熒光染料的優(yōu)點(diǎn):
使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價(jià)格便宜;
熒光染料的缺點(diǎn):
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別,進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。
總的來說,SYBR Green I方法是一種最基礎(chǔ)也最常用的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
產(chǎn)品名稱 |
哈達(dá)爾沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
英文名稱 |
Salmonella hadar |
貨號(hào) |
XGR97189 |
熒光化學(xué)物質(zhì):
實(shí)時(shí)熒光定量PCR所使用的熒光物質(zhì)可分為兩種:熒光探針和熒光染料?,F(xiàn)將其原理簡述如下:
1. TaqMan熒光探針:PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探針使該技術(shù)既可進(jìn)行基因定量分析,又可分析基因突變(SNP),有望成為基因診斷和個(gè)體化用藥分析的首選技術(shù)平臺(tái)。
2. SYBR熒光染料:在PCR反應(yīng)體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料非特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,發(fā)射熒光信號(hào),而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào),從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。SYBR僅與雙鏈DNA進(jìn)行結(jié)合,因此可以通過溶解曲線,確定PCR反應(yīng)是否特異。
3. 分子信標(biāo):是一種在5和3末端自身形成一個(gè)8個(gè)堿基左右的發(fā)夾結(jié)構(gòu)的莖環(huán)雙標(biāo)記寡核苷酸探針,兩端的核酸序列互補(bǔ)配對(duì),導(dǎo)致熒光基團(tuán)與淬滅基團(tuán)緊緊靠近,不會(huì)產(chǎn)生熒光。PCR產(chǎn)物生成后,退火過程中,分子信標(biāo)中間部分與特定DNA序列配對(duì),熒光基因與淬滅基因分離產(chǎn)生熒光 。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對(duì)定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對(duì)定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
人甲胎蛋白(αFP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 別稱:AFP, FETA, HPAFP, Alpha-fetoglobulin, oralpha fetal protein Human αFP(Alpha-Fetoprotein) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組αFP濃度
200 L Platinum UltraPAK Bag, 5/case Media BT EA
Cryoprotective Freezing Medium, 100 ml Media Special BOT
UltraDOMA SF hybridoma medium, 500 ml Media Special BOT
PC-1 w/o Gln 2x500 ml 2x344018; 2x344022 Media Special BX
HL-1 chemically defined FBS subst. 10 ml Media Special BOT
牛奶總抗生素 ELISA試劑盒96TMiconazole nitrate228327硝酸咪康唑
阿維菌素 ELISA試劑盒96TMetronidazole4438甲硝唑
磺胺類 ELISA試劑盒96TMetoclopramide3642甲氧氯普胺
氧氟沙星 ELISA試劑盒96TMethyltestosterone588甲基睪酮
尼考胺 ELISA試劑盒96TMethylprednisolone833甲基潑尼松龍
4-(4-Aminophenyl)morpholin-3-one 中文名: 分子式:C10H12N2O2 鴨球蛋白E(IgE)ELISAKit ELISA. 96T/48T
4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one 中文名: 分子式:C14H18ClN3O4 鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISAKit ELISA. 96T/48T
4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one 中文名: 分子式:C14H17N3O4 哈達(dá)爾沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒鴨病毒性腸炎病毒(DEV)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3β-Hydroxyporiferast-5-en-7-one 中文名: 分子式:C29H48O2 鴨白介素6(IL-6)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3β-Hydroxyergost-5-en-7-one 中文名: 分子式:C28H46O2 鴨病毒性腸炎病毒elisa試劑盒 鴨病毒性腸炎病毒試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 鴨病毒性腸炎病毒試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:鴨病毒性腸炎病毒試劑盒、鴨病毒性腸炎病毒eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
關(guān)鍵字: 哈達(dá)爾沙門氏菌探;探針法;熒光定量PCR試劑盒;Salmonella hadar;XGR97189;
上海西格生物科技有限公司( Shanghai Sig Biotechnology Co., Ltd)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
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