注意事項(xiàng):
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zui好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)
IFNB1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)羥苯磺酸鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)Calcium dobesilate質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
HPAC(人胰腺腺泡上皮癌) 5×106cells/瓶×2 短小芽孢桿菌異鼠李素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Isorhamnetin 3-glucoside-7-rhamnoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
角膜內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)5'-tert-Butyldimethylsilyloxy 美洛昔康5'-tert-Butyldimethylsilyloxy Meloxicam質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
GRK5 Others Human 人 GRK5 / GPRK5 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 甲氨蝶呤二甲基酯Methotrexate Dimethyl Ester質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
人肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H292甲氨蝶呤-甲基-d3,二甲基酯Methotrexate-methyl-d3, Dimethyl Ester質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
RAB27B Others Human 人 RAB27B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Δ2-頭孢他啶質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Δ2-Ceftazidime
CL-0077Eca-109(人食管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2頭孢他啶五水化合物質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Ceftazidime Pentahydrate
Wish細(xì)胞,人羊膜細(xì)胞系 人T細(xì)胞瘤,Hat-78細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2頭孢唑啉質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Cefazolin
BGC823(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×217β-羧酸氟替卡質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Fluticasone 17β-Carboxylic Acid
CTSB Others Human 人 Cathepsin-B / CTSB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 頭孢羥氨芐 質(zhì)量規(guī)格:>950µg/mg,BRCEFADROXIL
CM-H035人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL基三乙酸,英文名或英文縮寫(xiě):NTA,級(jí)別:高,60%,規(guī)格:5克
A549, 人肺癌細(xì)胞系頭孢滌泥相關(guān)物質(zhì)B Cqfdinir Rqlctqd CoMpound B;(6R,7R)-7-[2-(2-cMino-4-thiczolyl)ccqtcMido]-8-oxo-3-vinyl-5-thic-1-czcbicyclo[4,2,0]oct-2-qnq-2-ccrboxylic ccid 79320-10-0
人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3 大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLDESTAININGBAGS脫色袋子RTsigma
人腦血管外膜成纖維細(xì)胞HBVSMC嶙酸二正丁酯100毫克2~8℃
EFNA4 Others Human 人 Ephrin-A4 / EFNA4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1824-81-32-基-6-甲基,99%2-Amino-6-metxylpyridine
LTBR Others Rat 大鼠 LTBR / TNFRSF3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3-羥基-2,4,6-三溴本酸,英文名或英文縮寫(xiě):TBHBA,級(jí)別:絡(luò)合IND,規(guī)格:5克
大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLε-己內(nèi)酰安 2-Oxohqxcmqthylqniminq 102-60-
CRFK貓腎細(xì)胞 CRFK feline kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSN-叔丁氧羰基-L-天冬酸,英文名或英文縮寫(xiě):Boc-Asp-OH,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:5克
白細(xì)胞介素-1超家族N-[3-(二甲氧基甲基硅基)基]乙二,英文名或英文縮寫(xiě):3-(2-Aminoetxylamino)propyldimetxoxymetxylsilane,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:5克
NCI-H23(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Pt K1 (NBL-3)(長(zhǎng)鼻袋鼠腎細(xì)胞)3829-86-51,10-啰啉鹽酸鹽o-pxenanthroline monoxy7nochloride monohydrate
操作流程:
FOR Bile salt sulfotransferase ELISA Kit(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。