"MEC-1 Cell|人粘液表皮樣癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：粘液表皮樣癌

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進(jìn)行解決？以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對數(shù)期。

細(xì)胞生長：貼壁

LICCF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Emory University-3細(xì)胞、DB細(xì)胞、EJ1細(xì)胞

PCI-4B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GDM-1細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞、NCI-H165細(xì)胞

NS20-Y細(xì)胞類似產(chǎn)品：：F442-A細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞、H.Ep. #2細(xì)胞

Lu-99A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3X63 Ag8細(xì)胞、P388.D1細(xì)胞、BC3 H1細(xì)胞

A1847細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ONS76細(xì)胞、HNE-2細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

MEC-1 Cell|人粘液表皮樣癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時(shí)間過長或過短：時(shí)間過長，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

BE(2)M17細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mhh-Call 2細(xì)胞、MPP-89細(xì)胞、Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞

MLMA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H727細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞、SW1417細(xì)胞

COLO320DM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GC-1spg細(xì)胞、HFF細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞

R-1059-D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DanG細(xì)胞、C41細(xì)胞、RBL-1細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

BE(2)M17細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mhh-Call 2細(xì)胞、MPP-89細(xì)胞、Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞

MLMA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H727細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞、SW1417細(xì)胞

COLO320DM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GC-1spg細(xì)胞、HFF細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞

R-1059-D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DanG細(xì)胞、C41細(xì)胞、RBL-1細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

AsPC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF12A細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞、LSECs細(xì)胞

Cor L51細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NU-GC-3細(xì)胞、8305C細(xì)胞、MeSoTheliOma-211H細(xì)胞

MDST8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2286細(xì)胞、A-704細(xì)胞、MBdSMC細(xì)胞

NCIH1623細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MRC5細(xì)胞、PLA801-95D細(xì)胞、HRA19細(xì)胞

Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HBL 100細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞

SCC VII細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AN3-CA細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、MFE296細(xì)胞

SUM-149細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RAMOS2G64C10細(xì)胞、HMEC-1細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞

XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM 2132細(xì)胞、MFE 280細(xì)胞、R D細(xì)胞

IMR-32細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BpRcl細(xì)胞、SKNF1細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞

CT26-clone 25細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MRCV細(xì)胞、Hce8693細(xì)胞、SF 539細(xì)胞

MEC-1 Cell|人粘液表皮樣癌細(xì)胞

SKMEL2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tca-83細(xì)胞、SW1353細(xì)胞、GM04679細(xì)胞

TGW-nu-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hep2細(xì)胞、SW 626細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞

H2291細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RGC-6細(xì)胞、H841細(xì)胞、HCV-29細(xì)胞

Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT-8細(xì)胞、Human Embryo Lung-1細(xì)胞、LLC-PK(1)細(xì)胞

NTera 2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：N1E115細(xì)胞、NK62a細(xì)胞、NCI-H295細(xì)胞

MUVEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCC-25細(xì)胞、MOLT-3細(xì)胞、SNB19細(xì)胞

MUVEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCC-25細(xì)胞、MOLT-3細(xì)胞、SNB19細(xì)胞

SMMC 7721細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EBNA293細(xì)胞、NCIH1792細(xì)胞、H2347細(xì)胞

Gerner 7666細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 821.T細(xì)胞、RT 112細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞

DSL6A/C1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞

GOS3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH660細(xì)胞、H-28細(xì)胞、LAN-1細(xì)胞

Tn 5B1-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2029細(xì)胞、OV1/P細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞

hTERT RPE1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI-8226細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞、H-2108細(xì)胞

RMS 13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1793細(xì)胞、EBC1細(xì)胞、LC-1Sq細(xì)胞

ARO 81-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FHCRC-11細(xì)胞、MV-3細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞

Caco-2 BBe細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI 6666細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞

Karpas-299細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCM細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞

GM346細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LN 229細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞

NCI-SNU-520細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM-159細(xì)胞、H-2029細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞

NK-92細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WPMY1細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞

XWLC-05細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1770細(xì)胞、V79-1細(xì)胞、Hela-mock細(xì)胞

U-CH1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL33細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞、CT26WT細(xì)胞

L6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKCO 1細(xì)胞、DU4475細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞

Mel-RM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDAMB436細(xì)胞、DR2R1610細(xì)胞、SCC 4細(xì)胞

KMY1022細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCILY-19細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞、HCC0095細(xì)胞

SU-DHL-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KTA7細(xì)胞、KOSC-2 cl3-43細(xì)胞、Rainbow Trout Embryo細(xì)胞

T98-G細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-28細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞、OV1/P細(xì)胞

PLB-985細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H676細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞、KMH2細(xì)胞

BEL 7404細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Colo205細(xì)胞、JiyoyeP-2003細(xì)胞、HIMEC細(xì)胞

MEC-1 Cell|人粘液表皮樣癌細(xì)胞

NCIH1105細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ST 486細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞、H-1299細(xì)胞

SW-962細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2126細(xì)胞、Jiyoye (P-2003)細(xì)胞、CFPAC1細(xì)胞

Walker 256細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞、GBC-SD細(xì)胞、BHP 10-3細(xì)胞

HUT 125細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LTEP a2細(xì)胞、TPC1細(xì)胞、SW260細(xì)胞

3T3-L1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NS1-Ag 4/1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞

CEM-T4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB 468細(xì)胞、OCI-AML-2細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞

HUVEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QG-56細(xì)胞、HCC0078細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞

WM-239A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE 410細(xì)胞、BRL-3A細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞

WM-239A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE 410細(xì)胞、BRL-3A細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞

OVCA 432細(xì)胞類似產(chǎn)品：：YES2細(xì)胞、NT-2細(xì)胞、HOC細(xì)胞

NCIH1915細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW260細(xì)胞、293細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞

H2227細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ARPE19細(xì)胞、TW01細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞

Pa17C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-345細(xì)胞、2B4-L細(xì)胞、HT 1197.T細(xì)胞

SNU-475細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 10細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞

H1568細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MSTO-211細(xì)胞、NCIH1694細(xì)胞、H-676細(xì)胞

MHCC97H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Melanoma 14細(xì)胞、M-O7e細(xì)胞、H2030細(xì)胞

95D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCUM-1細(xì)胞、C4-2細(xì)胞、NTHY-ORI3.1細(xì)胞

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