"TK-1:小鼠T淋巴瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞生長:懸浮
細胞可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良HAO時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。細胞接收后的處理方式:收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們;請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h;棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的完全培養(yǎng)基;如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代;接到細胞第二天,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們取得聯(lián)系。細胞培養(yǎng)步及凍存條件:驟準備細胞所需培養(yǎng)基;YOU質胎牛血清,10%;雙抗,1%;培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%;凍存液:92%血清,8%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。細胞復蘇及何時傳代:復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
KTCTL140細胞類似產品::H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞
MC-3T3細胞類似產品::CESS細胞、A-172MG細胞、RFL 6細胞
CHP-212細胞類似產品::RGM-1細胞、NCl-H157細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞
BT細胞類似產品::OCI-Ly 19細胞、SHP-77細胞、SCC25細胞
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
細胞背景資料:淋巴瘤;AKR/Cum
TK-1:小鼠T淋巴瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
HS578T細胞類似產品::MDA-468細胞、EAhy 926細胞、LA-N-6(OAN)細胞
NCIH1373細胞類似產品::H774細胞、BAR-T細胞、OVTOKO細胞
MRC-V細胞類似產品::Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、HSC 3細胞、HO8910細胞
培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇:細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。【凍存細胞】1)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液,計數(shù),使細胞密度達5×10/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制HAO的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑10%二甲基亞砜(DMSO)或甘油,可使冰點降低,使細胞內水分在凍結前透出細胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋HAO凍存管并仔細檢查,一定要蓋緊,做HAO標記;6)凍存:在殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度,過快能影響細胞內水分透出,太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩吞K細胞】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分,密度應達到10/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10/ml數(shù)量。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
TK-1:小鼠T淋巴瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞生長特性:懸浮
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良HAO,當補液時,需避免反復吹打。
MDA-MB-435-S細胞類似產品::Kit225-K6細胞、NTERA2D1細胞、Hs 737.T細胞
NCIH810細胞類似產品::NCI-H2126細胞、NFHIOSE-29細胞、LS513細胞
MDCK supertube細胞類似產品::MF2059細胞、NCIH1693細胞、NBL-4細胞
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K562細胞類似產品::SUM52細胞、LWnt-3A細胞、EO771細胞
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MFE-296細胞類似產品::PIG1細胞、H-747細胞、A375mel細胞
HeLa細胞類似產品::Panc2_03細胞、SK-N-SH細胞、PC-9S1細胞
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DMS 79細胞類似產品::SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞
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SN-12C細胞類似產品::BRL 3A細胞、KM.12細胞、MCF7細胞
MDA MB 361細胞類似產品::H3255_DA細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、HFF-1細胞
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Jurkat 77細胞類似產品::QBI-293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞、Kupffer細胞
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TK-1:小鼠T淋巴瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
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A549細胞類似產品::D-341Med細胞、38C13細胞、CATHa細胞
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關鍵字: TK-1:小鼠T淋巴瘤復蘇細胞(提供ST;
上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。