"KLE Cell|人子宮內膜癌細胞
細胞背景資料:該細胞源自64歲子宮內膜癌女性患者
細胞形態(tài):上皮細胞樣
養(yǎng)了幾年細胞,說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法:1)培養(yǎng)細胞前,可以看看細胞點說明書,包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等;2)不同細胞生長周期不同,有的生長很快,比如說MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經足夠了,有的又是別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復蘇起始的時候兩周多才能長滿,所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了;3)對于嬌弱的細胞,就得細心呵護了,胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉速和時間,每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況;4)凍存細胞復蘇后第二天ZuiHAO更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細胞Zui大的教訓:不能偷懶!細胞虐我千百遍,我待細胞如初戀。1)不管買的細胞、惠贈的細胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存;2)發(fā)現有污染迅速處理掉,別是當你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染,真菌污染很容易發(fā)現,支原體污染的話,細胞會長的慢,買個支原體檢測的kit定期檢測一下;3)傳代細胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個人衛(wèi)生。
細胞生長:貼壁
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細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
KLE Cell|人子宮內膜癌細胞
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
在細胞培養(yǎng)過程中會出現這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數、接種量等;2)避免產生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,ZuiHAO經過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內無CO2;2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大;3)細胞凍存或復蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
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細胞傳代方法:1:3傳代,3-4天換液一次
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
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細胞生長特性:貼壁生長
細胞系永生化原理介紹:多數正常細胞的壽命是有限的,能傳20-100代,但有些細胞,尤其是來自嚙齒類或來自多數腫瘤的細胞,可以產生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的,在傳到12代左右以后可能出現危相,多數細胞在這個階段死亡了,但少數細胞存活下來,并擁有了更GAO的生長率,成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程,包括一系列細胞周期的調節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作,病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化,其原理如下:SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產物-T抗原,可與Rb和p53結合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長,同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性,從而使基因組的不穩(wěn)定性增加,也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調端粒酶或下調端粒酶抑制物的活性)。用含可調節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉染,足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應用的有:EBV用于淋巴母細胞樣細胞;SV40 LT用于黏附細胞,如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質形成細胞(Steinberg,1996) 和內皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質干細胞和其他一些細胞。
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KLE Cell|人子宮內膜癌細胞
HBMEC細胞類似產品::LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞
KATO 3細胞類似產品::WTRL1細胞、L929細胞、HCC1438細胞
HLEB3細胞類似產品::McA-RH 7777細胞、2780CP細胞、NRK-52E細胞
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關鍵字: KLE Cell|人子宮內膜癌細胞;
上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。