以下是人食管癌組織源細胞規(guī)格的訂購信息：

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務(wù)標準。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
培養(yǎng)操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取.
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
實驗報告：
一分離與培養(yǎng)：
    1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；
    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
    3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織完全被消化；
    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
    5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
    1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
    2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
    5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
    6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
3,6-二溴-2-甲基吡啶Human PENK(Proenkephalin-A) ELISA Kit

3,6-二溴-2-甲基吡啶Human CCBL1(Kynurenine--oxoglutaRate transaminase 1) ELISA Kit

二硫蘇糖醇（DTT）Human IRS2(Insulin receptor substRate 2) ELISA Kit

二硫蘇糖醇（DTT）Human ESRRG(Estrogen-related receptor gamma) ELISA Kit

二硫蘇糖醇（DTT）Human INTS3(IntegRator complex subunit 3) ELISA Kit

二硫蘇糖醇（DTT）Human GLUD1(Glutamate dehydrogenase 1, mitochondrial) ELISA Kit

二叔丁基甲基膦四氟Human GPX1(Glutathione peroxidase 1) ELISA Kit

二叔丁基甲基膦四氟Human LPO(Lactoperoxidase) ELISA Kit

二叔丁基甲基膦四氟Human EPB42(Erythrocyte membrane protein band 4.2) ELISA Kit

活性氧ROS熒光探針/ 二氯二氫熒光素-乙酰乙酸酯Human SESN3(Sestrin-3) ELISA Kit

活性氧ROS熒光探針/ 二氯二氫熒光素-乙酰乙酸酯Human DDAH1(N(G),N(G)-dimethylarginine dimethylaminohydrolase 1) ELISA Kit

二苯基甲醇Human EPHA4(Ephrin type-A receptor 4) ELISA Kit

二苯基甲醇Human STH(Saitohin) ELISA Kit

中性蛋白酶Human SERPINA7(Thyroxine-binding globulin) ELISA Kit

2，6-二溴-3-氟吡啶Human BIRC6(Baculoviral IAP repeat-containing protein 6) ELISA Kit
人食管癌組織源細胞規(guī)格ALP(Mouse alkaline phosphatase) ELISA Kit  小鼠堿性磷酸酶氯化兩面針堿 分析標準品，>98%thiopurine S-methyltransferase,TPMT ELISA kit

ALP(Human alkaline phosphatase) ELISA Kit  人堿性磷酸酶麥冬皂苷D 分析標準品，>98%Japanese Encephalitis Antibody你

ALP ELISA Kit  大鼠堿性磷酸酶松酯醇二葡萄糖苷 分析標準品，>98% Japanese Encephalitis Antibody IgM ELISA Kit

ALOX-5(Human arachidonate 5-lipoxygenase) ELISA Kit  人花生四烯酸5脂加氧酶貝母素甲 分析標準品，>98% epidemic cerebrospinal meningitis antibody IgM ELISA Kit

ALK(Human anapastic lymphoma kinase) ELISA Kit  人間變性淋巴瘤激酶貝母素乙 分析標準品，>98%epidemic cerebrospinal meningitis antibody IgG ELISA Kit

ALG(Human anti-lymphocyte globulin) ELISA Kit  人抗淋巴細胞球蛋白百秋李醇  分析標準品，>98%Influenza viruses IgG,FLU IgG ELISA Kit

ALDH ELISA Kit  大鼠乙醛脫氫酶胡黃連苷Ⅰ 分析標準品，>98% Influenza B virus IgG antibody ELISA Kit

ALD(Human aldosterone) ELISA Kit  人醛固酮胡黃連苷Ⅱ 分析標準品，>98% Influenza B virus你

ALD(Human Aldolase) ELISA Kit  人醛縮酶胡黃連苷Ⅲ 分析標準品，>95%Influenza B virus你

ALD ELISA Kit  大鼠醛固酮升麻素苷 分析標準品，>98% Influenza A virus IgG antibody ELISA Kit

ALCAM(Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit  人白細胞活化黏附因子血根堿 分析標準品，≥98% (HPLC)Influenza A virus你

ALCAM ELISA Kit  大鼠白細胞活化黏附因子血根堿 ≥98% (HPLC)Influenza A virus你

ALB(Human microalbunminuria) ELISA Kit  人尿微量白蛋白柴胡皂苷C 分析標準品，>98%squamous cell carcinoma antigen 1,SCCAg1 ELISA kit