"FHC Cell|人正常結直腸粘膜細胞
細胞背景資料:胎兒;結腸;自發(fā)永生;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結】原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態(tài)不HAO,邊緣不清楚,細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細胞站YOU勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長,Zui終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞),37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài),所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結果。1)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內的水應是三蒸水;2)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素;3)超凈臺的風機不能過大,風機到6-8格。否則也可能能致霉菌污染;4)無菌室經甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的噴灑中和,約幾小時即可進入操作。
細胞生長:貼壁
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細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
FHC Cell|人正常結直腸粘膜細胞
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)更HAO經驗詳解:1)收到細胞,首先要鏡檢:觀察細胞形態(tài)是否正常,對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很HAO,觀察細胞密度,有疑議及時咨提供細胞的技術人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化,很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會發(fā)生大片的脫落,細胞聚集在一起,但是細胞生長還是正常的,通過離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察,細胞初步沒有問題時,進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時,則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下,會調整為靜止期,或者慢速生長期,恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右,才能重新調整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài),在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率,和細胞的存活率。3)如果經步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%,并且細胞狀態(tài)很HAO時,則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶;對于生長較慢,細胞比較薄,狀態(tài)容易波動的細胞類型,一次少傳些,每瓶細胞密度大些,便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞,次處理也可以依照第二種情況。
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細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
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細胞生長特性:貼壁
細胞培養(yǎng)試劑也依據(jù)不同細胞類型來選擇:細胞培養(yǎng)試劑的種類很多并且不同試劑與不同細胞能產生的反應效果也不一樣。因此選擇試劑時要有針對性的根據(jù)細胞源進行匹配,才能起到良HAO的試驗效果并能保障順利完成實驗。選擇了相互匹配性HAO的細胞培養(yǎng)試劑不但有利于科研人員的研發(fā)分析,還可以提GAO培養(yǎng)的效率并保障達到培養(yǎng)的成功率??偠灾?,對于選擇細胞培養(yǎng)試劑來說需要根據(jù)實驗的要求來進行合理的挑選匹配,只有采用了匹配度效果理想的試劑才能保障能順利的通過實驗,并避免對各種試劑材料及時間造成浪費。而且還要選擇口碑HAO的細胞培養(yǎng)試劑才能保障材料的YOU質性,并能達到成功配置試劑的目的有效完成不同細胞培養(yǎng)計劃。
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FHC Cell|人正常結直腸粘膜細胞
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關鍵字: FHC Cell|人正常結直腸粘膜細胞;
上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。