"HS-5 Cell|人骨髓基質(zhì)細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

SW1573細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JEKO細(xì)胞、MOLM-16細(xì)胞、Hs1.Tes細(xì)胞

NCI-H660細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL5細(xì)胞、HFE-145細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞

HOS (TE85)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H4-IIE-C3細(xì)胞、HCC1171細(xì)胞、NCIH1105細(xì)胞

MEF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OKAC1細(xì)胞、SK Col 1細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞

MDA-MB436細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-373 MG細(xì)胞、J-82細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HS-5 Cell|人骨髓基質(zhì)細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗(yàn)詳解：1)收到細(xì)胞，首先要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時(shí)貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會(huì)發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過上一步的觀察，細(xì)胞初步?jīng)]有問題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下，會(huì)調(diào)整為靜止期，或者慢速生長(zhǎng)期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài)，在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很HAO時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對(duì)于生長(zhǎng)較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型，一次少傳些，每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。

EB2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CX1細(xì)胞、786O細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞

H-23細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L 363細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NCI-H187細(xì)胞

SUSM1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 527細(xì)胞、KNS-42細(xì)胞、Eca109細(xì)胞

PNT1/A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-1599細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

EB2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CX1細(xì)胞、786O細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞

H-23細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L 363細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NCI-H187細(xì)胞

SUSM1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 527細(xì)胞、KNS-42細(xì)胞、Eca109細(xì)胞

PNT1/A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-1599細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞傳代比例：對(duì)于有限細(xì)胞系，傳代時(shí)以二、四、八或十六倍(傳代比率分別是2、4、8和16)降低細(xì)胞密度，計(jì)算群體倍增數(shù)更容易(即分別是傳代比率2對(duì)應(yīng)1次倍增，4對(duì)應(yīng)2次倍增，8對(duì)應(yīng)3次倍增，16對(duì)應(yīng)4次倍增)；例如，一傳八的培養(yǎng)物需要3次倍增才能達(dá)到原來相同的細(xì)胞密度。脆弱的或生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞系通常一傳二，而有活力的，生長(zhǎng)快速的細(xì)胞系可以一傳八，甚至一傳十六。有些連續(xù)細(xì)胞系可一傳五十或一傳100。一旦細(xì)胞系變?yōu)檫B續(xù)細(xì)胞系(通常經(jīng)過150次或200次倍增以上)，細(xì)胞濃度是主要參數(shù)，培養(yǎng)濃度應(yīng)降至10(4)/ml--10(5)/ml之間?？蛇x擇傳代間隔合適的傳代比率或稀釋度，或許為1周或2周，同時(shí)要保證：細(xì)胞密度不可稀釋過低，使其延遲期合理(在24小時(shí)以內(nèi))，可重新進(jìn)入生長(zhǎng)周期；而且在下次傳代前不進(jìn)人平臺(tái)期。

TSCCa細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UWB1-289細(xì)胞、Hs 863.T細(xì)胞、OCI-LY-8細(xì)胞

OE-19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Nthy-ori 3.1細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞、JM-1細(xì)胞

HEB細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KMS26細(xì)胞、H-847細(xì)胞、EB1細(xì)胞

CATH.a細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ECC 12細(xì)胞、NCIADRRES細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞

Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HL-60 clone15細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞、HOK細(xì)胞

Jurkat E6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JHH-2細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞

H920細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HG2855細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞、MA-c細(xì)胞

H2196細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LA-N-6(OAN)細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞、IGR-OV1細(xì)胞

Jurkat FHCRC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCC-1395細(xì)胞、KMY1022細(xì)胞、SNK6細(xì)胞

HFT 8810細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL-85-1細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞

HS-5 Cell|人骨髓基質(zhì)細(xì)胞

SEG-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1522細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞

3 LL細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞、GM03671細(xì)胞

LS 123細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LS1034細(xì)胞、GRSL細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞

NCI-H69細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H735細(xì)胞、PL 45細(xì)胞、MHCC 97-H細(xì)胞

MRASMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞、EC9706細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A375SM細(xì)胞、RL-95-2細(xì)胞、IB-RS-2細(xì)胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A375SM細(xì)胞、RL-95-2細(xì)胞、IB-RS-2細(xì)胞

HCS2/8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUSM-1細(xì)胞、CHP126細(xì)胞、H-2227細(xì)胞

143BTK-細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H9細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞、HCEC細(xì)胞

SMMC7721細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CTLA4Ig-24細(xì)胞、C-6細(xì)胞、GM07404細(xì)胞

PC 61.5.3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：alpha TC1 clone 6細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞

NCI522細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-kb2細(xì)胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞

NIH3T3-L1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KE 37細(xì)胞、Hs294細(xì)胞、HCC38細(xì)胞

HuT78細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3J HR1-K細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞

HCC 70細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Nthy-ori 3-1細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞、AC16 [Human hybrid]細(xì)胞

Melan-a細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC15細(xì)胞、HNE1細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞

SK-MES細(xì)胞類似產(chǎn)品：：624-mel細(xì)胞、BBE細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞

AG06814-J細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BAC1.2F5細(xì)胞、Pt K2細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞

IALM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DMS273細(xì)胞、COS7細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞

Ly8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Vx-2細(xì)胞、LU451細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞

CAL 27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR-4細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞、H1373細(xì)胞

H2023細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUPT-1細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞、H1651細(xì)胞

EoL-1 cell細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs746-T細(xì)胞、NGP細(xì)胞、143BTK-細(xì)胞

JC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI H157細(xì)胞、THEECs細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞

Panc 08.13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AZ 521細(xì)胞、HKF細(xì)胞、HSAS1細(xì)胞

mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC/CAR細(xì)胞、HEM-L細(xì)胞、HuH6細(xì)胞

Y-79細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MBT2細(xì)胞、DITNC1細(xì)胞、CX-1細(xì)胞

COLO-320HSR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UACC-812細(xì)胞、G-401細(xì)胞、NIH3T3細(xì)胞

NCI-SNU-761細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293細(xì)胞、KM12細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞

HS-5 Cell|人骨髓基質(zhì)細(xì)胞

J774.A1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DMS114細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞

SKG-IIIa細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IOSE80細(xì)胞、BC-019細(xì)胞、H-2196細(xì)胞

LNCaP-C4-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C6細(xì)胞、QGY細(xì)胞、HT29細(xì)胞

U251-MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Leukemia L1210細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞、CCD33Co細(xì)胞

KRC-Y細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、EAC細(xì)胞、Y3M細(xì)胞

K-562細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GFP-Olig2細(xì)胞、Colo205細(xì)胞、H3255細(xì)胞

ECC 12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GC-2細(xì)胞、J774細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞

MDCKII細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H774細(xì)胞、EoL-1-cell細(xì)胞、HCE細(xì)胞

WM 451-Lu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC2185細(xì)胞、H-716細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞

CoCL2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞、143BTK-細(xì)胞、J774A.1細(xì)胞

SNU-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA436細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞

MDA-kb2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO-699細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞

SNU475細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH661細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞、SJRH30細(xì)胞

ASH-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1703細(xì)胞、SW756細(xì)胞、NCI-H2342細(xì)胞

TE11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Lung cancer-1/squamous細(xì)胞、OUMS-27細(xì)胞、U2OS細(xì)胞

50.B1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TOV21G細(xì)胞、WIL2 S細(xì)胞、SW579細(xì)胞

NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293GP細(xì)胞、KY70細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞

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