"RC-K8 Cell|人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：彌漫大B淋巴瘤；腹腔轉(zhuǎn)移；男性

細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е拢覀冊(cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮

RPE-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、H-1793細(xì)胞、HFLS細(xì)胞

Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-MES1細(xì)胞、HMSC細(xì)胞、HN 4細(xì)胞

F442A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TO 175.T細(xì)胞、K-1735細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞

HS5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：huH 1細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞

GP293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞、FL-83B細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

RC-K8 Cell|人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞鋪板大概是我們Zui常見的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤(rùn)洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長(zhǎng)消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開一點(diǎn)孔底即可，不要離底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)（逆時(shí)針效果不HAO），依次敲擊剩余三個(gè)邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個(gè)孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動(dòng)浸潤(rùn)整個(gè)孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤(rùn)孔底，其它孔依此類推，這樣整個(gè)孔底都是濕潤(rùn)的，細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板HAO掌握，效果沒有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細(xì)胞以后(比如傳代HAO/分HAO細(xì)胞以后)，先順時(shí)針搖晃3次，馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。

SKMEL3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H146細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞、COV434細(xì)胞

Pa18C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS-766T細(xì)胞、BSC40細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞

Hs 746.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK_N_BE2C細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞

SV40-HCEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IOSE-Mar細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

SKMEL3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H146細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞、COV434細(xì)胞

Pa18C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS-766T細(xì)胞、BSC40細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞

Hs 746.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK_N_BE2C細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞

SV40-HCEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IOSE-Mar細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

Caki2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BE2C細(xì)胞、OKT 3細(xì)胞、CAL-78細(xì)胞

C-Lu65細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOLP-2細(xì)胞、RCC10細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞

Hs675細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1755細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、Panc 1細(xì)胞

NCIH2291細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mouse Colon 38細(xì)胞、WB F344細(xì)胞、KE37細(xì)胞

LU165細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WIL2-S細(xì)胞、hMSC-BM細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞

NCIH1436細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞

COLO-680N細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK-293FT細(xì)胞、KP 4細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞

NB-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LYR細(xì)胞、HEM細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞

NS20Y細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MA-782細(xì)胞、bEnd.3[BEND3]細(xì)胞、Mc Coy細(xì)胞

LNCaP.FGC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NB-19細(xì)胞、B10BR細(xì)胞、SW-1417細(xì)胞

RC-K8 Cell|人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞

MEL-526細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tj-905細(xì)胞、HEK 293-H細(xì)胞、WILL2細(xì)胞

H2029細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL27細(xì)胞、Panc08.13細(xì)胞、Hs 274細(xì)胞

RCF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HA細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞

LAN1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCE細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞

hA549細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOLT16細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞

Panc 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PA317細(xì)胞、TE5細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞

Panc 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PA317細(xì)胞、TE5細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞

Ej138細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hi5細(xì)胞、MB-49細(xì)胞、G422細(xì)胞

HEI193細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DLD1細(xì)胞、138MG細(xì)胞、UMNSAH/DF-1細(xì)胞

TEV-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：4175細(xì)胞、Pan02細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞

U87 MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：F56 [Human neoplasm]細(xì)胞、Chinese Hamster Lung細(xì)胞、NCI-H929細(xì)胞

SuDHL 4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Evsa T細(xì)胞、H-1876細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞

MC38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QG56細(xì)胞、H-1238細(xì)胞、OCM1A細(xì)胞

LYR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL6細(xì)胞、XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞、HSC6細(xì)胞

RPMI2650細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H747細(xì)胞、HEC-1-A細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞

NCI-H1688細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOLT3細(xì)胞、P 3 HR 1細(xì)胞、CCD 1112SK細(xì)胞

KYSE 50細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HeLa S3細(xì)胞、HM1900細(xì)胞、Huh7.5.1細(xì)胞

University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A 375細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞、NCM-460細(xì)胞

HCC-1833細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、Panc 5.04細(xì)胞、HOCF細(xì)胞

Hs 578T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-N-AS細(xì)胞、F98細(xì)胞、WM 239-A細(xì)胞

KM.12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFLS細(xì)胞、GM02131細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞

Hep-G2/C3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：alpha TC1-6細(xì)胞、BJA-B-1細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞

SCC-15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MKN 28細(xì)胞、SK-MEL-1細(xì)胞、OB2細(xì)胞

B6Tert-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEM-0細(xì)胞、EL4細(xì)胞、SNT8細(xì)胞

NCI-H187細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RCK8細(xì)胞、Y 1細(xì)胞、HEK-293H細(xì)胞

ROS 17/28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-427細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞、Ly19細(xì)胞

PK-13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PG-BE1細(xì)胞、NCI H747細(xì)胞、EBNA-293細(xì)胞

MDA MB 436細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U266-B1細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞

H2107細(xì)胞類似產(chǎn)品：：38C-13細(xì)胞、HIT T-15細(xì)胞、KB細(xì)胞

RC-K8 Cell|人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞

SK-MEL2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO824細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞

NCI-SNU-398細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCC-9細(xì)胞、MDA 231-LM2-4175細(xì)胞、SNU423細(xì)胞

P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE-520細(xì)胞、NCI.H460細(xì)胞、MM1-S細(xì)胞

SW480細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPAEpiC細(xì)胞、SK-LMS-1細(xì)胞、TK-1細(xì)胞

Ketr-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C42細(xì)胞、CCD 966SK細(xì)胞、MES-SA/Dx5細(xì)胞

GI-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUDHL-10細(xì)胞、SW-1088細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞

NRK-52E細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞、Mia PACA 2細(xì)胞、PC9細(xì)胞

Tca8113細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 695T細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞

NCIH1385細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P 815細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞

TMD-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293-FT細(xì)胞、SKNBE-2細(xì)胞、CEM-0細(xì)胞

SVOG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc-1-P細(xì)胞、HCC94細(xì)胞、B10BR細(xì)胞

SHEP1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKRC-39細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞

OEC33細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ZR-75-1細(xì)胞、HPF細(xì)胞、Wien133細(xì)胞

TE 85 ClF-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IGROV細(xì)胞、Neuro 2a細(xì)胞、NCI-SNU-886細(xì)胞

B16 subline B78細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKMEL-2細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞、CALU1細(xì)胞

CCD33Co細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T-47D細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞

CNE-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPBALL細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞

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