"HEK293T/17 Cell|人胚腎細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：胚腎；５型腺病毒及SV４０轉(zhuǎn)化；女性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е拢覀冊(cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

HEK293-F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3-X63Ag8.653細(xì)胞、SKG3A細(xì)胞、B4G12細(xì)胞

NCIH23細(xì)胞類似產(chǎn)品：：mIMCD-3細(xì)胞、RL細(xì)胞、H64細(xì)胞

RCC10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LAPC4細(xì)胞、SCC25細(xì)胞、H-1651細(xì)胞

BDCM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML2細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞、NHEK細(xì)胞

rHSC-99細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WEHI 3細(xì)胞、A 72細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HEK293T/17 Cell|人胚腎細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

NHA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MPP-89細(xì)胞、CNE細(xì)胞、NIE 115細(xì)胞

WEHI 3B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tca-8113細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞

TE-3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 741細(xì)胞、GM06141B細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞

3T3-L1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NS1-Ag 4/1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

NHA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MPP-89細(xì)胞、CNE細(xì)胞、NIE 115細(xì)胞

WEHI 3B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tca-8113細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞

TE-3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 741細(xì)胞、GM06141B細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞

3T3-L1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NS1-Ag 4/1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞傳代比例：對(duì)于有限細(xì)胞系，傳代時(shí)以二、四、八或十六倍(傳代比率分別是2、4、8和16)降低細(xì)胞密度，計(jì)算群體倍增數(shù)更容易(即分別是傳代比率2對(duì)應(yīng)1次倍增，4對(duì)應(yīng)2次倍增，8對(duì)應(yīng)3次倍增，16對(duì)應(yīng)4次倍增)；例如，一傳八的培養(yǎng)物需要3次倍增才能達(dá)到原來相同的細(xì)胞密度。脆弱的或生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞系通常一傳二，而有活力的，生長(zhǎng)快速的細(xì)胞系可以一傳八，甚至一傳十六。有些連續(xù)細(xì)胞系可一傳五十或一傳100。一旦細(xì)胞系變?yōu)檫B續(xù)細(xì)胞系(通常經(jīng)過150次或200次倍增以上)，細(xì)胞濃度是主要參數(shù)，培養(yǎng)濃度應(yīng)降至10(4)/ml--10(5)/ml之間。可選擇傳代間隔合適的傳代比率或稀釋度，或許為1周或2周，同時(shí)要保證：細(xì)胞密度不可稀釋過低，使其延遲期合理(在24小時(shí)以內(nèi))，可重新進(jìn)入生長(zhǎng)周期；而且在下次傳代前不進(jìn)人平臺(tái)期。

NCI-322細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2171細(xì)胞、H226細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞

OCM1A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：686LN-M4e細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞

OCI AML2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MKN-45細(xì)胞、SUNE1細(xì)胞、GM00346B細(xì)胞

HT-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE353.SK細(xì)胞、SK-N-BE2細(xì)胞、WM-239細(xì)胞

RMS 13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1793細(xì)胞、EBC1細(xì)胞、LC-1Sq細(xì)胞

HT144-mel細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA MB 436細(xì)胞、C6細(xì)胞、IHH細(xì)胞

NOZC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：F442A細(xì)胞、MFE-280細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞

H929細(xì)胞類似產(chǎn)品：：639 V細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞、NOK細(xì)胞

HuTu-80細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞

NCI-SNU-1040細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DHL-2細(xì)胞、NIE 115細(xì)胞、H-1417細(xì)胞

HEK293T/17 Cell|人胚腎細(xì)胞

BJ1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、T241細(xì)胞、NCI-H510A細(xì)胞

H-7721細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TSU-Pr1細(xì)胞、TGBC-11-TKB細(xì)胞、HEp-2細(xì)胞

Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LIM 1215細(xì)胞、HMC-1細(xì)胞、HuH28細(xì)胞

MKN 28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AG06814-N細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞

FET細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CTLL-2細(xì)胞、N-Tera-2細(xì)胞、H-1563細(xì)胞

HCEpiC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C2BBe1細(xì)胞、Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞

CF PAC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WSU-DLCL(2)細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞、TE12細(xì)胞

NRK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DC2.4細(xì)胞、Sp2/O-Ag14細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞

UM-UC-14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CF-1 MEF細(xì)胞、GL261細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞

ECGI10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CG4細(xì)胞、BDCM細(xì)胞、C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞

COLO 320 DM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT 1197.T細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞、SK-MEL-2-LUC細(xì)胞

HcerEpic細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-596細(xì)胞、Hepa1-6細(xì)胞、hUC-MSC細(xì)胞

JHH2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DMS 153細(xì)胞、KCL22細(xì)胞、675T細(xì)胞

BC-PAP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NMCG-1細(xì)胞、QG56細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞

HSC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC 61 5.3細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞、HT1376細(xì)胞

SUDHL-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MX-1細(xì)胞、NCI-H929細(xì)胞、SKml2細(xì)胞

NOZ細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H196細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞、THP-1細(xì)胞

Y 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MESSA/Dx5細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞、P3J HR-1細(xì)胞

OACP4 C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1581細(xì)胞、LLCPK1細(xì)胞、MOLT4細(xì)胞

Mv1.Lu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-361細(xì)胞、H1975細(xì)胞、P3X63細(xì)胞

H322T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H676B細(xì)胞、MV-522細(xì)胞、U138MG細(xì)胞

HeLa-S3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞、P3-X63-Ag8細(xì)胞、SW 579細(xì)胞

PAEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT-8/V細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞、2B4-L細(xì)胞

H-1299細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T98G細(xì)胞、P116細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞

RPTC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MES13細(xì)胞、293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞

HCA-7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VP267細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞、PBL細(xì)胞

BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RCK-8細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞、CTV-1細(xì)胞

H1648細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFSF細(xì)胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞、HBE細(xì)胞

NCI-H1694細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1048細(xì)胞、OKAC1細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞

HEK293T/17 Cell|人胚腎細(xì)胞

NCTC clone 929細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDAMB157細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞

DC2.4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Psi-2-DAP細(xì)胞、PK136細(xì)胞、HNSC細(xì)胞

H-4-II-E細(xì)胞類似產(chǎn)品：：8505C細(xì)胞、SNUC2A細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞

KMY1022細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCILY-19細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞、HCC0095細(xì)胞

ACC3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SU.86細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞、OC-316細(xì)胞

MT4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B6Tert-1細(xì)胞、XWLC-05細(xì)胞、MRC-5細(xì)胞

LC-MS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1963細(xì)胞、SNU601細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞

Metastatic Variant 522細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ZR-75-30細(xì)胞、MV3細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞

IEC-18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：McA-RH7777細(xì)胞、CTV1細(xì)胞、Kit 225細(xì)胞

SK-N-FI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tb 1 Lu細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞

SNK1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1882細(xì)胞、NCI-H847細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞

CCD-18Co細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TW 01細(xì)胞、NCI-157細(xì)胞、A2780 CP70細(xì)胞

HTh 74細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-415細(xì)胞、GM00637細(xì)胞、IOSE-Mar細(xì)胞

BIC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1048細(xì)胞、TR 146細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hep-3B細(xì)胞、KM12 SM細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞

J-111細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Vero 76 clone E6細(xì)胞、LAD2細(xì)胞、HT-22細(xì)胞

INS1-E細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PLA801-95D細(xì)胞、WEHI 3B細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞

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