產(chǎn)品名稱：衣阿華支原體PCR試劑盒
英文名稱：Mycoplasma iowaePCR
編號(hào)： FSP1949
分類：PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、產(chǎn)品僅供科研制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集：
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí)，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
GRB2/ASH生長因子受體結(jié)合蛋白2抗體特價(jià)促銷anti- NBR1 antibody日落黃快速檢測試劑說明書2-茨醇；冰片；龍膽

GZMA/Granzyme A顆粒酶A抗體特價(jià)促銷anti- N-cadherin antibody檸檬黃快速檢測試劑說明書齊墩果酸

GZMB/Granzyme B顆粒酶B抗體特價(jià)促銷anti- N-cadherin antibody羅丹明B快速檢測試劑說明書硬飛燕草堿

GPAM線粒體甘油3磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶抗體特價(jià)促銷anti- N-cadherin antibody亮藍(lán)快速檢測試劑說明書烏頭原堿

Granzyme D/B/E/N/G/F/H顆粒酶D/B/E/N/G/F/H抗體特價(jià)促銷anti- NCALD antibody堿性橙II快速檢測試劑說明書一枝蒿庚素； 準(zhǔn)葛爾烏頭堿

GPD1甘油三磷酸脫氫酶1抗體特價(jià)促銷anti- NCALD antibody鮮奶中亞硝酸鹽快速檢測試劑說明書異去氫鉤藤堿

GPD2線粒體甘油三磷酸脫氫酶2抗體特價(jià)促銷anti- NCAM1/CD56 antibody鮮奶中硝酸鹽快速檢測試劑說明書刺囊酸

GRB10生長因子受體結(jié)合蛋白10抗體特價(jià)促銷anti- NCAM1/CD56 antibody鮮奶中摻蔗糖快速檢測試劑說明書漢黃芩苷
衣阿華支原體PCR試劑盒X-tremeGENE siRNA Transfection Reagentphospho-MAPK11(Thr180+Tyr182)  磷酸化絲裂原活化的蛋白激酶p38β抗體2-乙基己基環(huán)氧妥爾PEG3350 聚乙二醇

RTS 500 E. coli Disulfide KitNUDEL/NDEL1  中心粒蛋白Nudel抗體2-乙基己基環(huán)氧妥爾PEG3350 聚乙二醇

RTS 100 E. coli Disulfide KitNeuroligin 1  突觸細(xì)胞粘附分子1抗體鄰苯二甲酸二異壬酯PEG3350 聚乙二醇

RTS DnaK Supplementphospho-NDEL1(Ser231)  磷酸化中心粒蛋白Nudel抗體鄰苯二甲酸二異壬酯PEG4000 聚乙二醇

RTS 100 Wheat Germ CECF Kitphospho-NDEL1(Ser242)  磷酸化中心粒蛋白Nudel抗體鄰苯二甲酸二己酯PEG4000 聚乙二醇

RTS pIVEX Wheat Germ His6-tag Vector Setphospho-NDEL1(Thr219)  磷酸化中心粒蛋白Nudel抗體鄰苯二甲酸二己酯PEG4000 聚乙二醇

RTS Wheat Germ Linear Template Generation Set, His6-tagCD13/APN/ANPEN  CD13氨肽酶N抗體二(正庚基正壬基)己二酸酯PEG4000 聚乙二醇

RTS AviTag Biotinylation KitCD14  內(nèi)毒素受體抗體二(正庚基正壬基)己二酸酯PEG600 聚乙二醇