產(chǎn)品名稱：腸道病毒EV PCR檢測試劑盒
英文名稱：詳見說明書
編號： FSP2432
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、產(chǎn)品僅供科研制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。
數(shù)據(jù)采集：
具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
人急淋白血病細胞系，SUP-B15細胞anti- USP3 antibody2-氯煙酰氯人毛囊角質(zhì)細胞，HHFK細胞
人急性非B非T淋巴細胞白血病細胞，REH細胞anti- USP32 antibody甲酚人內(nèi)皮祖細胞
人急性淋巴母細胞白血病細胞，MT-4細胞anti- USP33 antibody頭孢唑啉鈉人內(nèi)皮祖細胞-誘導
人急性淋巴母細胞性白血病細胞，MOLT-4細胞anti- USP33 antibody纖維素粉人臍動脈內(nèi)皮細胞，HUAECP細胞
人急性淋巴細胞白血病細胞，CCRF-CEM細胞anti- USP34 antibody纖維素粉人臍動脈平滑肌細胞，HUASMCP細胞
人急性淋巴細胞白血病細胞，CEM/C1細胞anti- USP35 antibody纖維素粉人臍靜脈內(nèi)皮細胞，HUVECP細胞
人甲狀腺癌乳頭狀細胞，Bcpap細胞anti- USP36 antibody纖維素粉人臍靜脈平滑肌細胞，HUVSMCP細胞
人甲狀腺癌細胞，F(xiàn)TC-133細胞anti- USP37 antibody纖維素粉人前列腺成纖維細胞，HPFTR細胞
腸道病毒EV PCR檢測試劑盒Qingyang ginseng AVCP 含纈酪肽蛋白抗體甲基四氫鄰苯二甲酸酐7-Methoxycoumarin-3-carboxylic acid, succinimidyl ester
Lappaconitine hydrobromideVDAC 等電壓依賴性陰離子通道抗體4-硝基-1-萘胺Dansyl-X, SE
Go to aVDCC-L alpha/CCHL1A1 L-型電壓依賴型鈣通道α抗體溴化鈦NBD-X
NorisoboldineCACNB2 L-型電壓依賴型鈣通道β抗體N-丁基咪唑NBD-X, SE
Dehydrocostus lactoneVEGF 血管內(nèi)皮生長因子抗體氧化鏑DABCYL acid
Human RT5VEGF 血管內(nèi)皮生長因子抗體三氯化硼DABCYL acid, SE
Vibrio choleraeVEGF-A/VEGF 165 血管內(nèi)皮生長因子A抗體3,3',4,4',5-五溴聯(lián)苯醚DNP-X acid
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..PROK1/PRK1/EG-VEGF 內(nèi)分泌腺衍生血管內(nèi)皮生長因子抗體2,3',4,4',5-五氯聯(lián)苯DNP-X, SE
關(guān)鍵字： 腸道病毒EV ;PCR檢測試劑盒;50T;FSP2432;
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學院、復旦大學、上海交通大學醫(yī)學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫(yī)大學、南京大學，暨南大學，南京工業(yè)大學，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒，種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒；另有針對各種動物（鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚）的科研試劑。
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