"C127 Cell|小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞接收操作說(shuō)明：請(qǐng)仔細(xì)閱讀本操作說(shuō)明及相應(yīng)的細(xì)胞說(shuō)明書(shū)。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會(huì)用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長(zhǎng)期經(jīng)驗(yàn)來(lái)說(shuō)，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(Zui主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個(gè)人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開(kāi)包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用，如細(xì)胞密度GAO于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時(shí)T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話(huà)，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來(lái)再換大的，不然會(huì)長(zhǎng)得很慢，嚴(yán)重的，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn))，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

H4-II-EC3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SUM-190細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞、T241細(xì)胞

MDAMB361細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HuH-6細(xì)胞、Hs606細(xì)胞、SEM細(xì)胞

NE1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LS 180細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞、FOXNY細(xì)胞

SUSM1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SW 527細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞

OCI Ly19細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPMI 1846細(xì)胞、Jurkat clone A3細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

C127 Cell|小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞鋪板大概是我們Zui常見(jiàn)的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻：要么中間密周?chē)?，要么周?chē)苤虚g禿。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤(rùn)洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長(zhǎng)消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開(kāi)一點(diǎn)孔底即可，不要離底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)（逆時(shí)針效果不HAO），依次敲擊剩余三個(gè)邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個(gè)孔加入少量無(wú)血清培養(yǎng)基，晃動(dòng)浸潤(rùn)整個(gè)孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤(rùn)孔底，其它孔依此類(lèi)推，這樣整個(gè)孔底都是濕潤(rùn)的，細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒(méi)有96孔板HAO掌握，效果沒(méi)有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細(xì)胞以后(比如傳代HAO/分HAO細(xì)胞以后)，先順時(shí)針搖晃3次，馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X(jué)軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X(jué)軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。

HKBML細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HL-1細(xì)胞、8226細(xì)胞、SW 962細(xì)胞

MDAMB435細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCIH647細(xì)胞、PTK1細(xì)胞、UACC 812細(xì)胞

SKNEP1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PG-LH7細(xì)胞、BV173細(xì)胞、HT3細(xì)胞

RD-2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs 675.T細(xì)胞、MDA453細(xì)胞、MES-13細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

HKBML細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HL-1細(xì)胞、8226細(xì)胞、SW 962細(xì)胞

MDAMB435細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCIH647細(xì)胞、PTK1細(xì)胞、UACC 812細(xì)胞

SKNEP1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PG-LH7細(xì)胞、BV173細(xì)胞、HT3細(xì)胞

RD-2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs 675.T細(xì)胞、MDA453細(xì)胞、MES-13細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類(lèi)或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類(lèi)動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

TE13細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H1944細(xì)胞、GM05372細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞

HOC-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SCC 25細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、H-2023細(xì)胞

MDBK細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：ECC10細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞

PL-9細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：IOSE-29細(xì)胞、NCIH508細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞

FU-97細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCl-H157細(xì)胞、MAD109細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞

MESSA/Dx5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KM12-SM細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞、MEG01細(xì)胞

NCI-ADR-RES細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞、RPMI1846細(xì)胞、WEHI164細(xì)胞

CL-11細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、MGH-U3 (RN)細(xì)胞、RC13細(xì)胞

SF 539細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNU739細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞、NH6細(xì)胞

Farage細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NRK clone 52E細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞、H-1522細(xì)胞

C127 Cell|小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞

UCD-MLA-144細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SW-900細(xì)胞、L132細(xì)胞、SK MEL 5細(xì)胞

RPMI8402細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：C-33 A細(xì)胞、MDCC MSB1細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞

AU-565細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LCLC-103H細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞、Panc04.03細(xì)胞

HCC941122細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H1963細(xì)胞、Blotchy fibroblast-11細(xì)胞、H-1793細(xì)胞

FM-88細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KM H-2細(xì)胞、MC26細(xì)胞、N1E115細(xì)胞

EoL-1-cell細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BRL細(xì)胞、H-1048細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞

EoL-1-cell細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BRL細(xì)胞、H-1048細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞

MDA453細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：EMT-6細(xì)胞、CEM clone 7細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞

RPMI2650細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H747細(xì)胞、HEC-1-A細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞

NCI-H2228細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HEM細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞、Jiyoye(P-2003)細(xì)胞

KGN細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SO-RB50細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞

QG56細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：EVSA/T細(xì)胞、U-343MG細(xì)胞、Neuro2a細(xì)胞

NCI-H2342細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：174xCEM.T2細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞、hEEC細(xì)胞

LIPF178C細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NEC8細(xì)胞、GM04154細(xì)胞、C41細(xì)胞

KYSE0520細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Caki-1細(xì)胞、RM-1細(xì)胞、S16細(xì)胞

Caco 2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HEM-L細(xì)胞、hSCC-25細(xì)胞、FRO細(xì)胞

Panc327細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KPL-1細(xì)胞、BEL-7402細(xì)胞、COLO-320HSR細(xì)胞

GH 3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HLCL9B10細(xì)胞、SP-2/0-AG14細(xì)胞、SU-DHL2細(xì)胞

NRK 52E細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OVCAR8細(xì)胞、Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、GC-1細(xì)胞

NCI-H1105細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H1694細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞

PK15細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：WM 2664細(xì)胞、HEC151細(xì)胞、Mel RM細(xì)胞

CCD-33Co細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HMC細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞

BE(2)M17細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Mhh-Call 2細(xì)胞、MPP-89細(xì)胞、Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞

BE(2)M17細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Mhh-Call 2細(xì)胞、MPP-89細(xì)胞、Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞

Hs 840.T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SUIT-2細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞、Human Liver-7702細(xì)胞

NCI-H295細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCIH2141細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞

USMC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：UT7細(xì)胞、Hs 840.T細(xì)胞、HEK-293-F細(xì)胞

SNU182細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：U266細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞

Human podocyte細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：L(TK-)細(xì)胞、ECC12細(xì)胞、Daoy細(xì)胞

C127 Cell|小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞

UO-31細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Human Kidney-2細(xì)胞、PC2細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞

Danio rerio Gill細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SKG-3a細(xì)胞、343MG細(xì)胞、FHs74Int細(xì)胞

MDA-MB-175細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：293T/17細(xì)胞、MDA-MB-453細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞

Alexander cells細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HEK 293 c18細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞、CAL 85-1細(xì)胞

HT(H9)細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Jurkat E6-1細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞、CG-4細(xì)胞

MeT-5A細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：A-549細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞

SMC-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：GM07404A細(xì)胞、FRTL5細(xì)胞、Caki-2細(xì)胞

HOS/MNNG細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-2347細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞

HOS/MNNG細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-2347細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞

COLO 684細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-SNU-620細(xì)胞、AtT-20細(xì)胞、SKMEL2細(xì)胞

SPC-A1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H548細(xì)胞、NCIH1793細(xì)胞、HMEC-1細(xì)胞

RL95細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MMVECs細(xì)胞、P30/0HK細(xì)胞、OCI/AML-2細(xì)胞

ketr 3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HTSMC細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞、OVCAR 4細(xì)胞

Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TMK-1細(xì)胞、Ramos.2G6.4C10細(xì)胞、COLO 206F細(xì)胞

IPLB-Sf21-AE細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNU1細(xì)胞、H-1648細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞

NMCG1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HBVSMC細(xì)胞、SaOS-2細(xì)胞、HEK-EBNA細(xì)胞

ECC1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、GM-3573細(xì)胞、DKMG細(xì)胞

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