"HIC Cell|人小腸癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：小腸癌

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱(chēng)之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀(guān)察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿(mǎn)器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

AU565細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BV2細(xì)胞、COLO-741細(xì)胞、RL-952細(xì)胞

HEY-A8細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H1395細(xì)胞、D10細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞

SNU-620細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：DoHH2細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞、Hs 840.T細(xì)胞

SJCRH30細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SBC-3細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞、TM3細(xì)胞

SK-ES1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPMI 1788細(xì)胞、hTERT-HPNE細(xì)胞、RIN Cl-5F細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

HIC Cell|人小腸癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶(hù)遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OCI-LY-10細(xì)胞、JEG3細(xì)胞、HBVP細(xì)胞

Panc_03_27細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：A2780/Taxol細(xì)胞、Strain KB細(xì)胞、GP293細(xì)胞

RPPVEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H209細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞、UACC893細(xì)胞

KALS-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RA 1細(xì)胞、SUDHL1細(xì)胞、OVCA433細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OCI-LY-10細(xì)胞、JEG3細(xì)胞、HBVP細(xì)胞

Panc_03_27細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：A2780/Taxol細(xì)胞、Strain KB細(xì)胞、GP293細(xì)胞

RPPVEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H209細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞、UACC893細(xì)胞

KALS-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RA 1細(xì)胞、SUDHL1細(xì)胞、OVCA433細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類(lèi)或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類(lèi)動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

JIMT-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TFK1細(xì)胞、H-1568細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞

UPCI-SCC-90細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OCI AML4細(xì)胞、SU-DHL-10細(xì)胞、HCCC-9810細(xì)胞

251MG細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs-578T細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞、HN 4細(xì)胞

JM-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPMI No. 1846細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞、H7721細(xì)胞

SJSA細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CAL 12T細(xì)胞、MHCC-LM3細(xì)胞、Th17細(xì)胞

CP-70細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MHCC97-H細(xì)胞、SNU-5細(xì)胞、UMC-11細(xì)胞

IMCD3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：P560細(xì)胞、MKN-1細(xì)胞、NCI-H2052細(xì)胞

NCIH1975細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SW 480細(xì)胞、Tb 1 Lu細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞

COLO320-DM細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HuO9細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞

T98細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SUPB-15細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞、MV-4-11細(xì)胞

HIC Cell|人小腸癌細(xì)胞

HNE2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SKN-AS細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞

MDA-MB468細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDA MB 453細(xì)胞、A375S2細(xì)胞、U-343MG細(xì)胞

NIH 3T3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：AR42J細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞

HUC-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H187細(xì)胞、Astrocyte type I clone細(xì)胞、TE-12細(xì)胞

149 PT細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs 578T細(xì)胞、H-9細(xì)胞、SNU878細(xì)胞

NCTC-929細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SW1417細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞

NCTC-929細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SW1417細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞

NCIH2029細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：16-HBE細(xì)胞、CFPAC1細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞

AR41P細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SW527細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、EC-GI-10細(xì)胞

NCI-H1666細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞、GM02131細(xì)胞

OSC-19細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BE2_C細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞、CL 1-0細(xì)胞

Jeko1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Mel-RM細(xì)胞、MMVECs細(xì)胞、ChaGo-K1細(xì)胞

VP229細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SW-1222細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞

NCIH889細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LS180細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞

BNL-HCC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Walker 256細(xì)胞、Vero細(xì)胞、QGY細(xì)胞

BMF細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TK10細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞、N9細(xì)胞

BGC823細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KM12SM細(xì)胞、Hep G2/C3A細(xì)胞、MLMA細(xì)胞

HIT T-15細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CORL23細(xì)胞、SGC 7901細(xì)胞、SK RC 20細(xì)胞

U-138MG細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NS-20Y細(xì)胞、PC-9S1細(xì)胞、HFTF細(xì)胞

OCI-Ly8細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：FRTL5細(xì)胞、LCMS細(xì)胞、NCI-H69細(xì)胞

H1650_CO細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNGM細(xì)胞、SW948細(xì)胞、H295R細(xì)胞

NK92細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HSC5細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞、N1S1細(xì)胞

Ej138細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hi5細(xì)胞、MB-49細(xì)胞、G422細(xì)胞

Anip[973]細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：B16BL6細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞

SU.86細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TCam-2細(xì)胞、IGROV1細(xì)胞、HPAF-I細(xì)胞

COLO-16細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OUMS27細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、SW900細(xì)胞

Saos2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BHK21細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞、RH-30細(xì)胞

H-1436細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PNT1/A細(xì)胞、SUM-52-PE細(xì)胞、Hca-F細(xì)胞

SVGp12細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-2066細(xì)胞、SW-1573細(xì)胞、TE354T細(xì)胞

HIC Cell|人小腸癌細(xì)胞

WM266-4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MeT 5A細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞

OCI-Ly 1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TE8細(xì)胞、RGCs細(xì)胞、A549 ATCC細(xì)胞

CWR-22rv1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-929細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞、DF-1細(xì)胞

NIH:OVCAR-4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HTori:3細(xì)胞、HLE-B3細(xì)胞、ECC-1細(xì)胞

HUT-125細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HEL-92_1_7細(xì)胞、hTERT-RPE-1細(xì)胞、VeroE6細(xì)胞

MEG01細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OVCAR4細(xì)胞、Hs706T細(xì)胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞

GA-10(Clone 4)細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：hTERTHME1細(xì)胞、UCH1細(xì)胞、MKN-45細(xì)胞

SKOV3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDA 1386細(xì)胞、3T3-L1細(xì)胞、SW-1088細(xì)胞

Clone 15 HL-60細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs-578Bst細(xì)胞、CW-2細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞

FF-WT-BJ細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：hTERT-HPNE細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞、H-4細(xì)胞

PLA801D細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：P388-D1細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞

Henrietta Lacks cells細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：IM 9細(xì)胞、OVHM細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞

HPF細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：2B4-L細(xì)胞、SVHUC細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞

Epstein-Barr-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HIT T-15細(xì)胞、HCC1359細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞

GDM-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MCF7-GFP細(xì)胞、B16 melanoma F10細(xì)胞、UWB1289細(xì)胞

NSC-34細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CMK細(xì)胞、FRhK-4細(xì)胞、SKRC 39細(xì)胞

Mv1Lu細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：P3X63-Ag8.653細(xì)胞、KU-812細(xì)胞、BIU-87細(xì)胞

"