培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取.
以下是大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞圖片的訂購信息：

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
二碳酸二叔丁酯Human RORC(Nuclear receptor ROR-gamma) ELISA Kit

偶氮二羥酸二芐酯Human CNTF(Ciliary neurotrophic factor) ELISA Kit

偶氮二羥酸二芐酯Human FGF1(Heparin-binding growth factor 1) ELISA Kit

偶氮二羥酸二芐酯Human IFNA1(Interferon alpha-1/13) ELISA Kit

Di-t-butylneopentylphosphonium tetrafluoroborate,(t-Bu)2(C5H11)PH+BF4-Human FLT3(Receptor-type tyrosine-protein kinase FLT3) ELISA Kit

二甲基亞砜（DMSO）Human LIF(Leukemia inhibitory factor) ELISA Kit

二甲基亞砜Human PDGFA(Platelet-derived growth factor subunit A) ELISA Kit

二甲基亞砜Human KITLG(Kit ligand) ELISA Kit

二甲基亞砜Human TIE1(Tyrosine-protein kinase receptor Tie-1) ELISA Kit

二甲基亞砜Human TNFRSF1A(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1A) ELISA Kit

二甲基亞砜Human TNFRSF1B(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B) ELISA Kit

二甲基亞砜Human GRN(Granulins) ELISA Kit

地塞米松Human TNFSF10(Tumor Necrosis Factor Related Apoptosis Inducing Ligand) ELISA Kit

地塞米松Human AMH(Muellerian-inhibiting factor) ELISA Kit

地塞米松Human APOC1(Apolipoprotein C-I) ELISA Kit
大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞圖片ATR ELISA Kit  大鼠抗凝血酶受體酯蟾毒配基  分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%desmogleins 1 antibody IgG ELISA Kit

ATMA/TMAB(Human Anti-Thyroid Microsome Antibody) ELISA KIT  人抗甲狀腺微粒體抗體酯蟾毒配基  98%desmocollin-2/desmosomal glycoprotein II,DSC2 ELISA Kit

ATM(Human Ataxia telangiectasia mutated) ELISA Kit  人毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因紫丁香苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%hydroxylysine glycosides,HOLG ELISA kit

ATGA/TGAB(Human Anti-Thyroid Microsome Antibody) ELISA KIT  人抗甲狀腺球蛋白抗體獐牙菜苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98％hydroxylysine,Hyl ELISA Kit

ATGA/TGAB ELISA Kit  大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體芝麻林素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%Hydroxymethylglutaryl CoA Reductase,HMG-CoAR ELISA kit

ATG(Human anti-thymocyte globulin) ELISA Kit  人抗胸腺細(xì)胞球蛋白芥子堿  分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%Hydroxymethylglutaryl CoA,HMG-CoA ELISA kit

ATF-1(Human activating transcription factor-1) ELISA Kit  人轉(zhuǎn)錄因子抗體-14-氯苯基異氰酸酯 98%hydroxylysinonorleucine,HLNL ELISA Kit

ATA(Human anti-trophoblast antibody,ATA ) ELISA Kit  人抗滋養(yǎng)膜細(xì)胞抗體環(huán)己基異氰酸酯  98%hydroxyproline,Hyp ELISA Kit

ATA(Human Angiotensinase A) ELISA Kit  人血管緊張肽酶A3,4-二氯苯異氰酸酯 97%dynorphin,Dyn ELISA Kit

AT2R-Ab(Human Angiotensin II Receptor 2 antibody) ELISA Kit  人血管緊張素Ⅱ受體2抗體3,5-二氯苯異氰酸酯 97%LTBP2 ELISA Kit

AT2R(Human Angiotensin II Receptor 2) ELISA Kit  人血管緊張素Ⅱ受體2對異丙基苯基異氰酸酯 98%latent membrane protein-1,LMP-1 ELISA Kit

AT(Mouse Anti-trypsin) ELISA KIT  小鼠抗胰蛋白酶間甲苯異氰酸酯 99%Pro Atrial Natriuretic Peptide,Pro-ANP ELISA Kit

AT(Human Anti-trypsin) ELISA Kit  人抗胰蛋白酶異氰酸苯酯 99%（劇毒品）anti-Profilin 1 antibody ELISA Kit
實驗報告：
一分離與培養(yǎng)：
    1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；
    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
    3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織完全被消化；
    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
    5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
    1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
    2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
    5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
    6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。