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人表皮黑色素細胞提取物圖片
  • 人表皮黑色素細胞提取物圖片

人表皮黑色素細胞提取物圖片

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最小起訂量 5瓶
發(fā)貨地 上海
更新日期 2022-08-19

產(chǎn)品詳情

中文名稱:人表皮黑色素細胞提取物圖片保存條件: 低溫冷藏
純度規(guī)格: 詳見說明書產(chǎn)品類別: 細胞培養(yǎng) 細胞、組織提取物
2022-08-19 人表皮黑色素細胞提取物圖片 5瓶/RMB 低溫冷藏 詳見說明書 細胞培養(yǎng) 細胞、組織提取物

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
以下是人表皮黑色素細胞提取物圖片的訂購信息:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

人表皮黑色素細胞提取物圖片

詳見說明書

FSX6735

人表皮黑色素細胞提取物是從人原代表皮黑色素細胞提取的,人原代表皮黑色素細胞從正常人表皮黑色素組織制備。正常人表皮黑色素組織采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。

cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA鏈,以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。

蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人表皮黑色素組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。

潛在的應(yīng)用: <1>已知基因的PCR克?。?lt;2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學;<6>芯片研究與表達圖譜。
實驗報告:
一分離與培養(yǎng):
    1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;
    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
    3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織完全被消化;
    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
    5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
    1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
    2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
    3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
    5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
    6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
羥丙基甲基纖維素Human ADC(Arginine decarboxylase) ELISA Kit

羥丙基甲基纖維素Human NRTN(Neurturin) ELISA Kit

羥丙基甲基纖維素Human AXIN2(Axin-2) ELISA Kit

羥丙基甲基纖維素Human PPP1CA(Serine/threonine-protein phosphatase PP1-alpha catalytic subunit) ELISA Kit

羥丙基甲基纖維素Human VASP(Vasodilator-stimulated phosphoprotein) ELISA Kit

羥丙基甲基纖維素Human TRIM3(Tripartite motif-containing protein 3) ELISA Kit

羥丙基甲基纖維素Human TOP1(DNA topoisomerase 1) ELISA Kit

羥丙基甲基纖維素Human PTPRF(Receptor-type tyrosine-protein phosphatase F) ELISA Kit

羥丙基甲基纖維素Human AFM(Afamin) ELISA Kit

羥丙基甲基纖維素Human ASS1(Argininosuccinate synthase) ELISA Kit

羥丙基甲基纖維素Human TNFAIP2(Tumor necrosis factor alpha-induced protein 2) ELISA Kit

羥丙基甲基纖維素Human CDA(Cytidine deaminase) ELISA Kit

羥丙基甲基纖維素Human AXIN1(Axin-1) ELISA Kit

羥丙基甲基纖維素Human DPEP1(Dipeptidase 1) ELISA Kit

羥丙基甲基纖維素Human SERPINB1(Leukocyte elastase inhibitor) ELISA Kit
人表皮黑色素細胞提取物圖片 N-(2-羥基-3-磺丙基)-3'5-二甲氧基苯胺鈉鹽(HDAOS)L-(-)-葡萄糖 98%17-Hydroxypregnenolone ELISA Kit

 1,4-雙(5-苯基-2-惡唑基)苯(POPOP)D-甘露糖 99%17-Hydroxyprogesterone,17-OHP ELISA Kit

 2,5-二苯基惡唑D-甘露糖 分析標準品17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA Kit

 對甲苯胺藍(BCIP)D(+)-密二糖,一水 99%17-α-hydroxylase,17-α-OH ELISA Kit

 奧啉酸D(+)-密二糖,一水 分析標準品16-αHydroxyestrogen 1,16-α OHE-1 ELISA Kit

 3-羥基-2,4,6-三碘苯甲酸(HTBA)甲基-а-D-吡喃半乳糖苷 98%15-PGDH ELISA Kit

 3,3-二甲氧基聯(lián)苯胺鹽酸鹽3-甲基-2-苯并噻唑酮腙鹽酸鹽,水合 98%15-epi-Lipoxin A4,15-epi-LXA4 ELISA Kit

 5-溴-4-氯-3-吲哚神經(jīng)氨酸麥芽三糖 96%YWHAB ELISA kit

 2,2-聯(lián)喹啉-4,4-二甲酸二鈉(BCA)麥芽三糖 分析標準品12-lipoxygenase,LOX-12 ELISA Kit

 1,8-二氮-9-芴酮(DFO)D(+)松三糖,一水 99%12-hydroxyeicosatetraenoic acid,12-HETE ELISA Kit

 異硫氰酸熒光素(FITC-I)α-甲基-D-甘露糖苷 99%11-Deoxycortisol ELISA Kit

 4-氟-7-硝基苯并-2-氧雜-1,3-二唑(NBD-F)D-甘露糖 for cell culture,≥99%11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 ELISA Kit

 4-氯-7-硝基-2,1,3-苯并氧雜惡二唑(NBD-Cl)5-氯吡嗪-2-羧酸甲酯 98%11β-HSD1 ELISA kit
培養(yǎng)操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取.

 
 
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公司簡介

上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。 上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學院、復旦大學、上海交通大學醫(yī)學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫(yī)大學、南京大學,暨南大學,南京工業(yè)大學,曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。 公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)! 公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問題可申請退換,有技術(shù)疑問可隨時給于解答,一對一的客服服務(wù),客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù)。
成立日期 2012-05-02 (13年) 注冊資本 550
員工人數(shù) 50-100人 年營業(yè)額 ¥ 100萬以內(nèi)
主營行業(yè) 生化試劑,抗體,細胞培養(yǎng),分子生物學,細胞生物學 經(jīng)營模式 貿(mào)易,工廠,試劑
  • 上海撫生實業(yè)有限公司
非會員
  • 公司成立:13年
  • 注冊資本:550
  • 企業(yè)類型:私營獨資企業(yè)
  • 主營產(chǎn)品:ELISA試劑盒、PCR檢測試劑盒、抗體、細胞、標準品/對照品
  • 公司地址:上海市松江區(qū)莘磚公路518號
詢盤

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