熒光染料的優(yōu)點：
使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。
總的來說，SYBR Green I方法是一種最基礎(chǔ)也最常用的Real-time qPCR實驗手段。
| 產(chǎn)品名稱 |
皮炎外瓶霉探針法熒光定量PCR試劑盒 |
| 英文名稱 |
Exophiala dermatitidis |
| 貨號 |
XGR96736 |
熒光化學物質(zhì)：
實時熒光定量PCR所使用的熒光物質(zhì)可分為兩種：熒光探針和熒光染料。現(xiàn)將其原理簡述如下：
1. TaqMan熒光探針：PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5'－3'外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探針使該技術(shù)既可進行基因定量分析，又可分析基因突變（SNP），有望成為基因診斷和個體化用藥分析的首選技術(shù)平臺。
2. SYBR熒光染料：在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料非特異性地摻入DNA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。SYBR僅與雙鏈DNA進行結(jié)合，因此可以通過溶解曲線，確定PCR反應(yīng)是否特異。
3. 分子信標：是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發(fā)夾結(jié)構(gòu)的莖環(huán)雙標記寡核苷酸探針，兩端的核酸序列互補配對，導致熒光基團與淬滅基團緊緊靠近，不會產(chǎn)生熒光。PCR產(chǎn)物生成后，退火過程中，分子信標中間部分與特定DNA序列配對，熒光基因與淬滅基因分離產(chǎn)生熒光 。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括絕對定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
p，p-滴滴滴標準 p，p-滴滴涕標準 p，p-滴滴伊標準 組織IKKα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次 哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 250g 用于營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)及溶血試驗，還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... LOVO/Adr 結(jié)腸癌阿霉素耐藥株 2-硫尿嘧啶，英文名或英文縮寫：2-Thiouracil，級別：3.5N，0.25×50㎜，規(guī)格：5克
Glycyrin 66056-18-6 大鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒 ，英文名： C4a ELISA Kit 抗生素5號 Antibiotic No.5 250 用于兩性霉素B檢定菌種培養(yǎng) 鼬肺上皮細胞;MV-1-Lu 2′-脫氧肌苷-5′-三嶙酸三鈉鹽5克
Glycyrin 66056-18-6 大鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒 ，英文名： C4a ELISA Kit 抗生素5號 Antibiotic No.5 250 用于兩性霉素B檢定菌種培養(yǎng) 鼬肺上皮細胞;MV-1-Lu 2′-脫氧肌苷-5′-三嶙酸三鈉鹽5克
Povidone 交聯(lián)聚維酮標準品9003-39-8 100mg交聯(lián)聚維酮標準品 通用型CHIPDNA分子庫構(gòu)建試劑盒10次 酵母粉瓊脂250g用于水中細菌總數(shù)的檢測(ISO標準) Caki-1(人腎透明細胞癌細胞) 5×106cells/瓶×2 苯磺酰 Benzene sulfonyl chloride,≥98.0% 1998-9-9 100G 通用試劑
產(chǎn)品及特點:
皮炎外瓶霉探針法熒光定量PCR試劑盒1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
關(guān)鍵字： 皮炎外瓶霉探;探針法;熒光定量PCR試劑盒;Exophiala dermatitid;XGR96736;
上海西格生物科技有限公司( Shanghai Sig Biotechnology Co., Ltd)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
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