"NCI-H2227 Cell|人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞接收操作說明：請(qǐng)仔細(xì)閱讀本操作說明及相應(yīng)的細(xì)胞說明書。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會(huì)用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長(zhǎng)期經(jīng)驗(yàn)來說，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(Zui主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個(gè)人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用，如細(xì)胞密度GAO于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時(shí)T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會(huì)長(zhǎng)得很慢，嚴(yán)重的，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn))，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

HCC-78細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H358細(xì)胞、RPMC細(xì)胞、L-Wnt-3A細(xì)胞

RPMI 7951細(xì)胞類似產(chǎn)品：：X63.Ag8.653細(xì)胞、H-1876細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞

HELA-GFP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：251MG細(xì)胞、H-820細(xì)胞、YD38細(xì)胞

HRPEpiC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HDQ-P1細(xì)胞、WERI細(xì)胞、JG細(xì)胞

Dami細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VeroC1008細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

NCI-H2227 Cell|人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞鋪板大概是我們Zui常見的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤(rùn)洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長(zhǎng)消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開一點(diǎn)孔底即可，不要離底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)（逆時(shí)針效果不HAO），依次敲擊剩余三個(gè)邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個(gè)孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動(dòng)浸潤(rùn)整個(gè)孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤(rùn)孔底，其它孔依此類推，這樣整個(gè)孔底都是濕潤(rùn)的，細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板HAO掌握，效果沒有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細(xì)胞以后(比如傳代HAO/分HAO細(xì)胞以后)，先順時(shí)針搖晃3次，馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。

Vero C1008細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 206F細(xì)胞、SU 86.86細(xì)胞、TW01細(xì)胞

M109細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JAR細(xì)胞、RGC5細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞

OCILY-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 888Lu細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞

COLO320-DM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HuO9細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：４傳代；每周換液２次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

Vero C1008細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 206F細(xì)胞、SU 86.86細(xì)胞、TW01細(xì)胞

M109細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JAR細(xì)胞、RGC5細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞

OCILY-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 888Lu細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞

COLO320-DM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HuO9細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：該細(xì)胞既有懸浮生長(zhǎng)，又有貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

BT20細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OV-90細(xì)胞、MDAMB361細(xì)胞、PANC-04-03細(xì)胞

D-341 Med細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR8/ADR細(xì)胞、EOC-20細(xì)胞、HuCC-T1細(xì)胞

LA-N-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1781細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞

COLO829細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS-695T細(xì)胞、L-02細(xì)胞、H341細(xì)胞

Sci-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Anip-973細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞、ECC 10細(xì)胞

NCIH727細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-N87細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞、SW1573細(xì)胞

P3/X63-Ag8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MHCC 97細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞、HCC-366細(xì)胞

NCI-H322細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEM-T4細(xì)胞、MCA205細(xì)胞、BT 20細(xì)胞

WI 38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM-346細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞

RH7777細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KALS-1細(xì)胞、HCC-827細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞

NCI-H2227 Cell|人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

SK ES 01細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MKN45細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞

CA-OV-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HIT T15細(xì)胞、VK2 (E6/E7)細(xì)胞、L6565細(xì)胞

HCC 2185細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1930細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、N2a細(xì)胞

SCC-25細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ZR75-1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞

COLO-679細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE-6細(xì)胞、H283細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞

EB-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、U251n細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞

EB-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、U251n細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞

LLC-PK(1)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞

H-460細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GLC-82細(xì)胞、RT-4細(xì)胞、B16F0細(xì)胞

MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCILY10細(xì)胞、RCC23細(xì)胞、CRFK細(xì)胞

B-CPAP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MuM-2C細(xì)胞、SW 527細(xì)胞、KYSE 30細(xì)胞

COLO206細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NALM-6-M1細(xì)胞、H-II-E-C3細(xì)胞、SU-DHL-16細(xì)胞

SKBr3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs-281-T細(xì)胞、HFTF細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞

OCI-LY-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKO007細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞

NCIH1568細(xì)胞類似產(chǎn)品：：THEECs細(xì)胞、118 MG細(xì)胞、RPMC細(xì)胞

SK-ChA-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHL細(xì)胞、PC-3細(xì)胞、TOV-112D細(xì)胞

B95-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE 32.T細(xì)胞、CoC1細(xì)胞、118MG細(xì)胞

GM17346細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-375.S2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞、NCIH2342細(xì)胞

IMR 90細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-398細(xì)胞、SCLC-21H細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞

Adeno 293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO-824細(xì)胞、Hep-G2/C3A細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞

Fetal Human Lens-124細(xì)胞類似產(chǎn)品：：bEnd.3[BEND3]細(xì)胞、A375-S2細(xì)胞、A-431細(xì)胞

FCCH1018細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VP 229細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞

GP5d細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKES-1細(xì)胞、OCI-AML2細(xì)胞、Vero細(xì)胞

GP5d細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKES-1細(xì)胞、OCI-AML2細(xì)胞、Vero細(xì)胞

NHLF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：149PT細(xì)胞、A-1847細(xì)胞、Anglne細(xì)胞

OSRC2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GL261細(xì)胞、Hep 3B2.1-7細(xì)胞、CA-OV-3細(xì)胞

NMCG-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM00215細(xì)胞、TE-32細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞

NCIH1975細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 480細(xì)胞、Tb 1 Lu細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞

Porcine Kidney-15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PLA801C細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞

NCI-H2227 Cell|人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

WEHI-279細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P31FUJ細(xì)胞、LICCF細(xì)胞、PC14細(xì)胞

RWPE-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C 643細(xì)胞、SF-539細(xì)胞、NT2D1細(xì)胞

MSF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2227細(xì)胞、U87-MG細(xì)胞、Panc 10.05細(xì)胞

RPMI7951細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、HT144細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞

COLO-829細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-10細(xì)胞、SW48細(xì)胞、CA 46細(xì)胞

YH-13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEp-2細(xì)胞、NT2細(xì)胞、SHEE細(xì)胞

SK RC 20細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OV1-P細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞

MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SHP-77細(xì)胞、JF305細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞

OCI AML2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MKN-45細(xì)胞、SUNE1細(xì)胞、GM00346B細(xì)胞

CEMO-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-1395細(xì)胞、MADB 106細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞

C2-C12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AQ-Mel細(xì)胞、WEHI3細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞

MFE280細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EBC1細(xì)胞、MG-63細(xì)胞、BaF3細(xì)胞

SKNBE2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PGBE1細(xì)胞、C26細(xì)胞、DHL-2細(xì)胞

HCC2279細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HuCC-T1細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞、LIM-1215細(xì)胞

B-CPAP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MuM-2C細(xì)胞、SW 527細(xì)胞、KYSE 30細(xì)胞

578T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ME1細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞、HT 29細(xì)胞

KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1299細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞、C6細(xì)胞

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