PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱:豬鏈球菌型(SS-)核酸檢測(cè)試劑盒
英文名稱:詳見說明書
編號(hào): FSP2876
分類:核酸檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí),吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
Human ATGA/TGAB(Anti-Thyroid-Globulin Antibody) ELISA KitHuman Cavin 1(Polymerase I and transcript release factor) ELISA Kit馬錢苷GMS10電擊感受態(tài)細(xì)菌轉(zhuǎn)化試劑盒
Human ATXN1(Ataxin 1) ELISA KitHuman D2HGDH(D2-HydroxyglutaRate Dehydrogenase) ELISA KitL-胱氨酸pZERO載體克隆鑒定試劑盒
Human ATF-6(Activating Transcription Factor 6) ELISA KitHuman ER(Total Estrogen Receptor) ELISA KitL-胱氨酸PCR產(chǎn)物末端平滑處理試劑盒
Human Aβ40(Amyloid Beta 40) ELISA KitHuman HIF3A(Hypoxia-inducible factor 3-alpha) ELISA Kit無水醋酸鋰DNA產(chǎn)物磷酸化處理試劑盒
Human ATGA/TGAB(Anti-Thyroid-Globulin Antibody) ELISA KitHuman ALPI(Alkaline Phosphatase, Intestinal) ELISA Kit無水醋酸鋰載體/DNA產(chǎn)物去磷酸化處理試劑盒
Human ATXN1(Ataxin 1) ELISA KitHuman CPB1(Carboxypeptidase B1) ELISA KitL-鳥氨酸鹽酸鹽5’端銜接體(LINKER)連接試劑盒
Human Aβ42(Amyloid Beta 42) ELISA KitHuman CPN2(Carboxypeptidase N2) ELISA KitL-鳥氨酸鹽酸鹽3’端銜接體(LINKER)連接試劑盒
Human ARO(Aromatase) ELISA KitHuman Cr(Creatinine) ELISA KitL-鳥氨酸鹽酸鹽適配體(ADAPTER)連接試劑盒
豬鏈球菌型(SS-)核酸檢測(cè)試劑盒熒光素5mg 103-41-3Rat Endothelial nitric oxide synthase 3, eNOS-3 Elisa KitHPLC98%熒光素5mgglycolipid進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)250英文名稱:25mg重組人 PRPS2 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)59219-64-696T干細(xì)胞因子受體(SCFR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%熒光素5mgglycolipid1685-33-2高端化學(xué)試劑Human Nerve growth factor, NGF Elisa Kit 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)250英文名稱:Lumefantrine 100mg重組人 CEP57 / MVA2 蛋白 (GST 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷97372-53-796T基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%熒光素二鈉鹽5mg437171685-33-2高端化學(xué)試劑Human Macrophage Inflammatory Protein-3β, MIP-3β Elisa Kit
熒光素二鈉鹽5mg 103-41-3Rat Endothelial nitric oxide synthase 3, eNOS-3 Elisa KitHPLC98%熒光素二鈉鹽5mg43717進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)250英文名稱:Lumefantrine 100mg重組人 CEP57 / MVA2 蛋白 (GST 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷97372-53-796T基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%熒光素二鈉鹽5mg437171685-33-2高端化學(xué)試劑Human Macrophage Inflammatory Protein-3β, MIP-3β Elisa Kit 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)250英文名稱:25mg重組人 STX7 / Syntaxin 7 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)促銷85699-62-396T基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%3-氰基-7-羥基香豆素5mgVAV-IgM1685-33-2高端化學(xué)試劑Human Macrophage Inflammatory Protein-3β, MIP-3β Elisa Kit
3-氰基-7-羥基香豆素5mg 103-41-3Rat cholest erolester transfer protein, CETP Elisa KitHPLC98%3-氰基-7-羥基香豆素5mgVAV-IgM進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)250英文名稱:25mg重組人 STX7 / Syntaxin 7 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)促銷85699-62-396T基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%3-氰基-7-羥基香豆素5mgVAV-IgM1685-33-2高端化學(xué)試劑Human Macrophage Inflammatory Protein-3β, MIP-3β Elisa Kit 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)250英文名稱:10mg重組人 BRCA2 / BCCIP 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)23455-44-996T轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGFα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%7-羥基-4-甲基香豆素5mgT6306-52-1高端化學(xué)試劑Human Macrophage Inflammatory Protein-3α, MIP-3α Elisa Kit
7-羥基-4-甲基香豆素5mg 1034-49-7Rat cholest erolester transfer protein, CETP Elisa KitHPLC98%7-羥基-4-甲基香豆素5mgT進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)250英文名稱:10mg重組人 BRCA2 / BCCIP 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)23455-44-996T轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGFα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%7-羥基-4-甲基香豆素5mgT6306-52-1高端化學(xué)試劑Human Macrophage Inflammatory Protein-3α, MIP-3α Elisa Kit 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)250英文名稱:Warfarin 200mg重組人 BOLA1 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)471-66-996T轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%7-羥基-4-甲基香豆素5mgD-Ser6306-52-1高端化學(xué)試劑Human Macrophage Inflammatory Protein-3α, MIP-3α Elisa Kit
7-羥基-4-甲基香豆素5mg 1034-49-7Rat cholest erolester transfer protein, CETP Elisa KitHPLC98%7-羥基-4-甲基香豆素5mgD-Ser進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)250英文名稱:Warfarin 200mg重組人 BOLA1 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)471-66-996T轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%7-羥基-4-甲基香豆素5mgD-Ser6306-52-1高端化學(xué)試劑Human Macrophage Inflammatory Protein-3α, MIP-3α Elisa Kit 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)0.1英文名稱:Tributyl Phosphine Oxide25mg重組人 NPDC-1 / NPDC1 蛋白 (His 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷863-76-396T轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%7-羥基-4-甲基香豆素5mgCXCL206306-52-1高端化學(xué)試劑Human Macrophage Inflammatory Protein-1β, MIP-1β Elisa Kit
7-羥基-4-甲基香豆素5mg 103-49-1Rat cholest erolester transfer protein, CETP Elisa KitHPLC98%7-羥基-4-甲基香豆素5mgCXCL20進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)0.1英文名稱:Tributyl Phosphine Oxide25mg重組人 NPDC-1 / NPDC1 蛋白 (His 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷863-76-396T轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%7-羥基-4-甲基香豆素5mgCXCL206306-52-1高端化學(xué)試劑Human Macrophage Inflammatory Protein-1β, MIP-1β Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)250英文名稱:Cabergoline125mg重組人 FAIM3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)特價(jià)促銷81263-96-996T轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%7-氨基-4-甲基香豆素;香豆素1205mgCXCL286306-52-1高端化學(xué)試劑Human Macrophage Inflammatory Protein-1β, MIP-1β Elisa Kit
7-氨基-4-甲基香豆素;香豆素1205mg 103-49-1Rat heat shock protein 60, hSP-60 Elisa KitHPLC98%7-氨基-4-甲基香豆素;香豆素1205mgCXCL28進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)250英文名稱:Cabergoline125mg重組人 FAIM3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)特價(jià)促銷81263-96-996T轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%7-氨基-4-甲基香豆素;香豆素1205mgCXCL286306-52-1高端化學(xué)試劑Human Macrophage Inflammatory Protein-1β, MIP-1β Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)250英文名稱:Alfuzosin Hydrochloride150mg重組人 BTN3A3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)84812-00-096T免疫球蛋白樣EGF樣域酪氨酸激酶1(Tie1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%7-氨基-4-甲基香豆素;香豆素1205mgVacAAb32854-09-4高端化學(xué)試劑Human Macrophage Inflammatory Protein-1α, MIP-1α Elisa Kit
7-氨基-4-甲基香豆素;香豆素1205mg 103-63-9Rat heat shock protein 60, hSP-60 Elisa KitHPLC98%7-氨基-4-甲基香豆素;香豆素1205mgVacAAb進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)250英文名稱:Alfuzosin Hydrochloride150mg重組人 BTN3A3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)84812-00-096T免疫球蛋白樣EGF樣域酪氨酸激酶1(Tie1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%7-氨基-4-甲基香豆素;香豆素1205mgVacAAb32854-09-4高端化學(xué)試劑Human Macrophage Inflammatory Protein-1α, MIP-1α Elisa Kit 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)250英文名稱:Bismuth Citrate100mg重組人 LRG1 蛋白特價(jià)供應(yīng)89915-39-996T內(nèi)皮細(xì)胞TEK酪氨酸激酶(Tie2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%7-氨基-4-三氟甲基香豆素;香豆素1515mgN.meningitidis32854-09-4高端化學(xué)試劑Human Macrophage Inflammatory Protein-1α, MIP-1α Elisa Kit
7-氨基-4-三氟甲基香豆素;香豆素1515mg 103-63-9Rat malondialchehyche, MDA Elisa KitHPLC98%7-氨基-4-三氟甲基香豆素;香豆素1515mgN.meningitidis進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)250英文名稱:Bismuth Citrate100mg重組人 LRG1 蛋白特價(jià)供應(yīng)89915-39-996T內(nèi)皮細(xì)胞TEK酪氨酸激酶(Tie2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%7-氨基-4-三氟甲基香豆素;香豆素1515mgN.meningitidis32854-09-4高端化學(xué)試劑Human Macrophage Inflammatory Protein-1α, MIP-1α Elisa Kit 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)250英文名稱:Sennoside A 20mg重組人 Hexosaminidase B / HEXB 蛋白 (His 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷5273-86-996T組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%7-氨基-4-三氟甲基香豆素;香豆素1515mgMPO32854-09-4高端化學(xué)試劑Human Macrophage-Derived Chemokine, MDC Elisa Kit
7-氨基-4-三氟甲基香豆素;香豆素1515mg 103-63-9Rat malondialchehyche, MDA Elisa KitHPLC98%7-氨基-4-三氟甲基香豆素;香豆素1515mgMPO進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)250英文名稱:Sennoside A 20mg重組人 Hexosaminidase B / HEXB 蛋白 (His 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷5273-86-996T組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%7-氨基-4-三氟甲基香豆素;香豆素1515mgMPO32854-09-4高端化學(xué)試劑Human Macrophage-Derived Chemokine, MDC Elisa Kit 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)50mg英文名稱:Cholic Acid (AS)2g重組人 PLA2G2D / Phospholipase A2 IID 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)特價(jià)促銷559-70-696T組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%耐爾藍(lán)A;尼羅藍(lán)酸鹽;耐爾藍(lán)5mgBCG-Ab23150-65-4高端化學(xué)試劑Human Macrophage-Derived Chemokine, MDC Elisa Kit
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
關(guān)鍵字: 豬鏈球菌型(SS-);核酸檢測(cè)試劑盒;48T;FSP2876;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國(guó)科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)!
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