PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱:牛傳染性鼻氣管炎病毒(IBRV)核酸定量試劑盒
英文名稱:詳見說明書
編號: FSP2907
分類:核酸檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時,吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
Human SWAP70(Switch-associated protein 70) ELISA KitHuman KRAS(GTPase KRas) ELISA KitL-谷氨酸-5-叔丁酯 載玻片細(xì)胞組蛋白H3-K4甲基化NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
Human TMEM126A(Transmembrane protein 126A) ELISA KitHuman LAMP1(lysosomal-associated membrane protein 1) ELISA KitL-谷氨酸-5-叔丁酯 冰凍切片組織組蛋白H3-K4甲基化NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
Human ENHO(Adropin) ELISA KitHuman LAP3(Cytosol aminopeptidase) ELISA KitL-2-氨基丁酸 石蠟切片組織組蛋白H3-K4甲基化NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
Human TARBP2(RISC-loading complex subunit TARBP2) ELISA KitHuman LATS1(Serine/threonine-protein kinase LATS1) ELISA KitL-2-氨基丁酸 細(xì)胞組蛋白H3-K4甲基化比色法定量檢測試劑盒?。ㄡ槍σ患谆?/span>
Human DRAM1(DNA damage-regulated autophagy modulator protein 1) ELISA KitHuman LIMK1(LIM domain kinase 1) ELISA KitL-2-氨基丁酸 細(xì)胞組蛋白H3-K4甲基化比色法定量檢測試劑盒(針對二甲基、三甲基)
Human TBC1D1(TBC1 domain family member 1) ELISA KitHuman LIN7B(Protein lin-7 homolog B) ELISA KitL-2-氨基丁酸 細(xì)胞組蛋白H3-K4甲基化熒光定量檢測試劑盒
Human TBPL1(TATA box-binding protein-like protein 1) ELISA KitHuman LRR1(Leucine-rich repeat protein 1) ELISA Kitα-乳煻,一水合物 組蛋白H3-K4甲基化西方雜交分析試劑盒
Human THAP4(THAP domain-containing protein 4) ELISA KitHuman LRWD1(Leucine-rich repeat and WD repeat-containing protein 1) ELISA Kit鈦酸鉛 組蛋白H3-K4甲基化免疫共沉淀分析試劑盒
牛傳染性鼻氣管炎病毒(IBRV)核酸定量試劑盒EGTA 四鈉鹽20mg 10075-85-1Rat Soluble protein-100B, S-100B Elisa KitHPLC95%EGTA 四鈉鹽20mgsyncytin-1進(jìn)口、國產(chǎn)用于生物制品的無菌試驗(yàn)英文名稱:500mg重組人 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白特價(jià)促銷94529-97-296T甲狀腺素受體β(THRβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%EGTA 四鈉鹽20mgsyncytin-16020-87-7高端化學(xué)試劑Human Chromogranin, CgA Elisa Kit進(jìn)口、國產(chǎn)培養(yǎng)副溶血性弧菌,做細(xì)胞色素氧化酶實(shí)驗(yàn)英文名稱:25mg重組人 APOA1 / ApoAI 蛋白 (His 標(biāo)簽)55898-07-296T血管細(xì)胞粘附分子1(VCAM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%鈣熒光探針Fura-2, AM 20mgTHSD7A-RAb6020-87-7高端化學(xué)試劑Human retinoblastoma tumor suppressor protein, pRB Elisa Kit
鈣熒光探針Fura-2, AM 20mg 10075-85-1Rat Soluble protein-100B, S-100B Elisa KitHPLC95%鈣熒光探針Fura-2, AM 20mgTHSD7A-RAb進(jìn)口、國產(chǎn)培養(yǎng)副溶血性弧菌,做細(xì)胞色素氧化酶實(shí)驗(yàn)英文名稱:25mg重組人 APOA1 / ApoAI 蛋白 (His 標(biāo)簽)55898-07-296T血管細(xì)胞粘附分子1(VCAM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%鈣熒光探針Fura-2, AM 20mgTHSD7A-RAb6020-87-7高端化學(xué)試劑Human retinoblastoma tumor suppressor protein, pRB Elisa Kit進(jìn)口、國產(chǎn)增殖霍亂弧菌及付霍亂弧菌英文名稱:Alclometasone Dipropionate300mg重組人 MKK6 / MEK6 / MAP2K6 蛋白 (207 Asp, 211 Asp)特價(jià)供應(yīng)67656-29-596T熱休克蛋白β2(HSPβ2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%鈣熒光探針Fura-2, AM 20mgTOXA6020-87-7高端化學(xué)試劑Human retinoblastoma tumor suppressor protein, pRB Elisa Kit
鈣熒光探針Fura-2, AM 20mg 100858-32-0Rat Interleukin 1, IL-1 Elisa Kit HPLC95%鈣熒光探針Fura-2, AM 20mgTOXA進(jìn)口、國產(chǎn)增殖霍亂弧菌及付霍亂弧菌英文名稱:Alclometasone Dipropionate300mg重組人 MKK6 / MEK6 / MAP2K6 蛋白 (207 Asp, 211 Asp)特價(jià)供應(yīng)67656-29-596T熱休克蛋白β2(HSPβ2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%鈣熒光探針Fura-2, AM 20mgTOXA6020-87-7高端化學(xué)試劑Human retinoblastoma tumor suppressor protein, pRB Elisa Kit進(jìn)口、國產(chǎn)霉菌和酵母菌的總數(shù)測定英文名稱:Cefadroxil200mg重組人 MKK6 / MEK6 / MAP2K6 蛋白現(xiàn)貨促銷109664-02-096T免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%鈣熒光探針Fura-2, AM (1mM DMSO溶液)20mgCoA-SH60-27-5高端化學(xué)試劑Human growth-regulated oncogeneα/melanoma growth stimulating activity, GROα/MGSA Elisa Kit
鈣熒光探針Fura-2, AM (1mM DMSO溶液)20mg 100858-32-0Rat Interleukin 1, IL-1 Elisa Kit HPLC95%鈣熒光探針Fura-2, AM (1mM DMSO溶液)20mgCoA-SH進(jìn)口、國產(chǎn)霉菌和酵母菌的總數(shù)測定英文名稱:Cefadroxil200mg重組人 MKK6 / MEK6 / MAP2K6 蛋白現(xiàn)貨促銷109664-02-096T免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%鈣熒光探針Fura-2, AM (1mM DMSO溶液)20mgCoA-SH60-27-5高端化學(xué)試劑Human growth-regulated oncogeneα/melanoma growth stimulating activity, GROα/MGSA Elisa Kit進(jìn)口、國產(chǎn)用于念珠菌的分離培養(yǎng)英文名稱:Forskolin40mg重組人 SLPI 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)促銷511-05-796T免疫球蛋白M(IgM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%Fura-2五鉀鹽20mgN-PCoA60-27-5高端化學(xué)試劑Human growth-regulated oncogeneα/melanoma growth stimulating activity, GROα/MGSA Elisa Kit
Fura-2五鉀鹽20mg 100858-33-1Rat Interleukin 1β, IL-1β Elisa Kit HPLC95%Fura-2五鉀鹽20mgN-PCoA進(jìn)口、國產(chǎn)用于念珠菌的分離培養(yǎng)英文名稱:Forskolin40mg重組人 SLPI 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)促銷511-05-796T免疫球蛋白M(IgM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%Fura-2五鉀鹽20mgN-PCoA60-27-5高端化學(xué)試劑Human growth-regulated oncogeneα/melanoma growth stimulating activity, GROα/MGSA Elisa Kit進(jìn)口、國產(chǎn)食品中霉菌及酵母菌的分離培養(yǎng)英文名稱:Amantadine Hydrochloride200mg重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白 (His 標(biāo)簽)88901-38-696T內(nèi)皮素1(EDN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%Fura-2五鈉鹽20mgHP-IgG60-27-5高端化學(xué)試劑Human maturation promoting factor, MPF Elisa Kit
Fura-2五鈉鹽20mg 100858-33-1Rat Interleukin 1β, IL-1β Elisa Kit HPLC95%Fura-2五鈉鹽20mgHP-IgG進(jìn)口、國產(chǎn)食品中霉菌及酵母菌的分離培養(yǎng)英文名稱:Amantadine Hydrochloride200mg重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白 (His 標(biāo)簽)88901-38-696T內(nèi)皮素1(EDN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%Fura-2五鈉鹽20mgHP-IgG60-27-5高端化學(xué)試劑Human maturation promoting factor, MPF Elisa Kit進(jìn)口、國產(chǎn)用于真菌,特別是酵母菌的計(jì)數(shù)和增菌培養(yǎng)英文名稱:Fenoprofen Sodium500mg重組人 IL1R1 / CD121a 蛋白特價(jià)供應(yīng)952481-53-796T緩激肽(BK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%鈣熒光探針I(yè)ndo-1, AM 20mgmalonylCoA60-27-5高端化學(xué)試劑Human maturation promoting factor, MPF Elisa Kit
鈣熒光探針I(yè)ndo-1, AM 20mg 10090-05-8Rat Myoglobin, MYO/MB Elisa KitHPLC95%鈣熒光探針I(yè)ndo-1, AM 20mgmalonylCoA進(jìn)口、國產(chǎn)用于真菌,特別是酵母菌的計(jì)數(shù)和增菌培養(yǎng)英文名稱:Fenoprofen Sodium500mg重組人 IL1R1 / CD121a 蛋白特價(jià)供應(yīng)952481-53-796T緩激肽(BK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%鈣熒光探針I(yè)ndo-1, AM 20mgmalonylCoA60-27-5高端化學(xué)試劑Human maturation promoting factor, MPF Elisa Kit進(jìn)口、國產(chǎn)真菌和酵母菌的培養(yǎng)英文名稱:15mg重組人 MAPT / Tau 蛋白 (His 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷101219-61-896T髓鞘堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%鈣熒光探針I(yè)ndo-1, AM 20mgSCoA1041-01-6高端化學(xué)試劑Human asialoglyco protein receptor, AGSPR Elisa Kit
鈣熒光探針I(yè)ndo-1, AM 20mg 1009119-64-5Rat Myoglobin, MYO/MB Elisa KitHPLC95%鈣熒光探針I(yè)ndo-1, AM 20mgSCoA進(jìn)口、國產(chǎn)真菌和酵母菌的培養(yǎng)英文名稱:15mg重組人 MAPT / Tau 蛋白 (His 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷101219-61-896T髓鞘堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%鈣熒光探針I(yè)ndo-1, AM 20mgSCoA1041-01-6高端化學(xué)試劑Human asialoglyco protein receptor, AGSPR Elisa Kit進(jìn)口、國產(chǎn)真菌的分離培養(yǎng)英文名稱:Ranitidine Hydrochloride 200mg重組人 ACBD7 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)促銷215934-15-996T神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%鈣熒光探針I(yè)ndo-1, AM (1 mM DMSO溶液)20mgSt IgM-Ab1041-01-6高端化學(xué)試劑Human asialoglyco protein receptor, AGSPR Elisa Kit
鈣熒光探針I(yè)ndo-1, AM (1 mM DMSO溶液)20mg 1009-14-9Rat Thromboxane B2, TXB2 Elisa KitHPLC95%鈣熒光探針I(yè)ndo-1, AM (1 mM DMSO溶液)20mgSt IgM-Ab進(jìn)口、國產(chǎn)真菌的分離培養(yǎng)英文名稱:Ranitidine Hydrochloride 200mg重組人 ACBD7 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)促銷215934-15-996T神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%鈣熒光探針I(yè)ndo-1, AM (1 mM DMSO溶液)20mgSt IgM-Ab1041-01-6高端化學(xué)試劑Human asialoglyco protein receptor, AGSPR Elisa Kit進(jìn)口、國產(chǎn)BR英文名稱:10mg重組人 TNFAIP8 蛋白 (His 標(biāo)簽)69297-40-196T瘦素(LEP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%Indo-1五鉀鹽20mgTMEM97;MAC3051012-91-1高端化學(xué)試劑Human soluble transferrin receptor, sTfR Elisa Kit
Indo-1五鉀鹽20mg 1009-14-9Rat Thromboxane B2, TXB2 Elisa KitHPLC95%Indo-1五鉀鹽20mgTMEM97;MAC30進(jìn)口、國產(chǎn)BR英文名稱:10mg重組人 TNFAIP8 蛋白 (His 標(biāo)簽)69297-40-196T瘦素(LEP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%Indo-1五鉀鹽20mgTMEM97;MAC3051012-91-1高端化學(xué)試劑Human soluble transferrin receptor, sTfR Elisa Kit進(jìn)口、國產(chǎn)霉菌、酵母菌分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù)英文名稱:Cefotiam Hydrochloride325mg重組人 ABHD10 蛋白 (aa 53-306, His 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)155800-17-296T抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%Indo-1五鈉鹽20mgAGXT13139-17-8高端化學(xué)試劑Human soluble transferrin receptor, sTfR Elisa Kit
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
關(guān)鍵字: 牛傳染性鼻氣管炎病毒(IBRV);核酸定量試劑盒;48T;FSP2907;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)!
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