"MPP 89 Cell|間皮瘤細胞
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
體內細胞培養(yǎng)及其操作步驟:【瘤細胞懸液接種】1)無菌選取生長良HAO(有光澤,淡紅色)瘤組織或對數生長期培養(yǎng)瘤細胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經80~100目篩網過濾成細胞懸液;3)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍;4)計數并調整細胞濃度至107~108/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(0.1ml/部位,>106細胞)。初次接種成功率低,細胞數盡可能多一些;6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,Zui后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?!靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細胞,將這種腹水反復傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細胞),反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌,進行細胞計數;2)消毒動物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細胞;3)接種腹水瘤細胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水經3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/p>
細胞生長:貼壁
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細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MPP 89 Cell|間皮瘤細胞
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)過程中,總是會出現各種意想不到的問題,一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍,我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法,希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助:1)觀察細胞狀態(tài):貼壁細胞密度達到85-90%,即可以細胞凍存形式進行保藏,拍照,記錄細胞狀態(tài);2)細胞清洗:培養(yǎng)皿表面消毒后,轉移至生物安全柜中,去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液,加入12mlPBS,輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞,隨后吸除PBS清洗液;3)細胞消化:將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中,完全覆蓋細胞,置于顯微鏡下觀察(期間禁止搖晃培養(yǎng)皿),當細胞剛開始脫落時,立即轉移至生物安全柜中,除去大部分胰酶,剩余約0.5ml胰酶,轉移至培養(yǎng)箱內繼續(xù)消化,每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài),至細胞成流沙狀完全脫落,轉移至生物安全柜中,加入12ml完全培養(yǎng)基,終止消化;4)細胞離心:將終止消化后的細胞懸液吹打均勻,吸取至15ml離心管中,1000r/min(110g),離心3min;5)細胞凍存:離心后去除細胞上清液,按照凍存細胞量5*10^5/ml,吸取凍存液重懸細胞沉淀,吹打均勻后分裝至相應的凍存管中,進行凍存;6)細胞保藏:凍存管做HAO標記,放至程序降溫盒中,于4℃冰箱放置30min,轉移至-80℃超低溫冰箱過夜,將過夜后的凍存細胞轉移至液氮中保藏。
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細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
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細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞系(cell line)指原代細胞培養(yǎng)物經首次傳代成功后所繁殖的細胞群體。 也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。(由此便引申出了后來的有限細胞系(FiniteCellLine)、無限細胞系(InfiniteCellLine)),因此,細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞(定環(huán)境下口語和書面語都使用),廣義是指可傳代的細胞。腫瘤細胞系多由癌瘤建成,多呈類上皮型細胞,常已傳幾十代或百代以上,并具有不死性和異體接種致瘤性,喪失接觸抑制能力。國際上美、英和日本等國已建有細胞庫;美國已有美國標準細胞庫或細胞銀行(ATCC)和人遺傳突變細胞庫(HGMR)、細胞衰老細胞庫(CAR)等,其中ATCC不僅是美國也世界大的細胞庫。細胞系建立要求:什么樣的體外培養(yǎng)群可被認可為己鑒定的細胞,視具體情況而定,無統(tǒng)一規(guī)定。對于用作原代培養(yǎng)的細胞只要供體均一,取材部位及組織種類等條件穩(wěn)定即可,如用做長期培養(yǎng),別是反復傳代的細胞,常需做如下說明:組織來源:細胞供體所屬物種,來自人體或者動物;個體性別、年齡;取材的器官或組織。如系腫瘤組織,應說明臨床和病理診斷,以及病歷號等。細胞生物學檢測:了解細胞一般和殊的生物學性狀,如細胞一般形態(tài),異結構,細胞生長曲線和分裂指數,倍增時間,接種率等。如為腫瘤細胞,為說明來源于原腫瘤組織并保持惡性,須做軟瓊脂培養(yǎng),異體接種致瘤和對正常組織侵潤力等實驗。培養(yǎng)條件和方法;應說明細胞系(或株)適應的生存環(huán)境,即指明使用的培養(yǎng)基、血清種類、用量以及適宜PH值。
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MPP 89 Cell|間皮瘤細胞
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關鍵字: MPP 89 Cell|間皮瘤細胞;
上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。