"OP9 Cell|小鼠骨髓基質(zhì)細胞

細胞背景資料：骨髓基質(zhì)；C５７BL/６ x C３H

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

Hs746-T細胞類似產(chǎn)品：：DU 4475細胞、NCI-H2126細胞、KY-270細胞

University of Arizona Cell Culture-893細胞類似產(chǎn)品：：GM2132細胞、624 MEL細胞、CCD 1112SK細胞

Sup T-1細胞類似產(chǎn)品：：NTERA-2 cl.D1細胞、UACC-893細胞、KPNRTBM1細胞

H766T細胞類似產(chǎn)品：：Hs27細胞、SKMel-28細胞、HSF2細胞

MDAMB134VI細胞類似產(chǎn)品：：BSC1細胞、SUDHL2細胞、Lec1細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

OP9 Cell|小鼠骨髓基質(zhì)細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到Zui低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良HAO的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

LTEP-sm細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H146細胞、293/EBNA細胞、HFL-I細胞

CCD-33Co細胞類似產(chǎn)品：：HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞

V-79細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-5細胞、H9細胞、SKM1細胞

SUNE1細胞類似產(chǎn)品：：GM06141B細胞、NCIH1930細胞、NCIH446細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

LTEP-sm細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H146細胞、293/EBNA細胞、HFL-I細胞

CCD-33Co細胞類似產(chǎn)品：：HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞

V-79細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-5細胞、H9細胞、SKM1細胞

SUNE1細胞類似產(chǎn)品：：GM06141B細胞、NCIH1930細胞、NCIH446細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認(rèn)為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

NK92細胞類似產(chǎn)品：：HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞

RIN14B細胞類似產(chǎn)品：：CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞

HCC 38細胞類似產(chǎn)品：：NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞

AU-Mel細胞類似產(chǎn)品：：RKO-AS45-1細胞、B 95-8細胞、NCI-157細胞

MCF.10A細胞類似產(chǎn)品：：HEP-3B2細胞、P1-Raji細胞、F442A細胞

K562/ADR細胞類似產(chǎn)品：：LCMS細胞、PG-4細胞、HSC-I細胞

NTHY-ORI3.1細胞類似產(chǎn)品：：hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞

C4-2B細胞類似產(chǎn)品：：H-II-E-C3細胞、FRO81-2細胞、LCD細胞

Panc813細胞類似產(chǎn)品：：Vero-E6細胞、HPB-ALL細胞、SuDHL 2細胞

SK-N-SH細胞類似產(chǎn)品：：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、DMS-79細胞、STC-1細胞

OP9 Cell|小鼠骨髓基質(zhì)細胞

H-508細胞類似產(chǎn)品：：LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞

MIA-PaCa-2細胞類似產(chǎn)品：：Dakiki細胞、HSC3細胞、HCPEpiC細胞

VP229細胞類似產(chǎn)品：：SW-1222細胞、HUT 226細胞、OCM-1A細胞

LN-229細胞類似產(chǎn)品：：RGCs細胞、786-0細胞、hSCC-25細胞

BC-027細胞類似產(chǎn)品：：MOVAS細胞、SW 620細胞、CT-26 WT細胞

MT2細胞類似產(chǎn)品：：HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞

MT2細胞類似產(chǎn)品：：HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞

MHH-CALL2細胞類似產(chǎn)品：：D-283MED細胞、W133細胞、BE(2)-C細胞

Hep2細胞類似產(chǎn)品：：H-660細胞、hFOB1.19細胞、LICR-LON-HN6-R細胞

C666-1細胞類似產(chǎn)品：：AM細胞、WI-38細胞、AU-Mel細胞

Jiyoye細胞類似產(chǎn)品：：ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞

Ramos細胞類似產(chǎn)品：：CAL51細胞、PC-9細胞、C32 mel細胞

HEC-1B細胞類似產(chǎn)品：：HPB/ALL細胞、SW-982細胞、H226細胞

NCIH1435細胞類似產(chǎn)品：：CHG-5細胞、293-GP細胞、JIII細胞

HCC2935細胞類似產(chǎn)品：：GLC82細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、OC-3-VGH細胞

SUM-52細胞類似產(chǎn)品：：AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞

H-1650細胞類似產(chǎn)品：：IPLB-SF 21細胞、DAKIKI Clone 1細胞、U 266細胞

Caco-2BBe細胞類似產(chǎn)品：：SW 954細胞、SCC-9細胞、NCI-H2141細胞

2PK3細胞類似產(chǎn)品：：NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞

P3-NS1/1Ag 4.1細胞類似產(chǎn)品：：SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞

2E8細胞類似產(chǎn)品：：HCT 8細胞、U-87細胞、SKUT1細胞

Hs870T細胞類似產(chǎn)品：：JG細胞、NCI-H748細胞、SK-MEL-1細胞

Lu-165細胞類似產(chǎn)品：：HEY A8細胞、HuO9細胞、HCC 70細胞

GM2131細胞類似產(chǎn)品：：RT-112細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、PIEC細胞

HPAF-II細胞類似產(chǎn)品：：Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞

A704細胞類似產(chǎn)品：：VP229細胞、HFLS細胞、Hs606細胞

MDA 435細胞類似產(chǎn)品：：SP2細胞、A-375.S2細胞、T47D細胞

NCI-H157細胞類似產(chǎn)品：：Tu 212細胞、SUD4細胞、CAL 12T細胞

HCC44細胞類似產(chǎn)品：：NCIH358細胞、SF295細胞、ME1細胞

OP9 Cell|小鼠骨髓基質(zhì)細胞

H209細胞類似產(chǎn)品：：HN6細胞、SKHEP1細胞、SPCA1細胞

MDA436細胞類似產(chǎn)品：：UMR106細胞、HCE-T細胞、Anip 973細胞

Rat Chondrosarcoma Swarm細胞類似產(chǎn)品：：HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞

VMRC-LCD細胞類似產(chǎn)品：：M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞

NCI-H-295細胞類似產(chǎn)品：：KM932細胞、LN-229細胞、NCCIT細胞

GC-2細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR 4細胞、C57/B6-L細胞、TSCC1細胞

Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞類似產(chǎn)品：：PG-4細胞、MESSA-DX5細胞、RCC4細胞

TE-1細胞類似產(chǎn)品：：OC316細胞、Sf-21細胞、HCC-1395細胞

NCIH2073細胞類似產(chǎn)品：：BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞

P388細胞類似產(chǎn)品：：KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞

BEAS2B細胞類似產(chǎn)品：：JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞

NR8383.1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH520細胞、COC1/CDDP細胞、A2058細胞

H-446細胞類似產(chǎn)品：：U251-MG細胞、Hs 888.T細胞、A9(Hamprecht)細胞

HT-144細胞類似產(chǎn)品：：RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞

TF-1細胞類似產(chǎn)品：：Chang liver細胞、Alexander cells細胞、hTERT RPE1細胞

A2058細胞類似產(chǎn)品：：SW-480細胞、AMC-HN8細胞、A7r5細胞

18G3.cl 1細胞類似產(chǎn)品：：SNU-216細胞、NCI H157細胞、SKGIIIA細胞

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