產(chǎn)品名稱：弓形蟲PCR試劑盒
英文名稱：詳見說明書
編號： FSP2502
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、產(chǎn)品僅供科研制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。
數(shù)據(jù)采集：
具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結合DNA 時，吸收光譜在 471nm，結合 DNA 時的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
兔舌表皮細胞Human NT-3(Neurotrophin-3) ELISA Kit3,5-二氯-2-氟吡啶乳腺上皮細胞
兔腎上腺皮質細胞Human NT-4(Neurotrophin-4) ELISA Kit3,5-二氯-2-氟吡啶乳腺成纖維細胞
兔腎上腺髓質細胞Human OPG(Osteoprotegerin) ELISA Kit二乙二醇二乙醚胰島β細胞
兔腎系膜細胞Human OPN(Osteopontin) ELISA Kit二乙二醇二乙醚甲狀腺濾泡上皮細胞
兔腎小管上皮細胞Human OSM(Oncostatin-M) ELISA Kit二烯丙基硫醚淋巴內皮細胞
兔腎小球內皮細胞Human PUMA(P53 Upregulated Modulator of Apoptosis) ELISA Kit二烯丙基硫醚淋巴成纖維細胞
兔腎小球足細胞Human PCSK9(Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9) ELISA Kit鄰苯二甲酸二正辛酯扁桃體上皮細胞
兔食管成纖維細胞Human PD-1/PDCD1(Programmed Cell Death Protein 1) ELISA Kit鄰苯二甲酸二正辛酯扁桃體成纖維細胞
弓形蟲PCR試劑盒Homo sapiens, humanMouse Anti-Bov IgG/Cy5 Cy5標記的小鼠抗牛IgG 反式-3-氟肉桂酸雞傳染性法氏囊病毒（IBDV）抗原快速檢測卡（檢雞法氏囊/泄殖腔拭子，）
Monascus ruber van Tieghem, teleomorphMouse Anti-Bov IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的小鼠抗牛IgG 17-氨基-3,6,9,12,15-五氧雜十七烷醇H9禽流感抗體快速檢測卡（檢血清，）
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Mouse Anti-Bov IgG/Cy7 Cy7標記的小鼠抗牛IgG D-天冬酰胺一水物H5禽流感抗體快速檢測卡（檢血清，）
Agaricus pattersonae Peck, teleomorphMouse Anti-Bov IgG/PE PE標記的小鼠抗牛IgG 蛙皮素H5亞型禽流感病毒抗原快速檢測卡（檢泄殖腔拭子/糞便，）
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Mouse Anti-Bov IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的小鼠抗牛IgG 5-溴苊H7亞型禽流感病毒抗原快速檢測卡（檢泄殖腔拭子/糞便，）
Escherichia coli (Migula) Castellani and Cha ..Mouse Anti-Bov IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的小鼠抗牛IgG 順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸甲酯H9亞型禽流感病毒抗原金標快速檢測卡（檢泄殖腔拭子/糞便，）
frozenMouse Anti-Bov IgG/APC APC標記的小鼠抗牛IgG 2,4-二甲氧基碘苯禽流感抗體快速檢測卡（檢血清，）
Homo sapiens, human sacral boneMouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的小鼠抗牛IgG 左旋-反式-1,2-環(huán)己二胺禽流感病毒(通用)抗原快速檢測卡（檢泄殖腔拭子/糞便，）
關鍵字： 弓形蟲;PCR試劑盒;50T;FSP2502;
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學院、復旦大學、上海交通大學醫(yī)學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫(yī)大學、南京大學，暨南大學，南京工業(yè)大學，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒，種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒；另有針對各種動物（鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚）的科研試劑。
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