周期素D1（抗原） 
免疫途徑常用體內(nèi)免疫法包括皮下注射、腹腔或靜脈注射，也采用足墊、皮內(nèi)、滴鼻或點眼。最后一次加強免疫多采用腹腔或靜脈注射，目前尤其推崇后者，因為可使抗原對脾細胞作用更迅速而充分。在最后一次加強免疫后第3天取脾融合為好，許多實驗室的結(jié)果表明，初次免疫和再次免疫應答反應中，取脾細胞與骨髓瘤細胞融合，特異性雜交瘤的形成高峰分別為第4天和第22天，在初次免疫應答時獲得的雜交瘤主要分泌IgM抗體，再次免疫應答時獲得的雜交瘤主要分泌IgG抗體。筆者體會陽性雜交瘤出現(xiàn)的高峰與小鼠血清抗體的滴度并無明顯的平行關系，且多在血清抗體高峰之前。因此，為達到最高的雜交瘤形成率需要有盡可能多的漿母細胞，這在最后一次加強免疫后第3天取脾進行融合較適宜。已有人報道采用脾內(nèi)免疫，可提高小鼠對抗原的免疫反應性，且節(jié)省時間，一般免疫3天后即可融合。
單抗特性的鑒定⑴ 單克隆性的確定 包括雜交瘤細胞的染色體分析、單抗免疫球蛋白重鏈和輕鏈類型的鑒定和單抗純度鑒定等。A、  雜交瘤細胞的染色體分析對雜交瘤細胞進行染色體分析可獲得其是否是真正的雜交瘤細胞的客觀指標之一，雜交瘤細胞的染色體數(shù)目應接近兩種親本細胞染色體數(shù)目的總和，正常小鼠脾細胞的染色體數(shù)目為40，小鼠骨髓瘤細胞SP2/0為62-68，NS-1為54-64；同時骨髓瘤細胞的染色體結(jié)構(gòu)上反映兩種親本細胞的特點，除多數(shù)為端著絲點染色體外，還出現(xiàn)少數(shù)標志染色體。另一方面，雜交瘤細胞的染色體分析對了解雜交瘤分泌單抗的能力有一定的意義，一般來說，雜交瘤細胞染色體數(shù)目較多且較集中，其分泌能力則高，反之，其分泌單抗能力則低。
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