"BEL-7402 Cell|人肝癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：BEL-７４０２細(xì)胞株是１９７４年從臨床肝癌手術(shù)標(biāo)本中建立的。

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時間，消化時間過短時，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細(xì)胞消化時間相對延長。

細(xì)胞生長：貼壁

HuPT4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC-38細(xì)胞、Loucy細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞

Sci-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Anip-973細(xì)胞、WM-239-A細(xì)胞、639-V細(xì)胞

DMS-79細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U031細(xì)胞、751-NA細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞

MCA38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-hth74細(xì)胞、X63Ag8-653細(xì)胞、HANK-1細(xì)胞

SU.86.86細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Vero 76 clone E6細(xì)胞、Hs940.T細(xì)胞、HME1細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

BEL-7402 Cell|人肝癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做HAO標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

LLC-PK1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TR146細(xì)胞、RBE4細(xì)胞、A549/ATCC細(xì)胞

Mono Mac6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：138 MG細(xì)胞、KATOIII細(xì)胞、SCC-9細(xì)胞

SK-MEL-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU638細(xì)胞、Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞

MV-1-Lu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BIU-87/Adr細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：消化３-５分鐘，１：２,３天內(nèi)可長滿

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

LLC-PK1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TR146細(xì)胞、RBE4細(xì)胞、A549/ATCC細(xì)胞

Mono Mac6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：138 MG細(xì)胞、KATOIII細(xì)胞、SCC-9細(xì)胞

SK-MEL-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU638細(xì)胞、Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞

MV-1-Lu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BIU-87/Adr細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁生長

細(xì)胞傳代比例：對于有限細(xì)胞系，傳代時以二、四、八或十六倍(傳代比率分別是2、4、8和16)降低細(xì)胞密度，計(jì)算群體倍增數(shù)更容易(即分別是傳代比率2對應(yīng)1次倍增，4對應(yīng)2次倍增，8對應(yīng)3次倍增，16對應(yīng)4次倍增)；例如，一傳八的培養(yǎng)物需要3次倍增才能達(dá)到原來相同的細(xì)胞密度。脆弱的或生長緩慢的細(xì)胞系通常一傳二，而有活力的，生長快速的細(xì)胞系可以一傳八，甚至一傳十六。有些連續(xù)細(xì)胞系可一傳五十或一傳100。一旦細(xì)胞系變?yōu)檫B續(xù)細(xì)胞系(通常經(jīng)過150次或200次倍增以上)，細(xì)胞濃度是主要參數(shù)，培養(yǎng)濃度應(yīng)降至10(4)/ml--10(5)/ml之間?？蛇x擇傳代間隔合適的傳代比率或稀釋度，或許為1周或2周，同時要保證：細(xì)胞密度不可稀釋過低，使其延遲期合理(在24小時以內(nèi))，可重新進(jìn)入生長周期；而且在下次傳代前不進(jìn)人平臺期。

BGC823細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KM12SM細(xì)胞、Hep G2/C3A細(xì)胞、MLMA細(xì)胞

ECC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、GM-3573細(xì)胞、DKMG細(xì)胞

HS-766T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-1353細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞、C32r細(xì)胞

BSC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COV 504細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞、RBMVEC細(xì)胞

NCI-H2330細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 403細(xì)胞、NCI-H820細(xì)胞、MFC細(xì)胞

Human ErythroLeukemia細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EBC-1細(xì)胞、LAN6細(xì)胞、GM3570細(xì)胞

PNEC30細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ly7細(xì)胞、FHC細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞

A-875細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCA-433細(xì)胞、Helacyton gartleri細(xì)胞、MIA Paca2細(xì)胞

MB49細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOC細(xì)胞、SF-763細(xì)胞、Mhh-Call 2細(xì)胞

Nthy-ori 3.1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CL 1-5細(xì)胞、LLC-PK(1)細(xì)胞、IPEC1細(xì)胞

BEL-7402 Cell|人肝癌細(xì)胞

EHEB細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE-270細(xì)胞、SK-N-DZ細(xì)胞、Rh30細(xì)胞

32Dcl3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIH3T3細(xì)胞、A 2780 CP細(xì)胞、WPMY-1細(xì)胞

SPDC-CCL141細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCC-HEH-2細(xì)胞、CHP-126細(xì)胞、LTEP a2細(xì)胞

NCIH660細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UCLA-SO-14細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞、KAT5細(xì)胞

TCam-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKMES-1細(xì)胞、NB-9細(xì)胞、HFF細(xì)胞

HUT-28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P-815細(xì)胞、Hut292細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞

HUT-28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P-815細(xì)胞、Hut292細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞

SK-Hep1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hepatoma 22細(xì)胞、YH細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞

SW-780細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-251 MG細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞、ID8細(xì)胞

NCI-H2081細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H102細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞

NCI-H2135細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DV90細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞、ISHI細(xì)胞

HEK-293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、OCI-Ly19細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞

EC-9706細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LTEP-s細(xì)胞、BaF3細(xì)胞、G292細(xì)胞

HS940細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc_02_03細(xì)胞、Anip-973細(xì)胞、A-9細(xì)胞

DHL-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NS-1細(xì)胞、CAL-51細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞

SAS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GA-10-Clone-4細(xì)胞、NPA細(xì)胞、H-650細(xì)胞

hFOB細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H.Ep. No. 2細(xì)胞、NCI-446細(xì)胞、COV 504細(xì)胞

H661細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ABC1細(xì)胞、BHK21細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞

UM2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞、Molm 14細(xì)胞

RCCJF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HSC-1細(xì)胞、UMUC1細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞

NCIH520細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUDHL-16細(xì)胞、A 172細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞

FRTL-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs-675-T細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞

KPL-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM2219C細(xì)胞、WC00044細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞

HTR8/SVneo細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COS7細(xì)胞、P19細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞

alpha TC1 clone 6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Leukemic 1210細(xì)胞、COLO-320-HSR細(xì)胞、H19-7細(xì)胞

IBRS2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DoTc2-4510細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞、SW780細(xì)胞

MG-HU-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE-32細(xì)胞、CCD-1112sk細(xì)胞、LTEPa2細(xì)胞

Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CT26.WT細(xì)胞、JTC-39細(xì)胞、MMVECs細(xì)胞

A375-S2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞、SU-DHL-16細(xì)胞、C8166細(xì)胞

BEL-7402 Cell|人肝癌細(xì)胞

H498細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MES-23.5細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞

HO-8910PM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3T6細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞、T98G細(xì)胞

X63-Ag8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H187細(xì)胞、SW 1783細(xì)胞、H1930細(xì)胞

GC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞、Hs 695T細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞

DV90細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、RenCa細(xì)胞、373 MG細(xì)胞

NCL-H548細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOLM13細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞、BEAS 2B細(xì)胞

Fetal Human Lens-124細(xì)胞類似產(chǎn)品：：bEnd.3[BEND3]細(xì)胞、A375-S2細(xì)胞、A-431細(xì)胞

A-375細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H647ell細(xì)胞、A.704細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞

JCA-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NTC-200細(xì)胞、H-1975細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞

H28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1618細(xì)胞、HOK細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞

SUM 52PE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OKa-C-1細(xì)胞、HT 1376細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞

INS1E細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEC1B細(xì)胞、KTCTL140細(xì)胞、HEK 293T/17細(xì)胞

SPDC-CCL141細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCC-HEH-2細(xì)胞、CHP-126細(xì)胞、LTEP a2細(xì)胞

NCI-H596細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDCK supertube細(xì)胞、Vero C1008細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞

MCA 205細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 1417細(xì)胞、Vero-E6細(xì)胞、SCL1細(xì)胞

GDM1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Jurkat-FHCRC細(xì)胞、WPMY-1細(xì)胞、MKN-1細(xì)胞

H187細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H748細(xì)胞、TE-7細(xì)胞、H2342細(xì)胞

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