"Daudi:人Burkkit淋巴瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞生長:懸浮
貼壁細胞凍存注意事項:細胞凍存液需提前配制,不可直接將DMSO加入細胞懸液中;不同細胞消化時間有差異,以實際鏡檢結果為準,大部分細胞回縮變圓并有少量細胞脫落即可中止消化,消化時間不宜過長;應選擇匯合度80%-90%左右,細胞處于對數生長期時進行凍存操作,確保細胞凍存時狀態(tài)Zui佳,凍存密度可根據細胞性進行調整;凍存細胞保存溫度應低于-130℃,不可在-80℃長期保存。貼壁細胞凍存操作步驟:從培養(yǎng)箱中取出準備凍存的細胞;顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)并拍照記錄;酒精消毒培養(yǎng)瓶后放入安全柜中;吸去多余的培養(yǎng)基,加人2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次;加入1ml胰酶,放入37℃消化;消化1min左右,在顯微鏡下觀察細胞消化情況;消化完全后,加3ml完全培養(yǎng)基終止;將細胞懸液移入15ml離心管中離心,1000rpm/min(約200g)離心3-5min;吸去多余的液體,向細胞沉淀中加入適量的凍存液,輕輕吸打混勻;按比例分裝至凍存管中;貼HAO標簽后放入梯度凍存盒中;將凍存盒放入-80℃,降溫過夜后,移入液氮中保存。貼壁細胞凍存實驗準備事項:將15mL離心管、凍存管、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中,紫外照射30min消毒滅菌;細胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、細胞凍存液等從4℃冰箱中取出后,復溫至室溫,備用;程序降溫盒復溫至室溫備用。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HS-940-T細胞類似產品::Hs940-T細胞、WILL-2細胞、HSF2細胞
MiaPaCa-2細胞類似產品::TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞
OCI-Ly8細胞類似產品::FRTL5細胞、LCMS細胞、NCI-H69細胞
H-548細胞類似產品::HHL-5細胞、BMSC/hBMSCs細胞、HR8348細胞
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
細胞背景資料:1967年,該細胞系KleinE和KleinG建系,源于一名16歲患有Burkitt's淋巴瘤的黑人男性,beta-2-微球蛋白陰性,表達EBNA,VCA,sIg。該細胞攜帶EB病毒,是一個典型的B淋巴母細胞系,可用于白血病發(fā)病機制的研究。
Daudi:人Burkkit淋巴瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
TK 10細胞類似產品::MC-116細胞、AG06814-N細胞、CAL851細胞
NCI-H2405細胞類似產品::MDA-MB-134VI細胞、OV3121細胞、MHHCALL2細胞
CoCL2細胞類似產品::HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、143BTK-細胞、J774A.1細胞
細胞傳代注意事項:①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次ZuiHAO只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材;②每天觀察細胞形態(tài),掌握HAO細胞是否健康的標準:健康細胞的形態(tài)飽滿,折光性HAO,生長致密時即可傳代;③如發(fā)現細胞有污染跡象,應立即采取措施,一般應棄置污染的細胞,如果必須挽救,可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗,隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素,并經常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持:細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現。對每一個細胞系來說都有其自身的點,要做HAO建系的維持必須記錄HAO細胞檔案,換液傳代和做HAO細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇:細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
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細胞生長特性:懸浮生長
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良HAO,當補液時,需避免反復吹打。
HL-7702細胞類似產品::Ly3細胞、H508細胞、BPH1細胞
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關鍵字: Daudi:人Burkkit淋巴瘤復蘇細;
上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。