儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 產(chǎn)品僅供科研血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱(chēng):馬動(dòng)脈炎病毒(EAV)核酸
英文名稱(chēng):詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
編號(hào): FSP2923
分類(lèi):核酸檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
Human Smad3/MADH3(Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3) ELISA KitMouse MCP-1(Monocyte Chemotactic Protein 1) ELISA Kit甲醇蛋白定量樣品預(yù)處理試劑
Human SMAD2(Mothers against decapentaplegic homolog 2) ELISA KitMouse MDC/CCL22(Macrophage-Derived Chemokine) ELISA Kit甲醇BCA蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒
Human APOM(Apolipoprotein M) ELISA KitMouse MMP-12(Matrix Metalloproteinase 12) ELISA Kit2-氯-3-氟異煙酸甲酯LOWRY蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒
Human APOD(Apolipoprotein D) ELISA KitMouse MMP-2(Matrix Metalloproteinase 2) ELISA Kit2-氯-3-氟異煙酸甲酯NINHYDRIN蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒
Human CXCR4(C-X-C chemokine receptor type 4) ELISA KitMouse MMP-3(Matrix Metalloproteinase 3) ELISA Kit2-氯-3-氟異煙酸甲酯NITRATION蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒
Human AMY2(Amylase Alpha 2, Pancreatic) ELISA KitMouse MMP-9(Matrix Metalloproteinase 9) ELISA Kit2-氯-3-氟異煙酸甲酯FRUORESCAMINE蛋白質(zhì)濃度熒光定量試劑盒
Human DDAH2(N(G),N(G)-dimethylarginine dimethylaminohydrolase 2) ELISA KitMouse MSP/MST1 ELISA Kit2-氯-3-氟異煙酸甲酯蛋白活性穩(wěn)定液
Human HIG2(Hypoxia-inducible gene 2 protein) ELISA KitMouse NRP1(Neuropilin-1) ELISA Kit7-甲氧基吲哚蛋白飽和溶液
馬動(dòng)脈炎病毒(EAV)核酸97%20mgTranscription Factor/Activator Protein 1 你 10329-75-6Rat monocyte chemotactic protein 3, MCP-3 Elisa Kit HPLC95%97%20mgSTA-IgG進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)用于鏈球菌的增菌培養(yǎng)英文名稱(chēng):Morphine Monohydrate CII (AS)50mg重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)特價(jià)促銷(xiāo)123483-19-2高端化學(xué)試劑組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%97%20mgSTA-IgG7389-87-9高端化學(xué)試劑Human Hya]uronate binding protein, HABP Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)用于鏈球菌的分離培養(yǎng);細(xì)菌的賴(lài)氨酸、吲哚和動(dòng)力復(fù)合生化試驗(yàn)英文名稱(chēng):Cetylpyridinium Chloride500mg重組人 SLITRK6 蛋白 (His 標(biāo)簽)13849-90-6高端化學(xué)試劑內(nèi)皮細(xì)胞TEK酪氨酸激酶(Tie2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%97%20mgGliadin43-4913515-97-4高端化學(xué)試劑Human cross linked N-telopeptide of type Ⅰ collagen, NTX Elisa Kit
97%20mgTransforming growth factor-beta-induced protein ig-h3,TGFBI/BIGH3 ELISA kit 10329-75-6Rat monocyte chemotactic protein 3, MCP-3 Elisa Kit HPLC95%97%20mgGliadin43-49進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)用于鏈球菌的分離培養(yǎng);細(xì)菌的賴(lài)氨酸、吲哚和動(dòng)力復(fù)合生化試驗(yàn)英文名稱(chēng):Cetylpyridinium Chloride500mg重組人 SLITRK6 蛋白 (His 標(biāo)簽)13849-90-6高端化學(xué)試劑內(nèi)皮細(xì)胞TEK酪氨酸激酶(Tie2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%97%20mgGliadin43-4913515-97-4高端化學(xué)試劑Human cross linked N-telopeptide of type Ⅰ collagen, NTX Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)鏈球菌的選擇性分離培養(yǎng)英文名稱(chēng):Chlorobutanol200mg重組人 SAE1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)145134-63-0高端化學(xué)試劑免疫球蛋白樣EGF樣域酪氨酸激酶1(Tie1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%97%20mgAMY113515-97-4高端化學(xué)試劑Human cross linked N-telopeptide of type Ⅰ collagen, NTX Elisa Kit
97%20mgTGFBR3 ELISA Kit 10333-92-3Rat Macrophage Colony-Stimulating Factor, M-CSF Elisa Kit HPLC95%97%20mgAMY1進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)鏈球菌的選擇性分離培養(yǎng)英文名稱(chēng):Chlorobutanol200mg重組人 SAE1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)145134-63-0高端化學(xué)試劑免疫球蛋白樣EGF樣域酪氨酸激酶1(Tie1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%97%20mgAMY113515-97-4高端化學(xué)試劑Human cross linked N-telopeptide of type Ⅰ collagen, NTX Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)蠟樣芽孢桿菌的溶血測(cè)試驗(yàn)英文名稱(chēng):Edetic Acid200mg重組人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 蛋白 (His 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷(xiāo)522-94-1高端化學(xué)試劑免疫球蛋白樣EGF樣域酪氨酸激酶1(Tie1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%98%20mgZP-Ab13515-97-4高端化學(xué)試劑Human Helicobacter pylori IgM, Hp-IgM Elisa Kit
98%20mgtransforming growth factor β receptor 2,TGF-βR2 ELISA kit 10333-92-3Rat Macrophage Colony-Stimulating Factor, M-CSF Elisa Kit HPLC95%98%20mgZP-Ab進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)蠟樣芽孢桿菌的溶血測(cè)試驗(yàn)英文名稱(chēng):Edetic Acid200mg重組人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 蛋白 (His 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷(xiāo)522-94-1高端化學(xué)試劑免疫球蛋白樣EGF樣域酪氨酸激酶1(Tie1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%98%20mgZP-Ab13515-97-4高端化學(xué)試劑Human Helicobacter pylori IgM, Hp-IgM Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)蠟樣芽孢桿菌的溶血試驗(yàn)英文名稱(chēng):Sulfasalazine 125mg重組人 PARVA / Actopaxin 蛋白 (GST 標(biāo)簽)特價(jià)促銷(xiāo)31768-94-2高端化學(xué)試劑基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%98%20mgHCG-Ab 5619-04-5高端化學(xué)試劑Human Helicobacter pylori IgM, Hp-IgM Elisa Kit
98%20mgTGFBR1 ELISA Kit 103404-90-6Rat Macrophage-Derived Chemokine, MDC Elisa Kit HPLC95%98%20mgHCG-Ab進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)蠟樣芽孢桿菌的溶血試驗(yàn)英文名稱(chēng):Sulfasalazine 125mg重組人 PARVA / Actopaxin 蛋白 (GST 標(biāo)簽)特價(jià)促銷(xiāo)31768-94-2高端化學(xué)試劑基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%98%20mgHCG-Ab 5619-04-5高端化學(xué)試劑Human Helicobacter pylori IgM, Hp-IgM Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)飲用水中導(dǎo)生細(xì)菌分離培養(yǎng)英文名稱(chēng):Tolazoline Hydrochloride 300mg重組人 Tubulin folding cofactor A / TBCA 蛋白2901-66-8高端化學(xué)試劑干細(xì)胞因子受體(SCFR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%99%20mgNAD 5619-04-5高端化學(xué)試劑Human Cytotoxin-associated protein, CagA Elisa Kit
99%20mgTSC22 ELISA Kit 103404-90-6Rat Macrophage-Derived Chemokine, MDC Elisa Kit HPLC95%99%20mgNAD進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)飲用水中導(dǎo)生細(xì)菌分離培養(yǎng)英文名稱(chēng):Tolazoline Hydrochloride 300mg重組人 Tubulin folding cofactor A / TBCA 蛋白2901-66-8高端化學(xué)試劑干細(xì)胞因子受體(SCFR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%99%20mgNAD 5619-04-5高端化學(xué)試劑Human Cytotoxin-associated protein, CagA Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)檢測(cè)水中的大腸菌群英文名稱(chēng):Levodopa 200mg重組人 VASN / Vasorin 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)24815-24-5高端化學(xué)試劑干細(xì)胞因子受體(SCFR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%99%20mgELOVL5 5619-04-5高端化學(xué)試劑Human Cytotoxin-associated protein, CagA Elisa Kit
99%20mgTransforming Growth factor β3,TGF-β3 ELISA kit 103429-32-9Rat macrophage inflammatory protein 2, MIP-2 Elisa KitHPLC95%99%20mgELOVL5進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)檢測(cè)水中的大腸菌群英文名稱(chēng):Levodopa 200mg重組人 VASN / Vasorin 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)24815-24-5高端化學(xué)試劑干細(xì)胞因子受體(SCFR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%99%20mgELOVL5 5619-04-5高端化學(xué)試劑Human Cytotoxin-associated protein, CagA Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)水中細(xì)菌總數(shù)的檢測(cè)英文名稱(chēng):Pantolactone500mg重組人 LMAN2L 蛋白 (His 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷(xiāo)639-30-5高端化學(xué)試劑CD40配體(CD40L)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%98%20mgIgD5868-59-7高端化學(xué)試劑Human gastric inhibitory polypeptide, GIP Elisa Kit
98%20mgTGF β2 ELISA Kit 10347-81-6Rat macrophage inflammatory protein 2, MIP-2 Elisa KitHPLC95%98%20mgIgD5進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)水中細(xì)菌總數(shù)的檢測(cè)英文名稱(chēng):Pantolactone500mg重組人 LMAN2L 蛋白 (His 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷(xiāo)639-30-5高端化學(xué)試劑CD40配體(CD40L)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%98%20mgIgD5868-59-7高端化學(xué)試劑Human gastric inhibitory polypeptide, GIP Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)飲用水中總大腸菌群多管發(fā)酵法檢驗(yàn)英文名稱(chēng):Lactose Monohydrate 500mg重組人 KDM1 / LSD1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)特價(jià)促銷(xiāo)474-48-6高端化學(xué)試劑CD30配體(CD30L)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%98%20mgLHR868-59-7高端化學(xué)試劑Human gastric inhibitory polypeptide, GIP Elisa Kit
98%20mgTGF-β1 ELISA kit 10347-81-6Rat macrophage inflammatory protein 3β, MIP-3β Elisa KitHPLC95%98%20mgLHR進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)飲用水中總大腸菌群多管發(fā)酵法檢驗(yàn)英文名稱(chēng):Lactose Monohydrate 500mg重組人 KDM1 / LSD1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)特價(jià)促銷(xiāo)474-48-6高端化學(xué)試劑CD30配體(CD30L)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%98%20mgLHR868-59-7高端化學(xué)試劑Human gastric inhibitory polypeptide, GIP Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)運(yùn)送腸道致病菌標(biāo)本英文名稱(chēng):Benoxinate Hydrochloride200mg重組人 Lysozyme G-like 1 / LYG1 蛋白 (His 標(biāo)簽)21956-56-9高端化學(xué)試劑調(diào)節(jié)激活正常T-細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%98%20mgFSHR868-59-7高端化學(xué)試劑Human gastrin-reliasing peptide, GRP Elisa Kit
98%20mgTGF-α ELISA Kit 103478-58-6Rat macrophage inflammatory protein 3β, MIP-3β Elisa KitHPLC95%98%20mgFSHR進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)運(yùn)送腸道致病菌標(biāo)本英文名稱(chēng):Benoxinate Hydrochloride200mg重組人 Lysozyme G-like 1 / LYG1 蛋白 (His 標(biāo)簽)21956-56-9高端化學(xué)試劑調(diào)節(jié)激活正常T-細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%98%20mgFSHR868-59-7高端化學(xué)試劑Human gastrin-reliasing peptide, GRP Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)飲用水中大腸菌群濾膜法檢驗(yàn)英文名稱(chēng):Nitrofurazone 200mg重組人 FcERI / FCER1A 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)108-54-3高端化學(xué)試劑胎盤(pán)生長(zhǎng)因子(PLGF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%98%20mgPFKFB3868-59-7高端化學(xué)試劑Human gastrin-reliasing peptide, GRP Elisa Kit
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí),吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過(guò)待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
關(guān)鍵字: 馬動(dòng)脈炎病毒(EAV);核酸;48T;FSP2923;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷(xiāo)售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷(xiāo)售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專(zhuān)門(mén)針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚(yú))的科研試劑。
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