"Hs 578Bst Cell|人正常乳腺細胞

細胞背景資料：乳腺細胞

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因導致，我們該怎么進行解決？以下是國內外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。

細胞生長：貼壁

B16-F10細胞類似產(chǎn)品：：Sp2/mIL-6細胞、HEK293-A細胞、EU-4細胞

SUDHL2細胞類似產(chǎn)品：：L-M (TK-)細胞、OACP4C細胞、T98細胞

IPLB-SF-21-AE細胞類似產(chǎn)品：：SKMEL24細胞、NCI-H748細胞、Hs68細胞

RKOAS451細胞類似產(chǎn)品：：T2(174 x CEM.T2)細胞、H358細胞、NCI-H2172細胞

H19-7細胞類似產(chǎn)品：：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、JM1細胞、BNL-HCC細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

Hs 578Bst Cell|人正常乳腺細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

G-402細胞類似產(chǎn)品：：FU-MMT-1細胞、NCI-H2141細胞、MGH-U1 (EJ)細胞

RL-95-2細胞類似產(chǎn)品：：SK-ES-1細胞、Y3-Ag123細胞、SUDHL2細胞

mIMCD-3細胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR4細胞、BJA-B細胞、H1882細胞

SNU-398細胞類似產(chǎn)品：：NOZ細胞、LICR-HN-6細胞、NF639細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

G-402細胞類似產(chǎn)品：：FU-MMT-1細胞、NCI-H2141細胞、MGH-U1 (EJ)細胞

RL-95-2細胞類似產(chǎn)品：：SK-ES-1細胞、Y3-Ag123細胞、SUDHL2細胞

mIMCD-3細胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR4細胞、BJA-B細胞、H1882細胞

SNU-398細胞類似產(chǎn)品：：NOZ細胞、LICR-HN-6細胞、NF639細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調端粒酶或下調端粒酶抑制物的活性)。用含可調節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質形成細胞(Steinberg,1996) 和內皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質干細胞和其他一些細胞。

SK-GT-2細胞類似產(chǎn)品：：D-407細胞、KP-N-RT-BM-1細胞、H-774細胞

RPMI no. 8226細胞類似產(chǎn)品：：BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞

GBCSD細胞類似產(chǎn)品：：Vx2細胞、IGROV細胞、Hs 274.T細胞

EAC細胞類似產(chǎn)品：：U-373 MG細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、Swiss-3T3細胞

SK-ES-1細胞類似產(chǎn)品：：CD18/HPAF細胞、GCT細胞、N87細胞

HSC-2細胞類似產(chǎn)品：：Hs-578-T細胞、EPC細胞、MPC-11細胞

Renal Carcinoma細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP subline C4-2細胞、H9c2細胞、Hs 888.T細胞

HOP-62細胞類似產(chǎn)品：：LK2細胞、HUTU80細胞、T24細胞

NCIH1568細胞類似產(chǎn)品：：THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞

HIT clone T15細胞類似產(chǎn)品：：NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞

Hs 578Bst Cell|人正常乳腺細胞

H-226細胞類似產(chǎn)品：：RSC96細胞、CAL 62細胞、NCI-H28細胞

Hs-578-T細胞類似產(chǎn)品：：H2196細胞、OKa-C-1細胞、H-2228細胞

TCC-PAN2細胞類似產(chǎn)品：：Suzhou Human Glioma-44細胞、LMH細胞、IOSE-Van細胞

A-704細胞類似產(chǎn)品：：CEM C7細胞、HCV29細胞、NCI-H676B細胞

BV173細胞類似產(chǎn)品：：RGC-5細胞、RBL.2H3細胞、HS-445細胞

HTori-3.1細胞類似產(chǎn)品：：BEL-7405細胞、TEC細胞、P3HR-1細胞

NSC34細胞類似產(chǎn)品：：NTera 2/cl.D1細胞、H.Ep. #2細胞、LC1-Sq細胞

RCC10細胞類似產(chǎn)品：：LAPC4細胞、H2108細胞、P116細胞

PLC-PRF-5細胞類似產(chǎn)品：：NCIH345細胞、DU 4475細胞、207細胞

EBNA293細胞類似產(chǎn)品：：HSC-I細胞、OV-1063細胞、MiaPaCa2細胞

HCC-2108細胞類似產(chǎn)品：：Human Embryonic Skin細胞、N-9細胞、KYSE-520細胞

CHO/dhFr-細胞類似產(chǎn)品：：MDBK細胞、NOK細胞、HT 115細胞

RBL-I細胞類似產(chǎn)品：：PFSK1細胞、B16細胞、Institute for Medical Research-32細胞

SK.MEL.5細胞類似產(chǎn)品：：Co 115細胞、HCT.116細胞、PLA801C細胞

SHIN-3細胞類似產(chǎn)品：：Ball 1細胞、N2a細胞、HTR8細胞

SCC154細胞類似產(chǎn)品：：Plaepi 34細胞、VM-CUB1細胞、BHT101細胞

GAK細胞類似產(chǎn)品：：RSC-364細胞、C-28I2細胞、SVEC4-10細胞

Caco2BBe細胞類似產(chǎn)品：：Tn-5B1-4細胞、OVCAR4細胞、LS174T細胞

HCT-116細胞類似產(chǎn)品：：TGW-I-nu細胞、HS 1.Tes細胞、HCET細胞

RA細胞類似產(chǎn)品：：T47D細胞、NCIH2291細胞、MV522細胞

C4 I細胞類似產(chǎn)品：：Alexander cells細胞、CWR-22rv1細胞、CC-LP-I細胞

CA46細胞類似產(chǎn)品：：H-69細胞、C22 (Clara)細胞、Kasumi-6細胞

Capan-2細胞類似產(chǎn)品：：H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞

786-0細胞類似產(chǎn)品：：NCIH716細胞、TOG細胞、NCIH2291細胞

143B細胞類似產(chǎn)品：：JVM2細胞、Hs-695-T細胞、V 79-4細胞

JAR細胞類似產(chǎn)品：：SkChA-1細胞、BL1339細胞、HEL-92.1.7細胞

CEMC7細胞類似產(chǎn)品：：HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞

Calu3細胞類似產(chǎn)品：：PY8119細胞、CV1細胞、TM3細胞

NCI-H2291細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1299細胞、OCI-LY-19細胞、H1435細胞

Hs 578Bst Cell|人正常乳腺細胞

UCLA-SO-M14細胞類似產(chǎn)品：：C22細胞、NCIH1563細胞、MLE 12細胞

GM15452細胞類似產(chǎn)品：：Hs 343.T細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、COLO 320細胞

CEM-CCRF細胞類似產(chǎn)品：：PLC-8024細胞、A7r5細胞、COLO 320HSR細胞

P560細胞類似產(chǎn)品：：HuT-78細胞、H889細胞、OVCAR-10細胞

SAOS 2細胞類似產(chǎn)品：：EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞

SU 86.86細胞類似產(chǎn)品：：UWB1.289細胞、HEK-293 c18細胞、Hs840_T細胞

ECC-12細胞類似產(chǎn)品：：RCC10細胞、SCL1細胞、Lec1細胞

SK-N-BE(2)-M17細胞類似產(chǎn)品：：MAntle cell VERona-1細胞、Mono-Mac-1細胞、J111細胞

hSCC-25細胞類似產(chǎn)品：：SF 295細胞、K1735細胞、HDF-a細胞

H841細胞類似產(chǎn)品：：B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞

SU-DHL-8細胞類似產(chǎn)品：：CII細胞、HMrSV5細胞、MCA38細胞

BNL 1MEA.7R.1細胞類似產(chǎn)品：：CHO K1細胞、SF17細胞、NCTC 1469細胞

7860細胞類似產(chǎn)品：：HPAF II細胞、IMR90細胞、RS411細胞

PC-9細胞類似產(chǎn)品：：CWR-22rv1細胞、V79-GalK1細胞、JJN3細胞

TALL-104細胞類似產(chǎn)品：：Mino細胞、LTEP-sm 1細胞、HEK-293-EBNA細胞

MDA-175細胞類似產(chǎn)品：：Tn-5細胞、KY180細胞、M4e細胞

MOLT 3細胞類似產(chǎn)品：：BC-009細胞、OAW-42細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞

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