注意事項(xiàng):
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zui好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)
FGF6 Protein Human 重組人 FGF6 / FGF-6 蛋白5-甲酰水楊酸5-Formylsalicylic acid質(zhì)量規(guī)格:>97%
B16-F10(小鼠皮膚色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞HM阿脲Alloxan, monohydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分
人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞總RNAHPAF NA檸檬酸二銨,檸檬酸氫二銨Ammonium , dibasic質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR
CDH8 Others Rat 大鼠 Cadherin-8 / CDH8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 乳酸鈣五水(>98%,USP)Calcium (L)-lactate, pentahydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS32'-脫氧胸苷-5'-一1酸二鈉鹽dTMP, 2'-Deoxythymidine-5'-monophosphate di salt質(zhì)量規(guī)格:>97%,分子生物學(xué)級(jí)
人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞HUMSC辛標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%)質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=4% Phoxim solution
猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞;RF/6A 膠質(zhì)瘤細(xì)胞,SHG44細(xì)胞 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞)辛標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%)質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6%Phoxim solution
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY1002甲基橙(IND)質(zhì)量規(guī)格:INDMethyl orange
NOG Others Human 人 Noggin / NOG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 甲基紅鈉鹽(IND)質(zhì)量規(guī)格:INDMethyl Red salt
CM-R037大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL甲基紅鈉鹽(ACS reagent,95 %)質(zhì)量規(guī)格:ACS reagent,95 %Methyl Red salt
PK15-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)豬腎上皮細(xì)胞 PK15-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) porcine kidney epithelial cells EMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin萊苞迪甙A質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRRebaudioside A
IL13 Protein Human 重組人 IL13 / ALRH 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)萊苞迪甙A(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Rebaudioside A
人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(HPASMC) ( 5×105 ) RDFs, 大鼠真皮成纖維細(xì)胞 Rattus環(huán)亮氨酸甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%Cycloleucine Methyl Ester.HCl
兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;CCC-SMC-2水溶性四氮唑-3質(zhì)量規(guī)格:BRGLT003
IL27 Others Mouse 小鼠 IL27 / Ierleukin-27 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 表兒茶素沒(méi)食子酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品(−)-Epicatechin gallate/ECG
SMR3B Others Human 人 SMR3B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 馬尿酸-L-本酸shēng huà shì jì容量:保存:-20℃25毫克
CL-0029B16(小鼠色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2變色素2R Chromotrope 2R 4197-7-3 1G 通用試劑
H4細(xì)胞,人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 人大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,HASMC細(xì)胞 正常大鼠腎細(xì)胞(EGF受體陽(yáng)性);NRK49F酪蛋柏胨 IRON PqPTONcTq 91079-40-
BSC-1(猴腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2N-乙酰-D-基葡萄糖shēng huà shì jì容量:RT25克
COMP Others Human 人 COMP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 12501-23-41鎢酸Phosphotungstic acid
操作流程:
FOR Complement C4-A ELISA Kit(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿(mǎn)板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。