"Kasumi-6:急性髓系細胞白血病復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：懸浮

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HSC5細胞類似產(chǎn)品：：SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞

MDA-MB-361細胞類似產(chǎn)品：：LICR-LON-HN6細胞、FU-MMT-1細胞、Walker256-TC細胞

NG108-15細胞類似產(chǎn)品：：MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞

Duke University 145細胞類似產(chǎn)品：：M619細胞、D-283 Med細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Kasumi-6:急性髓系細胞白血病復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣

UO.31細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞

Hs 27細胞類似產(chǎn)品：：TE-13細胞、A101D細胞、HEP-3B2細胞

H2085細胞類似產(chǎn)品：：Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞

細胞培養(yǎng)實驗基本操作：①進無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理HAO工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨立進行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，Zui大的YOU點是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉，熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。

細胞傳代方法：每周２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：懸浮生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當(dāng)補液時，需避免反復(fù)吹打。

DU145細胞類似產(chǎn)品：：RKN細胞、Mc Coy細胞、1.1B4細胞

BRL 3A細胞類似產(chǎn)品：：PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞

LA-N-6(OAN)細胞類似產(chǎn)品：：Mel RM細胞、MHCC97H細胞、NG 108-15細胞

Hs852細胞類似產(chǎn)品：：FDCP1細胞、OCI-AML4細胞、PC-3M細胞

HCA-7細胞類似產(chǎn)品：：VP267細胞、Hep G2-Luc細胞、PBL細胞

VP267細胞類似產(chǎn)品：：Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、COV-434細胞、H2029細胞

IM 9細胞類似產(chǎn)品：：3T3 J2細胞、16HBEo-細胞、PANC 203細胞

UMUC-3細胞類似產(chǎn)品：：P388D1細胞、Psi-2 DAP細胞、MOLT 16細胞

Hs888 Lu細胞類似產(chǎn)品：：NE-4C細胞、NTERA-2 cl.D1細胞、Ca9-22細胞

HMC3細胞類似產(chǎn)品：：LC-1Sq細胞、CG-4細胞、HConEpic細胞

SKLU-1細胞類似產(chǎn)品：：SK-Mel1細胞、WEHI 3細胞、D283-MED細胞

293細胞類似產(chǎn)品：：NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞

ARO81-1細胞類似產(chǎn)品：：IBRS2細胞、Bowes melanoma cells細胞、CoCL2細胞

OVCAR-5細胞類似產(chǎn)品：：R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞

SK-N-BE(2C)細胞類似產(chǎn)品：：MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞

NCI-SNU-423細胞類似產(chǎn)品：：CNE2細胞、JKT-1細胞、PMVEC細胞

NCI-SNU-423細胞類似產(chǎn)品：：CNE2細胞、JKT-1細胞、PMVEC細胞

NTERA-2細胞類似產(chǎn)品：：TCMK1細胞、FD-LSC-1細胞、NCI-H378細胞

SN12-PM6細胞類似產(chǎn)品：：Panc08.13細胞、CNE-1細胞、108CC15細胞

MEC1細胞類似產(chǎn)品：：J 111細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、SK Col 1細胞

6T-CEM細胞類似產(chǎn)品：：SNU-449細胞、MALME 3M細胞、Cattle chondrocytes細胞

Eca 109細胞類似產(chǎn)品：：HO8910/PM細胞、PC 12細胞、SNU869細胞

AZ-521細胞類似產(chǎn)品：：MADISON LUNG TA-109細胞、MOLT.4細胞、T98-G細胞

COLO 699細胞類似產(chǎn)品：：TE671/RD細胞、UCD-MLA-144細胞、ZR-75-30細胞

Kasumi-6:急性髓系細胞白血病復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

CTLL-2細胞類似產(chǎn)品：：M14細胞、CemT4細胞、KLM-1細胞

BEL-7404細胞類似產(chǎn)品：：CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞

GAK細胞類似產(chǎn)品：：RSC-364細胞、C-28I2細胞、SVEC4-10細胞

SKNO1細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-175VII細胞、HCC-1937細胞、CT26細胞

INS1細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞

OCI-LY-8細胞類似產(chǎn)品：：SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞

SNU-C2A細胞類似產(chǎn)品：：AAV293細胞、SNU-354細胞、SNU-5細胞

NCIH847細胞類似產(chǎn)品：：SUPM2細胞、Pa16C細胞、H23細胞

EBNA293細胞類似產(chǎn)品：：HSC-I細胞、OV-1063細胞、MiaPaCa2細胞

RSC96細胞類似產(chǎn)品：：PG [Human lung carcinoma]細胞、H-322細胞、Y 1細胞

HCFB（HCF）細胞類似產(chǎn)品：：WEHI-231細胞、MG63細胞、OVCAR 420細胞

GM03573A細胞類似產(chǎn)品：：Panc 5.04細胞、NOMO1細胞、LLC-PK1細胞

OLN 93細胞類似產(chǎn)品：：Co320細胞、NCI-H2452細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞

NCI-H1436細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP FGC細胞、V79細胞、H2087細胞

Fetal Bovine Heart Endothelial細胞類似產(chǎn)品：：HT22細胞、U 266細胞、PLCPRF5細胞

SW-780細胞類似產(chǎn)品：：U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞

Human Embryo Lung-1細胞類似產(chǎn)品：：H-1437細胞、SKNBE(1)細胞、TKB-1細胞

NHA細胞類似產(chǎn)品：：MPP-89細胞、CNE細胞、NIE 115細胞

IAR-20細胞類似產(chǎn)品：：LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞

HELA-GFP細胞類似產(chǎn)品：：251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞

SK-NM-C細胞類似產(chǎn)品：：HUVSMC細胞、WM 2664細胞、SO-Rb 50細胞

SU-DH-L5細胞類似產(chǎn)品：：PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞

Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2107細胞、NCI-H1581細胞、NFS-60細胞

GM03569細胞類似產(chǎn)品：：UCLA NPA-87-1細胞、NCIH3255細胞、BV2細胞

JB-6 Cl 30細胞類似產(chǎn)品：：U-343 MG細胞、EC-109細胞、V79細胞

Hs-729-T細胞類似產(chǎn)品：：RPMI8226細胞、OCILY-10細胞、MM96L細胞

EL-4細胞類似產(chǎn)品：：NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞

RBE4細胞類似產(chǎn)品：：B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞

MEF (CF-1)細胞類似產(chǎn)品：：HPDE6c7細胞、RMG-I細胞、1301細胞

Oka-C1細胞類似產(chǎn)品：：H-719細胞、NCI-H322細胞、HHFK細胞

HSC1細胞類似產(chǎn)品：：PC 61 5.3細胞、HLMVEC細胞、HT1376細胞

RAG細胞類似產(chǎn)品：：HFTF細胞、OSRC2細胞、CD18細胞

SRS-82細胞類似產(chǎn)品：：BIC-1細胞、MDA-MB415細胞、UMNSAH-DF-1細胞

H-23細胞類似產(chǎn)品：：L 363細胞、SK-N-BE(2C)細胞、NCI-H187細胞

MDCK-II細胞類似產(chǎn)品：：C-Lu-65細胞、MN-60細胞、HCC94細胞

NCIH1838細胞類似產(chǎn)品：：High Five細胞、P388-D1細胞、H-2066細胞

TSCC1細胞類似產(chǎn)品：：SW-756細胞、GA-10-Clone-4細胞、Tu-686細胞

LA-N-6(OAN)細胞類似產(chǎn)品：：Mel RM細胞、SNU-475細胞、KBM-5細胞

ASH3細胞類似產(chǎn)品：：University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、MM1細胞、NCTC-929細胞

C1498細胞類似產(chǎn)品：：EB-3細胞、BJA-B1細胞、Mono Mac 1細胞

OVCAR-420細胞類似產(chǎn)品：：LICR-HN-6細胞、MDA435細胞、SNU-216細胞

ST2細胞類似產(chǎn)品：：R D細胞、RS4:11細胞、Hs675細胞

HM06.A1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H847細胞、H2029細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞

LS123細胞類似產(chǎn)品：：HS-68細胞、A-172 MG細胞、HSMC細胞

SK-BR3細胞類似產(chǎn)品：：MKN-74細胞、DMS-114細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞

NCI-SNU-449細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-330細胞、D-341Med細胞、EOC20細胞

NTC-200細胞類似產(chǎn)品：：Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞

SNU-1040細胞類似產(chǎn)品：：SCL-2細胞、MSC細胞、SW-1353細胞

Human Pancreatic Duct Epithelial細胞類似產(chǎn)品：：293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞

GM04154細胞類似產(chǎn)品：：NE-1細胞、PC9細胞、CEL細胞

KYSE410細胞類似產(chǎn)品：：PTK-1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞、WPE-int細胞

COR-L51細胞類似產(chǎn)品：：C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞

GT1-1細胞類似產(chǎn)品：：LY-R細胞、BCaP 37細胞、2B4細胞

KYSE 30細胞類似產(chǎn)品：：P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞

KCL-22細胞類似產(chǎn)品：：Central Adrenergic TH-expressing a細胞、MKN28細胞、SaOS細胞

KYSE520細胞類似產(chǎn)品：：TE-85細胞、Lewis lung carcinoma細胞、LC-2 ad細胞

HT1197細胞類似產(chǎn)品：：190PT細胞、MKN1細胞、A-375細胞

MX-1細胞類似產(chǎn)品：：HFE-145細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、N-2a細胞

MX-1細胞類似產(chǎn)品：：HFE-145細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、N-2a細胞

MFE280細胞類似產(chǎn)品：：EBC1細胞、MG-63細胞、BaF3細胞

H4IIEC3細胞類似產(chǎn)品：：Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、MM1-S細胞、HCC2108細胞

P3/NS1/1-Ag4.1細胞類似產(chǎn)品：：H2444細胞、IR 983F細胞、LC1細胞

MXI細胞類似產(chǎn)品：：Earles's cells細胞、HET-1A細胞、HepG2-luc細胞

SGC7901/DDP細胞類似產(chǎn)品：：MHCC 97-H細胞、SUM190PT細胞、Co-115細胞

B/C3T3細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1672細胞、HMC細胞、HNE3細胞

HEK 293FT細胞類似產(chǎn)品：：CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞

Hi-5細胞類似產(chǎn)品：：HCC1438細胞、SNU-C2A細胞、As-PC1細胞

Functional Liver Cell-7細胞類似產(chǎn)品：：OK-WT細胞、BC-3H-1細胞、CAMA1細胞

EVSA/T細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞

CCD18細胞類似產(chǎn)品：：T-98G細胞、IM9細胞、NCI-H2110細胞

SCC 25細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1650細胞、hESC細胞、PAN 02細胞

BJA-B1細胞類似產(chǎn)品：：Me Wo細胞、Granta 519細胞、TR146細胞

SV-HUC-1細胞類似產(chǎn)品：：Neuro 2a細胞、NCI-UMC-11細胞、NCI-SNU-475細胞

Pa14C細胞類似產(chǎn)品：：DLD 1細胞、HL7702細胞、RPMI no. 8226細胞

SW 982細胞類似產(chǎn)品：：Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞

SVEC4-10細胞類似產(chǎn)品：：Hx147細胞、CORL88細胞、Hs 729.T細胞

MV4:11細胞類似產(chǎn)品：：P30OHK細胞、K1細胞、BXPC3細胞

HFLS-RA細胞類似產(chǎn)品：：Evsa-T細胞、J774 A.1細胞、RAW 264.7細胞

IM 9細胞類似產(chǎn)品：：3T3 J2細胞、16HBEo-細胞、PANC 203細胞

SK-RC-42細胞類似產(chǎn)品：：LoMeT-ccRcc細胞、U87細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞

SU-DHL-16細胞類似產(chǎn)品：：RH8994細胞、NPC-TW 01細胞、H184A1細胞

Hi5細胞類似產(chǎn)品：：JC細胞、SKCO1細胞、CEMx721.174.T2細胞

Kasumi-6:急性髓系細胞白血病復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

SC1細胞類似產(chǎn)品：：H-1105細胞、3AO細胞、RH30SJ細胞

KTCTL-140細胞類似產(chǎn)品：：C518細胞、COLO 684細胞、H-1954細胞

TE671細胞類似產(chǎn)品：：AU-Mel細胞、SK.MEL.28細胞、Y3.AG.1.2.3細胞

Tu-177細胞類似產(chǎn)品：：MUG-Chor1細胞、NIH:OVCAR-10細胞、WM2664細胞

NCI-H2444細胞類似產(chǎn)品：：MPC-5細胞、NCI-H2009細胞、KPL4細胞

COS1細胞類似產(chǎn)品：：Pa14C細胞、H-1373細胞、YT細胞

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