"ATN-1 Cell|人T細(xì)胞白血病細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對延長。

細(xì)胞生長：懸浮

PC615.3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC827細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞

SKES1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Madison 109細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞

T-47D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：149 PT細(xì)胞、G519細(xì)胞、SP2細(xì)胞

H1869細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PA12細(xì)胞、SNU-407細(xì)胞、DF1細(xì)胞

NCI.H23細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KRC-Y細(xì)胞、CMK細(xì)胞、H-2085細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

ATN-1 Cell|人T細(xì)胞白血病細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動(dòng)作要輕，以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨(dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

COLO206F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TC7細(xì)胞、INS1細(xì)胞、MonoMac6細(xì)胞

Hs 934.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MV4-11細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞、G 401細(xì)胞

H-510A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HUT28細(xì)胞、Line 207細(xì)胞、McCoy細(xì)胞

H.Ep.-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-886細(xì)胞、PLA802細(xì)胞、BT-B細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

COLO206F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TC7細(xì)胞、INS1細(xì)胞、MonoMac6細(xì)胞

Hs 934.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MV4-11細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞、G 401細(xì)胞

H-510A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HUT28細(xì)胞、Line 207細(xì)胞、McCoy細(xì)胞

H.Ep.-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-886細(xì)胞、PLA802細(xì)胞、BT-B細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

293 c18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-668細(xì)胞、HPAF-I細(xì)胞、A431/P細(xì)胞

Caco2BBe細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tn-5B1-4細(xì)胞、OVCAR4細(xì)胞、LS174T細(xì)胞

8402細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VMCUB1細(xì)胞、BMDC細(xì)胞、WM 2664細(xì)胞

MAntle cell VERona-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CORL88細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞、Tu686細(xì)胞

L-cells細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UPCI-SCC-090細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞

HO-8910細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2081細(xì)胞、LA-795細(xì)胞、SUM159PT細(xì)胞

MHCC 97細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LL2細(xì)胞、EL-4細(xì)胞、MDA-kb2細(xì)胞

EST50細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD-1095Sk細(xì)胞、GLRK 13細(xì)胞、SKES1細(xì)胞

LS123細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS-68細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞、HSMC細(xì)胞

LS 513細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H292細(xì)胞、Molm14細(xì)胞、XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞

ATN-1 Cell|人T細(xì)胞白血病細(xì)胞

38C-13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MAVER細(xì)胞、HT-3細(xì)胞、U343細(xì)胞

NCI-H1417細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KTCTL-140細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞、HuT78細(xì)胞

LTEP-a-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BOWES細(xì)胞、SKNBE(2c)細(xì)胞、A498細(xì)胞

LuCL4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CD 18細(xì)胞、BC-025細(xì)胞、Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞

Hs-611-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-202細(xì)胞、H-1618細(xì)胞、Sol8細(xì)胞

RN細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCC-4細(xì)胞、4T1細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞

PAa細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ML2細(xì)胞、HCC2218細(xì)胞、C-8161細(xì)胞

NCIH345細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 738細(xì)胞、MT4細(xì)胞、Jurkat clone A3細(xì)胞

P3X63 Ag8.653細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞

Panc02細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P815細(xì)胞、KTA-7細(xì)胞、CHOS細(xì)胞

RA 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCTC 1469細(xì)胞、A549 ATCC細(xì)胞、A-704細(xì)胞

SNU-520細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1648細(xì)胞、H-460細(xì)胞、TE-3A細(xì)胞

MDCKII細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H774細(xì)胞、EoL-1-cell細(xì)胞、HCE細(xì)胞

CMT 93細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FaDu細(xì)胞、Hs445細(xì)胞、P3/NS-1細(xì)胞

Rat-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM00215A細(xì)胞、MDA231細(xì)胞、KU-812-F細(xì)胞

MNNG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：I90細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞、SW 839細(xì)胞

C-33A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH740細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞

COLO-320HSR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UACC-812細(xì)胞、G-401細(xì)胞、NIH3T3細(xì)胞

NCIH1869細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2.35細(xì)胞、NCI-H345細(xì)胞、NCI-H-295細(xì)胞

DAKIKI Clone 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-431細(xì)胞、766T細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞

253J B-V細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、HEC-1A細(xì)胞、H838細(xì)胞

HASMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOS TE 85細(xì)胞、LIPF178C細(xì)胞、OCI Ly1細(xì)胞

MS 751細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCA5細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞

HO-1-N-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PGLH7細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞

BJA-B-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GES1細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞、SLMT-1細(xì)胞

P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2444細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞、LC1細(xì)胞

KATO 3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WTRL1細(xì)胞、L929細(xì)胞、HCC1438細(xì)胞

SW900細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H510細(xì)胞、HCA7細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞

Lewis-Lung細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH187細(xì)胞、CCRF細(xì)胞、HCC-1954細(xì)胞

ATN-1 Cell|人T細(xì)胞白血病細(xì)胞

SMA 560細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPAF-II細(xì)胞、H2444細(xì)胞、I90細(xì)胞

PC-3M-2B4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GBC-SD細(xì)胞、HUT125細(xì)胞、Jurkat77細(xì)胞

B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C57/B6-L細(xì)胞、HHL5細(xì)胞、C166細(xì)胞

TM-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LS174細(xì)胞、3T3-A31細(xì)胞、746T細(xì)胞

P3X63-Ag8.653細(xì)胞類似產(chǎn)品：：8226/S細(xì)胞、PC14細(xì)胞、OV3121細(xì)胞

CEK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BEAS 2B細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞

OCI-AML-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS-294T細(xì)胞、MHCC-97細(xì)胞、UMUC3細(xì)胞

C-28I2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPPVEC細(xì)胞、H-1650細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞

NK-92.05細(xì)胞類似產(chǎn)品：：32D-Cl3細(xì)胞、H1573細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞

TOV-112細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-626細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞

Hs 604.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2073細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞

TALL1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VERO76細(xì)胞、293-H細(xì)胞、SHZ-88細(xì)胞

MAVER1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-761細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞

NCI-H510A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：G-292 clone A141B1細(xì)胞、H209細(xì)胞、CL1.0細(xì)胞

RGC5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HeLa.S3細(xì)胞、L- cell細(xì)胞、SW839細(xì)胞

UACC 812細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RL-952細(xì)胞、VMM5細(xì)胞、Tu212細(xì)胞

NCI-SNU-475細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PANC-02-03細(xì)胞、Madison細(xì)胞、BHP-10細(xì)胞

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