"OCI-Ly7人彌漫大B淋巴瘤復蘇細胞(附STR鑒定報告)

細胞生長：懸浮

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞培養(yǎng)中的污染分為兩類，化學污染和生物污染。化學污染是一些對細胞有毒性的或對細胞產生刺激的化學物質。這些污染一般來自于沒有洗凈的器皿、不純的化學試劑和質量較差的蒸餾水等?；瘜W污染中比較引人注意的是細菌內毒素。它是革蘭氏陰性細菌細胞死亡后解體釋放出的疏水性的細胞壁組成物質，對塑料等疏水性強的物質有很強的吸附能力。細菌內毒素可刺激部分細胞產生一些激素或細胞因子，對細胞生長和實驗結果產生影響。細菌內毒素是臨床上的主要的熱原（即注射到動物體內會導致動物發(fā)熱），所以通過細胞培養(yǎng)生產的疫苗、細胞因子等用在臨床上的藥品的生產過程中更是要避免細菌內毒素的污染。

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細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

OCI-Ly7人彌漫大B淋巴瘤復蘇細胞(附STR鑒定報告)

在使用胰酶細胞消化液的過程中要別注意避免消化液被細菌污染。胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差。貼壁細胞的消化：吸去培養(yǎng)液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清；加入少量胰酶細胞消化液，略蓋過細胞即可，根據(jù)胰酶效率差異可以增加惑減少胰酶用量。室溫放置30秒至2分鐘（不同的細胞消化時間有所不同）；顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化呈白茫狀；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛HAO可以被吹打下來；此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的完全細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入胰酶細胞消化液重新消化。如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘，沉淀細胞，盡量去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。常用的細胞消化液為胰蛋白酶（Trypsin），EDTA等，其功能主要是使細胞間的蛋白質（如細胞外基質）水解，改變細胞間的連接，使組織或細胞片分散成單個細胞，制成細胞懸液用于進一步的實驗。

細胞背景資料：彌漫大B淋巴瘤；男性

細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣

OCI-Ly7人彌漫大B淋巴瘤復蘇細胞(附STR鑒定報告)

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

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細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

用T25培養(yǎng)瓶復蘇細胞：新的T25瓶1個，含8ml完全培養(yǎng)液；凍存管從液氮或-80℃中取出，37℃水1-2min，待完全溶解（觀察凍存管內沒有冰晶時）后盡快移入安全柜復蘇；用無菌吸管吸取溶解液輕打入新制 T25 瓶中，順時針搖勻；放入相應培養(yǎng)條件的培養(yǎng)箱中，過夜換液，2-4天長滿。（具體參考細胞倍增時間）；10cm培養(yǎng)皿復蘇細胞：新10cm培養(yǎng)皿1個，含12mL完全培養(yǎng)液；凍存管從液氮或-80℃中取出，37℃水浴1-2min，待完全溶（觀察凍存管內沒有冰晶時）后盡快移入安全柜復蘇；用無菌吸管吸取溶解液輕打入新制平皿中，順時針搖勻；放入相應培養(yǎng)條件的培養(yǎng)箱中，過夜換液，2-4天長滿。（具體以細胞周期為準），細胞復蘇注意問題：復蘇過程應迅速操作，時間不能太長，復蘇過程中注意操作，防止污染，細胞復蘇去除DMSO，不同的細胞對DMSO敏感度不同，根據(jù)細胞性選擇是否離心，大多數(shù)細胞是復蘇后，第天換液去除DMSO，避免剛復蘇細胞受離心造成的機械損傷。

細胞生長特性：懸浮

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