"SK-OV-3 Cell|人卵巢癌細胞
細胞背景資料:SK-OV-3由G.Trempe和L.J.Old在1973年從卵巢腫瘤病人的腹水分離得到。 此細胞對腫瘤壞死因子和幾種細胞毒性藥物包括白喉毒素、順鉑和阿霉素均耐受。 在裸鼠中致瘤,且形成與卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結】細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在GAO壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現象!可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質,37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現絮狀雜質,鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內,再把水盤里也加上飽和量的酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉GAO鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
細胞生長:貼壁
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SKMEL2細胞類似產品::EJ1細胞、DB細胞、NCI-H735細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SK-OV-3 Cell|人卵巢癌細胞
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
傳代的操作步驟注意事項:1)操作前要洗手,進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈,操作在火焰附近進行,耐熱物品要經常在火焰上燒灼,金屬器械燒灼時間不能太長,以免退火,并冷卻后才能夾取組織,吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼,以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷,但又不能太快,以防空氣流動,增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分,工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟:1)吸除培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液。2)向瓶內加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘,當發(fā)現細胞質回縮,細胞間隙增大后,立即終止消化。4)吸除消化液,向瓶內注入Hanks液數毫升,輕輕轉動培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時,動作要輕,以免把已松動的細胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液單獨消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數板計數后,把細胞懸液分成等份分裝入數個培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟:1)吸出細胞培養(yǎng)液,放入離心管中,離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液,加入適量之新鮮培養(yǎng)基,混和均勻后,依稀釋比例轉移至新的培養(yǎng)瓶中,以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
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細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
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細胞生長特性:貼壁
細胞培養(yǎng)中的污染分為兩類,化學污染和生物污染;生物污染包括比較容易發(fā)現的細菌、霉菌和酵母的污染,和較難發(fā)現的病毒、支原體和其他細胞的污染。細菌、霉菌和酵母到處存在,它們能在合適的環(huán)境中非常快速的生長。這些污染比較容易觀察到,它們往往會使其污染的培養(yǎng)液產生可見的變化,或者通過顯微鏡觀察就可以看見。由于病毒有種屬異性,所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現,因為病毒顆粒別微小,一般的實驗室都沒能力檢查細胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細胞內,對整個細胞培養(yǎng)不是致死的,所以它可能會使研究人員長期得到受病毒影響的細胞的實驗結果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現細胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個調查發(fā)現,在美國培養(yǎng)的細胞中,至少有15%被支原體污染。由于支原體沒有細胞壁,在細胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的,同時對常用于細胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感,不引起pH變化,不使培養(yǎng)液渾濁,所以支原體污染不容易被發(fā)現,但是其存在會影響實驗的結果。培養(yǎng)多種細胞時操作不當,會導致細胞的交叉污染。由于不同細胞的生產速率不同,污染的生長速率快的細胞終會完全取代被污染的細胞。
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SK-OV-3 Cell|人卵巢癌細胞
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SK-OV-3 Cell|人卵巢癌細胞
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上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。