"SW480 Cell|人結(jié)腸癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：SW４８０源自一位５１歲白人男性患者的原位直腸腺癌，而SW６２０源自同一病人一年后的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶。該細(xì)胞CSAp和直腸抗原３陰性；角蛋白陽(yáng)性；p５３基因第２７３位密碼子的G→A突變引起Arg→His替代，３０９位密碼子的C→T突變導(dǎo)致Pro→Ser替代；細(xì)胞p５３蛋白表達(dá)水平升高；癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達(dá)呈陽(yáng)性；未檢測(cè)到癌基因N-myc的表達(dá)；不表達(dá)Matrilysin（一種與腫瘤侵襲相關(guān)的金屬蛋白酶）。

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

MDA-MB453細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CCD966SK細(xì)胞、NCI-H1734細(xì)胞、NCIH2135細(xì)胞

RAOEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KNS62細(xì)胞、RMS 13細(xì)胞、LN229細(xì)胞

CAL-148細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：253J-Bladder-V細(xì)胞、Soleus clone 8細(xì)胞、ECC-10細(xì)胞

WM115mel細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Panc203細(xì)胞、DLD 1細(xì)胞、HEP3B2細(xì)胞

H295R-S1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MILE SVEN 1細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞、HCC202細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

SW480 Cell|人結(jié)腸癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類(lèi)的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周?chē)?，然后通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到Zui低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良HAO的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

HCEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HARAB細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞

Ly3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H295R細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞

B95.8細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BC-3-H-I細(xì)胞、HT29細(xì)胞、Kit-225-K6細(xì)胞

HCT/Taxo1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NTERA2-D1細(xì)胞、RKN細(xì)胞、NW-MEL-38細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２傳代，１-２天換液一次

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

HCEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HARAB細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞

Ly3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H295R細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞

B95.8細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BC-3-H-I細(xì)胞、HT29細(xì)胞、Kit-225-K6細(xì)胞

HCT/Taxo1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NTERA2-D1細(xì)胞、RKN細(xì)胞、NW-MEL-38細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類(lèi)或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類(lèi)動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

CMT 64細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TGBC11T細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞、NEC8細(xì)胞

HHFK細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HEMCSS細(xì)胞、MDA-MB-134細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞

SK-MEL 28細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NS1-Ag4細(xì)胞、OSC19細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞

HOS (TE85)細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H4-IIE-C3細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞

6-10B細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-ChA-1細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞、SU-86-86細(xì)胞

SK-GT-4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：6-10B細(xì)胞、H1963細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞

H719細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CAL-78細(xì)胞、MV411細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞

H-2107細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：rUCMSCs細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞、H-1688細(xì)胞

OVCAR 420細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Panc 02.03細(xì)胞、GM01232細(xì)胞、Hs675T細(xì)胞

BSC-40細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MC/9細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞、ANA1細(xì)胞

SW480 Cell|人結(jié)腸癌細(xì)胞

J774A1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H676細(xì)胞、OVCAR 432細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞

VMCUB1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-508細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞

NCTC-3960細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：JVM-2細(xì)胞、HuT102細(xì)胞、TPC-1細(xì)胞

293-FT細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞、H-2066細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞

PF-382細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HuT-102細(xì)胞、Hs888 Lu細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞

FRTL5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HPASMC細(xì)胞、HARA-B細(xì)胞、FDCP-1細(xì)胞

ECC 10細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LC1-Sq細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞、HEEpiC細(xì)胞

NCIH1436細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞

NTera2/D1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PK13細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞、HEK293A細(xì)胞

HS-766T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SW-1353細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞、C32r細(xì)胞

DV90細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、RenCa細(xì)胞、373 MG細(xì)胞

LK 2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MZ-CRC-1細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞、J774 A1細(xì)胞

MPP-89細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Adeno-293細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞

OCIAML4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NG10815細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞

GOS-3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SW-837細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞、OV-90細(xì)胞

Hs 832(C).T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-2085細(xì)胞、NW38細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞

NCI-SNU-878細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：VERO C 1008細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞、COR L279細(xì)胞

LAD 2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：GC-1細(xì)胞、SN4741細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞

HSF2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：ssMCF-7細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞

ATC241細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HT 1080.T細(xì)胞、CA922細(xì)胞、MDBK細(xì)胞

EBNA293細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HSC-I細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞、MiaPaCa2細(xì)胞

HFF-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MHCC 97-L細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞、HCC827細(xì)胞

UCLA NPA871細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MADB106細(xì)胞、A2780 CP70細(xì)胞、MDAMB361細(xì)胞

C518細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞

GLC82細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCTC 929細(xì)胞、Panc5.04細(xì)胞、TE-8細(xì)胞

H-1437細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-64細(xì)胞、L02細(xì)胞、PA-TU S細(xì)胞

HuT 102細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CAKI 1細(xì)胞、GM15452細(xì)胞、SW954細(xì)胞

HS-5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HEK293-F細(xì)胞、HEK293細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞

MC3T3-L1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：C-Li-7細(xì)胞、BV2細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞

SW480 Cell|人結(jié)腸癌細(xì)胞

UM-UC-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：FM88細(xì)胞、YT細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞

MDCKII-WT細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MMAc-SF細(xì)胞、HRGEC細(xì)胞、JVM2細(xì)胞

P30-OHK細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDA468細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞、H441細(xì)胞

MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：GLRK 13細(xì)胞、EJ1細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞

OCI/AML-5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：EC-GI-10細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞

H676B細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CEM T4細(xì)胞、AN3細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞

C38細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SUDHL1細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞

NCI-H2195細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞、HEK 293 EBNA細(xì)胞、VMCUB1細(xì)胞

Sf21細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：U-251_MG細(xì)胞、NHRF細(xì)胞、HT-3細(xì)胞

NHLF細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：149PT細(xì)胞、A-1847細(xì)胞、Anglne細(xì)胞

A3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞

Detroit 562細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SUDHL6細(xì)胞、PaTu 8988s細(xì)胞、Hs746T細(xì)胞

C8-D1A細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MN9D細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞

SNU1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：K-1735細(xì)胞、SNU449細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞

EM-3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：WERI-Rb-1細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞、CNE-2細(xì)胞

SW-780細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：U-251 MG細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞、ID8細(xì)胞

HPMEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hela-mock細(xì)胞、GEO細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞

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