(xì)胞

FaDu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Farage細(xì)胞、D-407細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞

B-95-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L-cell細(xì)胞、CAMA細(xì)胞、KTC-1細(xì)胞

UCLA-SO-M14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C22細(xì)胞、NCIH1563細(xì)胞、MLE 12細(xì)胞

NCI-H508細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293-H細(xì)胞、NCI660細(xì)胞、JVM3細(xì)胞

MB-49細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT29細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞、UC-3細(xì)胞

NCI-H1734細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IEC-6細(xì)胞、SKO-007細(xì)胞、RPE1細(xì)胞

Madison細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RF/6A細(xì)胞、SF 126細(xì)胞、CBRH7919細(xì)胞

CHP212細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CTV1細(xì)胞、T-98細(xì)胞、Farage Original Line細(xì)胞

R.K.13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-134-VI細(xì)胞、Microbiological Associates-104細(xì)胞、OCI AML5細(xì)胞

COLO824細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U87MG細(xì)胞、G422細(xì)胞、H146細(xì)胞

HBL 100細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RKOE6細(xì)胞、HCT 8細(xì)胞、ZR751細(xì)胞

Cloudman M3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Dami細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞、H1650細(xì)胞

MC57細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NB19-RIKEN細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞、NPA細(xì)胞

IMR-90細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LC1細(xì)胞、WILL2細(xì)胞、MIN6細(xì)胞

SKGT4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BEND細(xì)胞、HCC15細(xì)胞、CCRF SB細(xì)胞

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