"Reh Cell|人急性非B非T淋巴細胞性白血病細胞
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結】原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態(tài)不HAO,邊緣不清楚,細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細胞站YOU勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長,Zui終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞),37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài),所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結果。1)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內的水應是三蒸水;2)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素;3)超凈臺的風機不能過大,風機到6-8格。否則也可能能致霉菌污染;4)無菌室經甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的噴灑中和,約幾小時即可進入操作。
細胞生長:懸浮
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細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Reh Cell|人急性非B非T淋巴細胞性白血病細胞
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,ZuiHAO經過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內無CO2;2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大;3)細胞凍存或復蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
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C3H10T1/2CL8細胞類似產品::SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞
細胞傳代方法:1:2傳代。3天內可長滿。
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
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細胞生長特性:懸浮生長
細胞系永生化原理介紹:多數(shù)正常細胞的壽命是有限的,能傳20-100代,但有些細胞,尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞,可以產生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的,在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相,多數(shù)細胞在這個階段死亡了,但少數(shù)細胞存活下來,并擁有了更GAO的生長率,成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程,包括一系列細胞周期的調節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作,病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化,其原理如下:SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產物-T抗原,可與Rb和p53結合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長,同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性,從而使基因組的不穩(wěn)定性增加,也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調端粒酶或下調端粒酶抑制物的活性)。用含可調節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉染,足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應用的有:EBV用于淋巴母細胞樣細胞;SV40 LT用于黏附細胞,如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質形成細胞(Steinberg,1996) 和內皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質干細胞和其他一些細胞。
T-ALL1細胞類似產品::RS(4;11)細胞、HFE-145細胞、SKMel-5細胞
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OCILY3細胞類似產品::Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞
P388.D1細胞類似產品::SKHEP1細胞、BT 549細胞、U-87MG ATCC細胞
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SEM細胞類似產品::LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞
Reh Cell|人急性非B非T淋巴細胞性白血病細胞
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HLF細胞類似產品::HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞
CACO2細胞類似產品::PCI:SG231細胞、HFB細胞、GBCSD細胞
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關鍵字: Reh Cell|人急性非B非T淋巴細胞;DSMZ細胞株;ATCC細胞系;RCB細胞;ECACC細胞庫;
上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。