"Dakiki:人B淋巴復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：懸浮

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HHL5細胞類似產品：：NCI-H322細胞、HTori3細胞、DOK細胞

H-2172細胞類似產品：：B16-F10--RED細胞、H341細胞、GM04671細胞

NCI-H841細胞類似產品：：BNL.1ME A.7R.1細胞、NOZAWA細胞、Colo16細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞類似產品：：HIBEpiC細胞、HRA19細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：B淋巴細胞；EBV轉染

Dakiki:人B淋巴復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣

WEHI-3B細胞類似產品：：Okayama University Medical School-23細胞、H1385細胞、GA-10-Clone-4細胞

PECAPJ34細胞類似產品：：BT細胞、C518細胞、Hs611T細胞

Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞類似產品：：PG-4細胞、MESSA-DX5細胞、RCC4細胞

購買細胞注意事項：１)收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完HAO，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發(fā)生請及時和我們聯系；２)仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等；３)用７５%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們聯系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次；４)建議客戶收到細胞后前３天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和公司技術部溝通交流?！炯毎麄鞔僮鞑襟E】一、貼壁細胞傳代：１)提前將培養(yǎng)基、PBS放入３７℃水浴鍋內預熱，用７５%酒精擦拭后再放入超凈臺內；２)吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞；３)加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，３７℃孵育，每隔２~３min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用；４)用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡；５)將細胞懸液分別接種到另外的２~３個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。二、懸浮細胞傳代：１)將細胞懸液轉移到無菌離心管內，１０００rpm離心５min；２)棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液；３)將細胞懸液分別接種到另外的２~３個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：懸浮

一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過GAO時，易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化，對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化，細胞密度過GAO超過80%時，采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C，解凍在4°C進行，次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中，保存于-20°C，避免反復冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關鍵步驟：消化過度細胞碎片增多，黑渣子增多，細胞會成片脫落，嚴重影響細胞活性，并有部分細胞漂浮，隨棄去的胰酶流失；消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下，反復吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同，胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲存時間，胰酶的儲存溫度，是否反復凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細胞的密度有關。對于新購買的細胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間，可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓，記錄Zui佳消化時間，下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。

GC1-SPG細胞類似產品：：SaOS-2細胞、SUM149-PT細胞、H-1048細胞

PG-4(S+L-)細胞類似產品：：F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞

WERI-Rb 1細胞類似產品：：C4-2細胞、RK13細胞、Y3-Ag1,2,3細胞

JCA-1細胞類似產品：：NTC-200細胞、H-1975細胞、Fox/NY細胞

C81-61細胞類似產品：：JB 6細胞、Hs 445細胞、Panc8.13細胞

BE2_C細胞類似產品：：SJRH30細胞、HN4細胞、AE1201細胞

H-378細胞類似產品：：SW839細胞、NCI-H87細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞

VP229細胞類似產品：：SW-1222細胞、HUT 226細胞、OCM-1A細胞

NTHY-ORI3.1細胞類似產品：：hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞

aNK細胞類似產品：：OVCA8細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞、NALM-6-M1細胞

LN-382細胞類似產品：：W256細胞、SVGp12細胞、U-266細胞

CFSC-8B細胞類似產品：：L-6 myoblast細胞、HCAEC細胞、M20 [Human melanoma]細胞

H2106細胞類似產品：：RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞

PLC8024細胞類似產品：：LS-174T細胞、KYSE30細胞、Panc3_27細胞

H-524細胞類似產品：：SRA01/04細胞、FC33細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞

H676B細胞類似產品：：CEM T4細胞、AN3細胞、ROS1728細胞

H676B細胞類似產品：：CEM T4細胞、AN3細胞、ROS1728細胞

ML2細胞類似產品：：HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞

P1-Raji細胞類似產品：：RCC-10RGB細胞、MG-HU-3細胞、OCI-AML-5細胞

SGC-996細胞類似產品：：Hs 604.T細胞、HCET細胞、LAN1細胞

HK-2 [Human kidney]細胞類似產品：：University of Arizona Cell Culture-812細胞、KBM-7/Hap8細胞、H-522細胞

E.G7-OVA細胞類似產品：：EOC20細胞、CAKI 1細胞、AD-293細胞

293A細胞類似產品：：WC00044細胞、A-2058細胞、4175細胞

LA4細胞類似產品：：293/EBNA-1細胞、NS1細胞、T HEECs細胞

Dakiki:人B淋巴復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

MA 104細胞類似產品：：IHHA-1細胞、NCIH1876細胞、NCI-H1568細胞

CL-34細胞類似產品：：MDA134細胞、IOSE-29細胞、Hep 3B細胞

HT-1376細胞類似產品：：SUSM1細胞、NCI-H716細胞、KBM7細胞

SKCO1細胞類似產品：：PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞

N-Tera-2細胞類似產品：：RBL-2H3細胞、IEC 18細胞、PC-3M IE8細胞

Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞類似產品：：PG-4細胞、MESSA-DX5細胞、RCC4細胞

SNU-620細胞類似產品：：DoHH2細胞、NPC-TW01細胞、NCIH1435細胞

Loucy細胞類似產品：：Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞

IHH細胞類似產品：：HS5細胞、Jurkat-E6細胞、LPC-H12細胞

SKN-SH細胞類似產品：：Hs606細胞、GOS-3細胞、B16-F0細胞

NCI-H1373細胞類似產品：：HLMVEC細胞、Colon 38細胞、RIN Cl-5F細胞

OLN 93細胞類似產品：：Co320細胞、NCI-H2452細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞

B16細胞類似產品：：Panc-08.13細胞、CCD33Co細胞、Panc-8_13細胞

NBL-1細胞類似產品：：LC-1 sq細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、KU19-19細胞

HEK293-EBNA1細胞類似產品：：16HBE細胞、M21細胞、IPECJ2細胞

SGC-7901細胞類似產品：：NCIH596細胞、NK-92細胞、V-79-4細胞

GTL 16細胞類似產品：：FO [Mouse myeloma]細胞、UPCISCC154細胞、MDAMB436細胞

VP229細胞類似產品：：SW-1222細胞、HUT 226細胞、OCM-1A細胞

NSC-34細胞類似產品：：CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞

Hs 274細胞類似產品：：CFPAC-1細胞、TK-10細胞、AML 12細胞

UCLA NPA871細胞類似產品：：MADB106細胞、A2780 CP70細胞、MDAMB361細胞

UCLA NPA-87-1細胞類似產品：：SNU-16細胞、MHCC97-L細胞、HCC78細胞

Leukemia L1210細胞類似產品：：Normal Rat, August 3, 1983細胞、NCI.H226細胞、HCGC細胞

MC-4細胞類似產品：：SUIT2細胞、PTK-2細胞、CAL-85-1細胞

GTL 16細胞類似產品：：FO [Mouse myeloma]細胞、UPCISCC154細胞、MDAMB436細胞

HEL 92.1.7細胞類似產品：：MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞

BaF3細胞類似產品：：ECV304細胞、NCIH526細胞、H-1437細胞

HBZY1細胞類似產品：：VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞

TE6細胞類似產品：：MEF細胞、Hs 274.T細胞、DLM8細胞

Vero 76 clone E-6細胞類似產品：：SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞

R1610細胞類似產品：：H510細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、HUT 28細胞

RERF-LCMS細胞類似產品：：NCI-H1882細胞、MAntle cell VERona-1細胞、BLO-11細胞

H-1688細胞類似產品：：MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞

138MG細胞類似產品：：TYKnu細胞、HEK293-EBNA1細胞、DrG細胞

Nb2細胞類似產品：：C-4I細胞、C32-mel細胞、U-251MG細胞

H-1819細胞類似產品：：5637細胞、J45.01細胞、PNEC30細胞

K7M2細胞類似產品：：GM03569D細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、H2107細胞

WERI-Rb 1細胞類似產品：：C4-2細胞、UPCI-SCC-90細胞、ND7/23細胞

OVCA432_Bast細胞類似產品：：NCI-A549細胞、130-T細胞、SW-1271細胞

EBTr細胞類似產品：：RWPE2細胞、SNU869細胞、TSU-Pr1細胞

HCC 70細胞類似產品：：Nthy-ori 3-1細胞、SK-MEL28細胞、AC16 [Human hybrid]細胞

LN-229細胞類似產品：：RGCs細胞、786-0細胞、hSCC-25細胞

SKO-007細胞類似產品：：HCC1833細胞、NBL-5細胞、HKBML細胞

TCC-SUP細胞類似產品：：NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞

NCI-SNU-C2B細胞類似產品：：X63-Ag8細胞、SUM 52細胞、GL261細胞

ECC1細胞類似產品：：MC3T3-E1 Subclone 24細胞、GM-3573細胞、DKMG細胞

Hos TE-85細胞類似產品：：MS1細胞、H650細胞、ACC3細胞

MDA-MB-175VII細胞類似產品：：H-2108細胞、SF767細胞、BNL-HCC細胞

NU-GC-3細胞類似產品：：MGC803細胞、ACCM細胞、MC 116細胞

MOLM-13細胞類似產品：：NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞

LC-1細胞類似產品：：NCI-H1836細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞、CO115細胞

NCI-H1385細胞類似產品：：TCCSUP細胞、H1703細胞、LYR細胞

MDA.MB.231細胞類似產品：：PANC 203細胞、VP267細胞、KY70細胞

CWR22R細胞類似產品：：EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞

COLO_320DM細胞類似產品：：HANK-1細胞、SUDHL-8細胞、H22細胞

U-CH1細胞類似產品：：CAL33細胞、Rin-M-5F細胞、CT26WT細胞

Caki-2細胞類似產品：：SK-Mel 1細胞、B16-F10-BL6細胞、MPVECs細胞

Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞類似產品：：L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞

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NB1RGB細胞類似產品：：SK-MEL-2-LUC細胞、H-1819細胞、SHIN-3細胞

EA. hy 926細胞類似產品：：SUM190PT細胞、THLE-2細胞、AU 565細胞

NCIH1650細胞類似產品：：MUTZ1細胞、Anip973細胞、32Dc3細胞

RPTEC/TERT1細胞類似產品：：PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞

WM-239-A細胞類似產品：：Daudi細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞、MKN-28細胞

HEH2細胞類似產品：：Walker/LLC-WRC256細胞、SNU119細胞、Huh-7.5細胞

BetaTC6細胞類似產品：：NIH-OVCAR-3細胞、Hs895.T細胞、A-172細胞

MMAc-SF細胞類似產品：：HEB細胞、Kit-225-K6細胞、MB157細胞

P36細胞類似產品：：MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞

hTERT-HME-1細胞類似產品：：293-EBNA細胞、HGF-1細胞、KOPN-8細胞

SUDHL-4細胞類似產品：：NCI H345細胞、NW-MEL-38細胞、H-676B細胞

IM-95細胞類似產品：：A-204細胞、AMJ2-C8細胞、JB6 Cl 30-7b細胞

751-NA細胞類似產品：：EFO27細胞、HeLa.S3細胞、138MG細胞

HPASMC細胞類似產品：：SW780細胞、Hs-600-T細胞、PAMC82細胞

HRA 19細胞類似產品：：Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NCI-H2444細胞、L02細胞

SAOS 2細胞類似產品：：EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞

H2135細胞類似產品：：HCC-1143細胞、Pa14C細胞、OCI-Ly19細胞

MONO-MAC 6細胞類似產品：：H-2135細胞、P30/OHK細胞、EOC 20細胞

SKLU01細胞類似產品：：WM 239細胞、MM-1S細胞、ATDC-5細胞

Hu-P-T4細胞類似產品：：COV362細胞、697細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞

COLO829細胞類似產品：：HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞

Bovine Turbinate細胞類似產品：：MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞

HS-294細胞類似產品：：KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞

Dakiki:人B淋巴復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

SKMES-1細胞類似產品：：PCI-04B細胞、MDBK細胞、GES1細胞

Madin-Darby Bovine Kidney細胞類似產品：：C3H/10T1/2細胞、WM 239-A細胞、U-266 AR1細胞

SK Mel28細胞類似產品：：USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞

PK136細胞類似產品：：NFS60細胞、Vero-76細胞、Institute for Medical Research-90細胞

NBL-3細胞類似產品：：RL952細胞、H-2085細胞、WSUDLCL2細胞

WiDr細胞類似產品：：HPAF細胞、TOV-112細胞、L cell細胞

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