PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因植物Sad基因PCR檢測試劑盒
英文名稱：詳見說明書
編號： FSP2834
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集：
具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
Human NKA(Neurokinin A) ELISA KitHuman proPSA(precursor of Prostate Specific Antigen) ELISA Kit鄰碘苯甲酸 細胞JNK/SAPK蛋白表達熒光定量檢測試劑盒
Human MMP-10(Matrix Metalloproteinase 10) ELISA KitHuman PRR4(Proline Rich Protein 4, Lacrimal) ELISA Kit溴代異丁烷 JNK/SAPK蛋白表達西方雜交分析試劑盒
Human MUC3(Mucin 3) ELISA KitHuman PRSS23(Protease, Serine 23) ELISA Kit淫羊藿苷JNK/SAPK蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
Human MUC6(Mucin 6) ELISA KitHuman PRSS33(Protease, Serine 33) ELISA Kit3-碘-4-氨基吡啶JNK/SAPK蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒
Human N-MID-OT(N-MID Osteocalcin) ELISA KitHuman PSAP(Prosaposin) ELISA Kit3-碘-4-氨基吡啶 細胞TUBULIN蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒
Human NKB(Neurokinin B) ELISA KitHuman PSPN(Persephin) ELISA Kit乙酸異丙酯載玻片細胞TUBULIN蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
Human MUSKab(Muscle Skeletal Receptor Tyrosine Kinase antibody) ELISA KitHuman PTD(Pentosidine) ELISA Kit異甘草素冰凍切片組織TUBULIN蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
Human NPYR1(Neuropeptide Y Receptor Y1) ELISA KitHuman PTF1α(Pancreas Specific Transcription Factor 1α) ELISA Kit焦磷酸鐵(III)石蠟切片組織TUBULIN蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
轉(zhuǎn)基因植物Sad基因PCR檢測試劑盒亞細亞皂苷凝血酶原時間（PT）測定試劑盒ISI1.0-1.3<含復(fù)溶液>5mg14432-12-3Rat Gonadotropin-releasing hormone receptor, GnRHR Elisa KitHPLC98%凝血酶原時間（PT）測定試劑盒ISI1.0-1.3<含復(fù)溶液>5mgADRP25mgCAS號：針頭濾器 可換膜 直徑25mm 25個/袋 100個/盒517-28-289130-86-996T高爾基蛋白73(GP73)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%凝血酶原時間（PT）測定試劑盒ISI1.0-1.3<含復(fù)溶液>5mgADRP3737-95-9高端化學(xué)試劑硬脂酰輔酶A去飽和酶(SCD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)50mgCAS號：針頭濾器(直徑)13mm 水系 一次性 25個/袋 100個/盒 0.22um 8005-03-6103917-26-696T脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<鞣花酸含cacl2>5mgCAMK1D1667-99-8高端化學(xué)試劑17-β-羥基類固醇脫氫酶10(HSD17β10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<鞣花酸含cacl2>5mg15663-27-1Rat Gonadotropin-releasing hormone receptor, GnRHR Elisa KitHPLC98%部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<鞣花酸含cacl2>5mgCAMK1D50mgCAS號：針頭濾器(直徑)13mm 水系 一次性 25個/袋 100個/盒 0.22um 8005-03-6103917-26-696T脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<鞣花酸含cacl2>5mgCAMK1D1667-99-8高端化學(xué)試劑17-β-羥基類固醇脫氫酶10(HSD17β10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)eaCAS號：針頭濾器(直徑)25mm 水系 一次性 25個/袋 100個/盒 0.22um 8005-02-599882-10-796T黑素瘤細胞黏附分子(MCAM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<鞣花酸含cacl2>5mgCAMK41667-99-8高端化學(xué)試劑肌鈣蛋白I(TNI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<鞣花酸含cacl2>5mg15663-27-1Rat Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase, AMPK Elisa KitHPLC98%部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<鞣花酸含cacl2>5mgCAMK4eaCAS號：針頭濾器(直徑)25mm 水系 一次性 25個/袋 100個/盒 0.22um 8005-02-599882-10-796T黑素瘤細胞黏附分子(MCAM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒<鞣花酸含cacl2>5mgCAMK41667-99-8高端化學(xué)試劑肌鈣蛋白I(TNI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)50mgCAS號：針頭濾器(直徑)13mm 有機 一次性 25個/袋 100個/盒 0.22um 4197-07-3479-21-096TAMP激活蛋白激酶β1(PRKAβ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%0.025M化鈣5mgHSPA12A84166-13-2高端化學(xué)試劑周期素依賴性激酶5(CDK5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
0.025M化鈣5mg15362-40-0Rat Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase, AMPK Elisa KitHPLC98%0.025M化鈣5mgHSPA12A50mgCAS號：針頭濾器(直徑)13mm 有機 一次性 25個/袋 100個/盒 0.22um 4197-07-3479-21-096TAMP激活蛋白激酶β1(PRKAβ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%0.025M化鈣5mgHSPA12A84166-13-2高端化學(xué)試劑周期素依賴性激酶5(CDK5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)200mgCAS號：針頭濾器(直徑)25mm 有機 一次性 25個/袋 100個/盒 0.22um 4197-07-381371-54-296T肺部激活調(diào)節(jié)趨化因子(PARC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%凝血酶時間(TT)測定試劑盒5mgHSP1733-12-6高端化學(xué)試劑補體1q(C1q)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
凝血酶時間(TT)測定試劑盒5mg15362-40-0Rat heat shock protein, HSP47 Elisa KitHPLC98%凝血酶時間(TT)測定試劑盒5mgHSP200mgCAS號：針頭濾器(直徑)25mm 有機 一次性 25個/袋 100個/盒 0.22um 4197-07-381371-54-296T肺部激活調(diào)節(jié)趨化因子(PARC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%凝血酶時間(TT)測定試劑盒5mgHSP1733-12-6高端化學(xué)試劑補體1q(C1q)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)15mgCAS號：針頭濾器(直徑)13mm 水系 一次性 25個/袋 100個/盒 0.45um148-25-4100234-59-196T轉(zhuǎn)運蛋白1(TNPO1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%凝血酶時間(TT)測定試劑盒<含復(fù)溶液>5mgPGAM51733-12-6高端化學(xué)試劑N-甲基-D-天氡氨酸離子能谷氨酸受體2C(GRIN2C)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
辣椒素（天然純化分離）凝血酶時間(TT)測定試劑盒<含復(fù)溶液>5mg652-67-5Rat heat shock protein, HSP47 Elisa KitHPLC98%凝血酶時間(TT)測定試劑盒<含復(fù)溶液>5mgPGAM515mgCAS號：針頭濾器(直徑)13mm 水系 一次性 25個/袋 100個/盒 0.45um148-25-4100234-59-196T轉(zhuǎn)運蛋白1(TNPO1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%凝血酶時間(TT)測定試劑盒<含復(fù)溶液>5mgPGAM51733-12-6高端化學(xué)試劑N-甲基-D-天氡氨酸離子能谷氨酸受體2C(GRIN2C)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)25mgCAS號：針頭濾器(直徑)25mm 水系 一次性 25個/袋 100個/盒 0.45um5808-22-0112503-87-496T胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含ibs、定標(biāo)血漿>5mg14-15-D H62625-29-0高端化學(xué)試劑N-甲基-D-天氡氨酸離子能谷氨酸受體2B(GRIN2B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
二氫辣椒素纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含ibs、定標(biāo)血漿>5mg652-67-5Rat glucocorticoid, GC Elisa KitHPLC98%纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含ibs、定標(biāo)血漿>5mg14-15-D H25mgCAS號：針頭濾器(直徑)25mm 水系 一次性 25個/袋 100個/盒 0.45um5808-22-0112503-87-496T胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含ibs、定標(biāo)血漿>5mg14-15-D H62625-29-0高端化學(xué)試劑N-甲基-D-天氡氨酸離子能谷氨酸受體2B(GRIN2B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)350mgCAS號：針頭濾器(直徑)13mm 有機 一次性 25個/袋 100個/盒 0.45um5808-22-0226560-96-996T白介素12B(IL12B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含ibs、定標(biāo)血漿>5mghistidine62625-29-0高端化學(xué)試劑鞘氨醇-1-酸酸酶2(SGPP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
胡椒酰胺纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含ibs、定標(biāo)血漿>5mg652-67-5Rat glucocorticoid, GC Elisa KitHPLC98%纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含ibs、定標(biāo)血漿>5mghistidine350mgCAS號：針頭濾器(直徑)13mm 有機 一次性 25個/袋 100個/盒 0.45um5808-22-0226560-96-996T白介素12B(IL12B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含ibs、定標(biāo)血漿>5mghistidine62625-29-0高端化學(xué)試劑鞘氨醇-1-酸酸酶2(SGPP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)50mgCAS號：針頭濾器(直徑)25mm 有機 一次性 25個/袋 100個/盒 0.45um5808-22-0226561-02-096T促性腺激素釋放激素受體(GnRHR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含ibs>5mgHSV1-Ab1393-92-6高端化學(xué)試劑谷氨酸半胱氨酸連接酶(GCLM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含ibs>5mg154-42-7Rat Citrate synthase, CS Elisa KitHPLC98%纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含ibs>5mgHSV1-Ab50mgCAS號：針頭濾器(直徑)25mm 有機 一次性 25個/袋 100個/盒 0.45um5808-22-0226561-02-096T促性腺激素釋放激素受體(GnRHR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含ibs>5mgHSV1-Ab1393-92-6高端化學(xué)試劑谷氨酸半胱氨酸連接酶(GCLM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)25mgCAS號：移液器92-32-041137-85-396T孕酮受體(PGR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含ibs>5mgM-CSF1393-92-6高端化學(xué)試劑鞘氨醇-1-酸酸酶1(SGPP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
射干苷纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含ibs>5mg154-42-7Rat Citrate synthase, CS Elisa KitHPLC98%纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含ibs>5mgM-CSF25mgCAS號：移液器92-32-041137-85-396T孕酮受體(PGR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測定試劑盒<含ibs>5mgM-CSF1393-92-6高端化學(xué)試劑鞘氨醇-1-酸酸酶1(SGPP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)25mgCAS號：助理移液器 10mL92-32-055497-79-596T激肽釋放酶1(KLK1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%清洗液5mgTGF2591-17-5高端化學(xué)試劑骨涎蛋白(BSP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
關(guān)鍵字： 轉(zhuǎn)基因植物Sad基因;PCR檢測試劑盒;50T;PCR檢測試劑盒;
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
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