細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
產(chǎn)品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產(chǎn)品名稱
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人胰腺MatchPair胰腺上皮細胞和腫瘤原代細胞規(guī)格
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規(guī)格
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2×5×105
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貨號
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FSX6618
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細胞凍存:
對培養(yǎng)的細胞進行凍存的方法是將細胞置于含有(DMSO)等冷凍保護劑的完全培養(yǎng)基中于液氮中儲存。冷凍保護劑可降低培養(yǎng)基的冰點,并可減緩冷卻速度嗎,大大降低冰晶形成的危險 (冰晶可損傷細胞,導致細胞死亡)。
注:DMSO 可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時,應采用與此類物質(zhì)安全危害相適應的設備和操作規(guī)范,并應按照當?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。
細胞凍存指導原則
凍存細胞系以備將來之用時,必須遵守以下原則。與其他細胞培養(yǎng)操作一樣,我們建議您嚴格遵守您所用細胞系附帶的操作說明,以便獲得結(jié)果。
1)在高細胞濃度情況下進行培養(yǎng)細胞的凍存,并且細胞傳代次數(shù)盡可能少。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意凍存條件取決于所用細胞系。
2)細胞應緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑
4)將冷凍的細胞于 -70°C 以下溫度儲存;溫度高于 -50°C 時,冷凍的細胞將開始變質(zhì)。
5)必須使用無菌凍存管儲存冷凍的細胞。裝有冷凍細胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內(nèi)保存
6)必須穿戴個人防護設備。
7)所有與細胞接觸的溶液和設備均應為無菌狀態(tài)。必須采用正確的無菌技術,并且在層流通風櫥內(nèi)進行。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
DL-賴氨酸鹽酸鹽Human PSG3(Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 3) ELISA Kit
DL-賴氨酸鹽酸鹽Human FABP4(Fatty acid-binding protein, adipocyte) ELISA Kit
2,3-二羥基吡啶Human NUCB2(Nucleobindin-2) ELISA Kit
2,3-二羥基吡啶Human IL5RA(Interleukin-5 receptor) ELISA Kit
4,6-二羥基-2-甲基嘧啶Human RLN3(Relaxin-3) ELISA Kit
4,6-二羥基-2-甲基嘧啶Human RRM1(Ribonucleoside-diphosphate reductase large subunit) ELISA Kit
2,6-二乙基苯胺Human SERPINA6(Corticosteroid-binding globulin) ELISA Kit
2,6-二乙基苯胺Human UBR4(E3 ubiquitin-protein ligase UBR4) ELISA Kit
2,7-二溴咔唑Human CRYAB(Alpha-crystallin B chain) ELISA Kit
2,7-二溴咔唑Human GLB1(Beta-galactosidase) ELISA Kit
DNA酶Human TALDO1(Transaldolase) ELISA Kit
2-(Di-1-adamantylphosphino)dimethylaminobenzene,Me-DalPhosHuman INSL3(Insulin-like 3) ELISA Kit
2-(Di-1-adamantylphosphino)dimethylaminobenzene,Me-DalPhosHuman TPSD1(Tryptase delta) ELISA Kit
DL-1-苯乙醇Human HPR(Haptoglobin-related protein) ELISA Kit
DL-1-苯乙醇Human GUSβ(Beta-glucuronidase) ELISA Kit
人胰腺MatchPair胰腺上皮細胞和腫瘤原代細胞規(guī)格Amylin (Rabbit Amylin ) ELISA Kit 兔胰淀素汞溴紅 24~27%Fc region of immunoglobulin G,Fcγ ELISA Kit
AMS/AMY(Human Alpha-Amylase) ELISA Kit 人α淀粉酶硫氰酸汞 CP,98.0%(劇毒品)Receptor Ⅲ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅢ ELISA Kit
AMPK(Human Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase) ELISA kit 人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶硫氰酸汞 AR,99.0%(劇毒品)Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅡ ELISA Kit
AMPK ELISA Kit 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶硫化汞 紅色硫化汞 CP Receptor Ⅰ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅠ ELISA Kit
AMPK ELISA Kit 魚磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶硫化汞 黑色硫化汞 CP Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit
AMBP(Human alpha-1-microglobulin/bikunin precursor) ELISA Kit 人α1微球蛋白/bikunin前體堿性硝酸苯汞 CPReceptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin E,FcεRⅡ ELISA Kit
AmAC-1(Human Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1) ELISA Kit 人巨噬細胞替代激活相關化學因子1乙酸苯汞 98%(劇毒品)Receptor Ⅰ for the Fc region of immunoglobulin E,FcεRⅠ ELISA Kit
AmAC-1 ELISA Kit 大鼠巨噬細胞替代激活相關化學因子1硫柳汞鈉 AR,98%Immunoglobulin D,IgD ELISA Kit
AMA(Mouse Anti-myocardial antibody) ELISA Kit 小鼠抗心肌抗體蓖麻油 USP級Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit
AMA(Mouse anti-Monocyte antibody) ELISA KIT 小鼠抗單核細胞抗體氮川三乙酸 CPReceptor Ⅰ for the Fc region of immunoglobulin A,FcαRⅠ ELISA Kit
AMA(Human Anti-myocardial antibody) ELISA Kit 人抗心肌抗體氯鈀酸銨 Pd ≥29.5% Immune RNA,Irna ELISA Kit
AMA(Human anti-Monocyte antibody) ELISA Kit 人抗單核細胞抗體反式-雙(三苯基膦)合氯化羰基銠(Ⅰ) Rh 14.91%chymotrypsin ELISA Kit
AMA IgA(Human anti-myelin antibody IgA) ELISA Kit 人抗髓磷脂抗體IgA氯鈀酸鉀 Pd 26.2%Superoxide dismutase [Mn], mitochondrial 你
關鍵字: 人胰腺MatchPair胰腺上皮細胞;2×5×105;FSX6618;
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學院、復旦大學、上海交通大學醫(yī)學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫(yī)大學、南京大學,暨南大學,南京工業(yè)大學,曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務”的企業(yè)文化積極參與生物領域的技術創(chuàng)新和技術服務,力求為我國科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務!
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