"MDA-MB-435S Cell|人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：MDA-MB-４３５S是一種紡錘形的細(xì)胞，１９７６年由其親本(４３５)中篩選得到。４３５是從３１歲的轉(zhuǎn)移性乳腺導(dǎo)管腺癌女性患者胸水中分離得到。當(dāng)用熒光染料對(duì)微管蛋白進(jìn)行染色時(shí)親本細(xì)胞顯現(xiàn)散布特征(II型)。最近通過cDNA陣列研究表明，親本(MDA-MB-４３５)可歸入黑素瘤起源。

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長：貼壁

Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Det. 562細(xì)胞、MV522細(xì)胞、MAC1細(xì)胞

PGBE1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Simpson細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞、HSF細(xì)胞

HEK 293-EBNA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HIT clone T15細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞、HCC-70細(xì)胞

DMS-53細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPDEC細(xì)胞、293EBNA細(xì)胞、FHs 74 Int細(xì)胞

NCI-H2087細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1436細(xì)胞、RT4P細(xì)胞、Chang liver細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

MDA-MB-435S Cell|人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞鋪板大概是我們Zui常見的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開一點(diǎn)孔底即可，不要離底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)（逆時(shí)針效果不HAO），依次敲擊剩余三個(gè)邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個(gè)孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動(dòng)浸潤整個(gè)孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個(gè)孔底都是濕潤的，細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板HAO掌握，效果沒有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細(xì)胞以后(比如傳代HAO/分HAO細(xì)胞以后)，先順時(shí)針搖晃3次，馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。

HCT-116細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TGW-I-nu細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞、HCET細(xì)胞

Mv 1 Lu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Sf-21細(xì)胞、C4-1細(xì)胞、RL-65細(xì)胞

Huh-7.5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK 293-H細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞、MA104細(xì)胞

ST細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HGF-1細(xì)胞、THPI細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：消化３-５分鐘，１：２,３天內(nèi)可長滿

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

HCT-116細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TGW-I-nu細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞、HCET細(xì)胞

Mv 1 Lu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Sf-21細(xì)胞、C4-1細(xì)胞、RL-65細(xì)胞

Huh-7.5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK 293-H細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞、MA104細(xì)胞

ST細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HGF-1細(xì)胞、THPI細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁生長

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

M4e細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GBCSD細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞、H676B細(xì)胞

PF-382細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HuT-102細(xì)胞、Hs888 Lu細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞

WIL2 Secreting細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-441細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞

CHL-CL-11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AE1201細(xì)胞、H-2228細(xì)胞、H125細(xì)胞

COLO320 DM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RCC 7860細(xì)胞、A431/P細(xì)胞、MDA-1386細(xì)胞

P3-Jiyoye細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M-NFS-60細(xì)胞、SHZ-88細(xì)胞、SK-RC-39細(xì)胞

HuT 102細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAKI 1細(xì)胞、GM15452細(xì)胞、SW954細(xì)胞

SCC-1395細(xì)胞類似產(chǎn)品：：mREC細(xì)胞、HCC-1500細(xì)胞、Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞

Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW756細(xì)胞、CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞、MOLT-16細(xì)胞

L-Wnt3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hk-2細(xì)胞、Hs1.Tes細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞

MDA-MB-435S Cell|人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

IPEC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKNBE2C細(xì)胞、hFOB細(xì)胞、Mel526細(xì)胞

BPH1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U118MG細(xì)胞、MDA-MB-435-S細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞

OVCAR-433細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-435 S細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞

Huh7.5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs819.T細(xì)胞、L-WRN細(xì)胞、Mono Mac6細(xì)胞

INS1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR-8細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、MRCV細(xì)胞

OCI-AML3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞

OCI-AML3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞

Hs 445細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OP9細(xì)胞、TK.10細(xì)胞、H-1963細(xì)胞

SaOS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EA.Hy926細(xì)胞、RPMI #8226細(xì)胞、CWR22R-V1細(xì)胞

ONS-76細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3D4/21細(xì)胞、SC細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞

LIM-1215細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PANC0327細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞、GM00637F細(xì)胞

NCI-SNU-886細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SJSA-1細(xì)胞、MGC-803細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞

OVCAR433細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BEL/FU細(xì)胞、HBZY-1細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞

CO115細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK.MEL.5細(xì)胞、PECAPJ34細(xì)胞、MADB-106細(xì)胞

NCI-H-295細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KM932細(xì)胞、LN-229細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞

MDA-MB-157細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A 172細(xì)胞、KGN細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞

J111細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH650細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞

Human Embryo Kidney-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-251-MG細(xì)胞、JROECL 21細(xì)胞、C-26細(xì)胞

KY-50細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CL MC/9細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞

SW-839細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCILY19細(xì)胞、H-87細(xì)胞、Hi5細(xì)胞

JB6 Cl 30細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞

HME1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC 116細(xì)胞、LNCaP clone FGC細(xì)胞、NCIH1666細(xì)胞

MDA-MB 453細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LoVo細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞、2780CP細(xì)胞

Rainbow Trout Embryo細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SupB15W細(xì)胞、BOWES細(xì)胞、TOG細(xì)胞

MCF-7/AdrR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI no 8226細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞

KYSE270細(xì)胞類似產(chǎn)品：：2780CP細(xì)胞、P3JHR1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞

HuPT3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LU165細(xì)胞、624-mel細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞

U118細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HNE-2細(xì)胞、GM17346細(xì)胞、MRAEC細(xì)胞

RKN細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tu177細(xì)胞、OE33細(xì)胞、ECV304細(xì)胞

MDA-MB-435S Cell|人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

HCC1954BL細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HA1800細(xì)胞、S-16細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞

P30OHK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rat-2細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞

NCIH740細(xì)胞類似產(chǎn)品：：95C細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞

Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1395細(xì)胞、87 MG細(xì)胞、OCILY-3細(xì)胞

P3/X63-Ag8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MHCC 97細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞、HCC-366細(xì)胞

PATU-S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SHZ-88細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞、SW620細(xì)胞

B16 subline B78細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKMEL-2細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞、CALU1細(xì)胞

MPC-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-886細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞

MC-116細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SBC3細(xì)胞、NPA87-1細(xì)胞、H-510細(xì)胞

CPA 47細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC1954-BL細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞、FHL-124細(xì)胞

NSC-34細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CMK細(xì)胞、FRhK-4細(xì)胞、SKRC 39細(xì)胞

U118MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2141細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞

MSF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2227細(xì)胞、U87-MG細(xì)胞、Panc 10.05細(xì)胞

Kasumi 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Nb2-11細(xì)胞、PC.3細(xì)胞、SK_N_FI細(xì)胞

Hs-578-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2196細(xì)胞、OKa-C-1細(xì)胞、H-2228細(xì)胞

N1E-115細(xì)胞類似產(chǎn)品：：87MG細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞、AML193細(xì)胞

MCM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P-36細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞、MFE280細(xì)胞

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