儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 產(chǎn)品僅供科研血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱:輪狀病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱:詳見說明書
編號: FSP2582
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
Human LPHN3 ELISA KitHuman PGAP1(Post-GPI attachment to proteins factor 1) ELISA Kit十二烷基二甲基胺乙內(nèi)酯人支氣管成纖維細胞
Human LRR 1(Leucine-rich repeat protein 1) ELISA KitHuman LPAR3(Lysophosphatidic acid receptor 3) ELISA Kit十二烷基二甲基胺乙內(nèi)酯人骨骼肌細胞
Human LPP ELISA KitHuman PGM1(Phosphoglucomutase-1) ELISA Kit乙烯基二苯基膦人骨骼肌衛(wèi)星細胞
Human LPIN2 ELISA KitHuman UBE2A(Ubiquitin-conjugating enzyme E2 A) ELISA Kit乙烯基二苯基膦人骨骼肌成肌細胞
Human LPPR2 ELISA KitHuman PHD2(Prolyl hydroxylase domain-containing protein 2) ELISA Kit二噻吩[3,2-b:2',3'-d]噻吩人腎上腺皮質(zhì)細胞
Human LPXN ELISA KitHuman MUSK(Muscle, skeletal receptor tyrosine-protein kinase) ELISA Kit二噻吩[3,2-b:2',3'-d]噻吩人腎小球內(nèi)皮細胞
Human LRAT ELISA KitHuman PHF20(PHD finger protein 20) ELISA KitN,N-二甲基甲酰胺二甲縮醛人腎小管上皮細胞
Human LPIN2 ELISA KitHuman AMACR(Alpha-methylacyl-CoA racemase) ELISA KitN,N-二甲基甲酰胺二甲縮醛人腎皮質(zhì)上皮細胞
輪狀病毒PCR檢測試劑盒Homo sapiens, humanDonkey Anti-Guinea pig IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的驢抗豚鼠IgG3,4-二氯苯甲酰甲酸乙酯LMP2AEB病毒LMP-2A蛋白抗體特價促銷
Mus musculus, mouseDonkey Anti-Guinea pig IgG/APC APC標記的驢抗豚鼠IgG3-(4-溴苯基)吡啶ADAM2去整合素樣金屬蛋白酶2抗體特價促銷
Wallemia sebi (Fries) von ArxDonkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的驢抗豚鼠IgG2,4-二氯-3-乙基-6-硝基苯酚MLCK肌球蛋白輕鏈激酶抗體特價促銷
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的驢抗豚鼠IgG環(huán)丙磺酰氯Acetyl-Histone H4(K5)乙?;M蛋白H4抗體特價促銷
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的驢抗豚鼠IgG3-(2-甲基喹啉-1-基)丙烷-1-磺酸內(nèi)鹽Acetyl-Histone H4(K16)乙酰化組蛋白H4(K16)抗體特價促銷
Gyrodon lividus (Bulliard : Fries) SaccardoDonkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的驢抗豚鼠IgG3-氯-2-肼基砒啶AFP甲胎蛋白抗體特價促銷
Mus musculus, mouseDonkey Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的驢抗豚鼠IgG2-氨基-5-溴-2'-氟二苯甲酮AEV(Avian Encephalomyelitis virus)禽腦脊髓炎病毒AEV抗體特價促銷
Saccharomyces paradoxus Bachinskaya, teleom ..Donkey Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的驢抗豚鼠IgG2',3'-二-O-乙酰基-5'-脫氧-5-氟-D-胞啶ADAM17/CD156b腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)換酶特價促銷
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
數(shù)據(jù)采集:
具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時,吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
關(guān)鍵字: 輪狀病毒;PCR檢測試劑盒;50T;FSP2582;
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
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