產(chǎn)品名稱:哈維氏弧菌PCR試劑盒
英文名稱:Vibrio harveyiPCR
編號: FSP2375
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、產(chǎn)品僅供科研制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時,吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 555Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 特價促銷anti- TORC1 antibody6-氯靛紅人肺腺癌細(xì)胞,NCI-H1395細(xì)胞
Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 647Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 特價促銷anti- Torsin A antibody6-氯靛紅人肺腺癌細(xì)胞,NCI-H1975細(xì)胞
Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/PE-Cy5.5PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 特價促銷anti- TOX2 antibody氯金酸人肺腺癌細(xì)胞,SPC-A1細(xì)胞
Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/PE-Cy7PE-Cy7標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 特價促銷anti- TP53 antibody氯金酸人肝癌(HBV) ,Hep G2.2.15細(xì)胞
Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Bio生物素標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 特價促銷anti- TP53INP1 antibody4-氯-2甲氧基吡啶人肝癌細(xì)胞氟尿嘧啶耐藥株,Bel/Fu細(xì)胞
Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/HRP辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 特價促銷anti- TP63 antibody4-氯-2甲氧基吡啶人肝癌細(xì)胞系,Hep-3B細(xì)胞
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/HRP辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc特價促銷anti- tPA antibody4-氯-2甲氧基吡啶人肝癌細(xì)胞,Bel-7402細(xì)胞
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE-Cy3PE-Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc特價促銷anti- TPCN1 antibody雙(6,6,7,7,8,8,8,-七氟-2,2-二甲基-3,5-辛二酮酸)銅人肝癌細(xì)胞,Bel-7404細(xì)胞
哈維氏弧菌PCR試劑盒Rat soluble Interleukin 2 recepter,IL-2sR ELISA試劑盒Smac/DIABLO 線粒體促凋亡蛋白抗體2-異丙基苯酚耶氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat soluble Interleukin 6 receptor,sIL-6R ELISA試劑盒SLC33A1 乙酰輔酶A轉(zhuǎn)運蛋白1抗體[(1R)-3-羥基-1-苯基丙基]氨基甲酸芐酯肺孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat soluble interleukin-1 receptor Ⅰ,IL-1sRⅠ ELISA試劑盒 SLC34A2 磷酸鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白抗體2,5-二氯異煙酸多瘤病毒探針法熒光定量PCR試劑盒,停產(chǎn)
Rat soluble interleukin-1 receptor Ⅱ,IL-1sRⅡ ELISA試劑盒 SLC27A2/ACSVL1 長鏈脂肪酸輔酶A連接酶抗體3-氯異煙酸豬腺病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat soluble interleukin-2 receptor,IL-2sRα ELISA試劑盒CRIM1 富含半胱氨酸運動神經(jīng)元蛋白1抗體Boc-1-氨基環(huán)丙基甲酸豬圓環(huán)病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat soluble interleukin-2 receptor,IL-2sRβ ELISA試劑盒 Slit2/Slil3 神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3抗體N-Boc-4-哌啶乙醇豬圓環(huán)病毒2型探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1,sPECAM-1 ELISA試劑盒SLT/SLT-IIe/O139 豬水腫素(O139)菌體蛋白抗體2,4-二羥基-3-硝基吡啶豬圓環(huán)病毒3型探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat Soluble protein-100,S-100 ELISA試劑盒SLC39A6 SLC39A6抗體4-氨基-3-溴-5-硝基吡啶豬圓環(huán)病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒
關(guān)鍵字: 哈維氏弧菌;PCR試劑盒;50T;FSP2375;
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
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