"SNG-M Cell|人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對延長。

細(xì)胞生長：貼壁

SNU-739細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-498細(xì)胞、HGBEC細(xì)胞、AM-38細(xì)胞

Mink Lung細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1915細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞

SNU-387細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1395細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞

MKN-74細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RMS 1598細(xì)胞、SaOS細(xì)胞、SU-DHL-8細(xì)胞

NCI-H28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPAF2細(xì)胞、GT39細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

SNG-M Cell|人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做HAO標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

TE 85.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BE(2)M17細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞

SHG44細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK293S細(xì)胞、SGC-7901/DDP細(xì)胞、T24(ECV304)細(xì)胞

RIN Cl-5F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNB19細(xì)胞、HCC9204細(xì)胞、GM15452細(xì)胞

OVSAHO細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM-266-mel細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２傳代

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

TE 85.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BE(2)M17細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞

SHG44細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK293S細(xì)胞、SGC-7901/DDP細(xì)胞、T24(ECV304)細(xì)胞

RIN Cl-5F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNB19細(xì)胞、HCC9204細(xì)胞、GM15452細(xì)胞

OVSAHO細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM-266-mel細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁生長

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

NCI-SNU-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-78細(xì)胞、MGSMC細(xì)胞、MH7A細(xì)胞

GM03190細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1092細(xì)胞、H69細(xì)胞、WiDr/S細(xì)胞

M-07e細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KP-2細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞、NCI-H2108細(xì)胞

MBMEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞

C-Lu-65細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CMT-167細(xì)胞、AU565細(xì)胞、RH7777細(xì)胞

HEK293T/17細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKNSH細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞

786.O細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2347細(xì)胞、Caov-3細(xì)胞、NCIH1838細(xì)胞

SNU407細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-BL6細(xì)胞、SNU251細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞

RLE-6TN細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C3H10T1/2CL8細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞

SkChA1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：REC1細(xì)胞、H-146細(xì)胞、LU165細(xì)胞

SNG-M Cell|人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞

SJRH 30細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H498細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞、HVSMC細(xì)胞

Hs-852-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-343MG細(xì)胞、H-295R細(xì)胞、ACC2細(xì)胞

F442A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TO 175.T細(xì)胞、H23細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞

H-187細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs27F細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞、JTC-39細(xì)胞

NCI-H740細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LA-N-6細(xì)胞、AM細(xì)胞、Panc_08_13細(xì)胞

C4 I細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Alexander cells細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞

C4 I細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Alexander cells細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞

COLO-829細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-10細(xì)胞、SW48細(xì)胞、CA 46細(xì)胞

CL 1-0細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFT-8810細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞、NCI-H292細(xì)胞

H1954細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Eca109細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞、EAC細(xì)胞

A2780/Taxol細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RT112細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞

NCI H716細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞

HCT/FU細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 27細(xì)胞、Panc-1-P細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞

BT 20細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-HUT-460細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞

NCI-H889細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3 88 D1細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞、BCAP37細(xì)胞

JiyoyeP-2003細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UCLA SO M14細(xì)胞、B5537SKIN細(xì)胞、Panc813細(xì)胞

MBVP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO-16細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、SK-N-DZ細(xì)胞

HCV-29細(xì)胞類似產(chǎn)品：：E.L.4細(xì)胞、NCI-H-295細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞

SuDHL 5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 578.Bst細(xì)胞、LS-411細(xì)胞、ChaGo K-1細(xì)胞

VMCUB1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-508細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞

UWB1-289細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A2780/CP細(xì)胞、HHFK細(xì)胞、DBTRG-05MG細(xì)胞

MLO-Y4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HELF細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞、Jiyoye (P-2003)細(xì)胞

CCD-19Lu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HTh74細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、H358細(xì)胞

ECV 304細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL24細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞、THLE-2細(xì)胞

M619細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H498細(xì)胞、PC-10細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞

SK-RC 42細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 13細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞、USMC細(xì)胞

BC-019細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR 8細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞

GLC82細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCTC 929細(xì)胞、Panc5.04細(xì)胞、TE-8細(xì)胞

CEM-C1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Reuber H35細(xì)胞、AG06814-J細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞

SNG-M Cell|人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞

H841細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16 F1細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞、TE-671細(xì)胞

LC-1 sq細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEM/C1細(xì)胞、NCI-H1618細(xì)胞、Bac1 2F5細(xì)胞

L-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L02細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞、HOS-143B細(xì)胞

VK2 (E6/E7)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO-320細(xì)胞、GM0637細(xì)胞、CNE1-LUC細(xì)胞

Balb/c 3T3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ACCM細(xì)胞、NRK細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞

CHOK1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKRC20細(xì)胞、R 1610細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞

HFLS-RA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Evsa-T細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞

BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SVHUC細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞、H-1573細(xì)胞

BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SVHUC細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞、H-1573細(xì)胞

HEH2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、SNU119細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞

MDAMB435細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH647細(xì)胞、PTK1細(xì)胞、UACC 812細(xì)胞

High5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C2BBe 1細(xì)胞、Kit225 K6細(xì)胞、BrCL15細(xì)胞

H250細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VM-CUB1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞、NU-GC-2細(xì)胞

CoC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：D324細(xì)胞、L540細(xì)胞、74Int細(xì)胞

Capan 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAOV3細(xì)胞、BHP 10-3細(xì)胞、NCI-SNU-5細(xì)胞

NCI-H1734細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IEC-6細(xì)胞、SKO-007細(xì)胞、RPE1細(xì)胞

Huh 7.5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MiaPaCa2細(xì)胞、Lewis Lung Cancer細(xì)胞、SUM 190細(xì)胞

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