產品名稱：鳥分枝桿菌類結核亞型PCR試劑盒
英文名稱：Mycobacterium avium subspecies paratuberculosisPCR
編號： FSP1913
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、產品僅供科研制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數值為橫軸，繪制標準曲線。
數據采集：
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產品中所含的熒光染料在不結合DNA 時，吸收光譜在 471nm，結合 DNA 時的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數據處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
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FGF4纖維母細胞生長因子4抗體特價促銷anti- MPV17 antibodyPrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit毛蕊異黃酮
鳥分枝桿菌類結核亞型PCR試劑盒Feline Gamma Globulin Lyophilized Powder >= 96%, 100mgBcl-10/CLAP/CIPER  Bcl-10抗體 丙烯酸羥丙酯(異構體混合物)Hydroxypropyl-beta-cyclodextrin 羥丙基-β-環(huán)糊精

Feline Gamma Globulin Liquid >= 96%, 500mg, 10mg/ml, 50mlPKMYT1  髓鞘轉錄因子1激酶抗體 6-溴己酸乙酯Methyl-β-cyclodextrin 甲基-β-環(huán)糊精/2,6-二甲基-β-環(huán)糊精

Feline Gamma Globulin Liquid >= 96%, 100mg, 10mg/ml, 10mlphospho-PKMYT1(Thr495)  磷酸化髓鞘轉錄因子1激酶抗體 2-氯-6-甲基吡啶-4-羧酸N-Ethylmaleimide N-乙基順丁烯二酰亞胺（NEM）

Feline Gamma Globulin Liquid >= 96%, 1 gram, 10mg/ml, 100mlBBC3/PUMA  p53正向細胞凋亡調控因子抗體 2,5-二氯-4-甲基吡啶PyBOP 六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷

Equine Serum Albumin Lyophilized Powder >= 96%, 100gKeratan Sulfate  硫酸角質素抗體 氰甲基膦酸二乙酯PyBOP 六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷

Equine Serum Albumin Lyophilized Powder >= 96%, 1000gSalmonella tropina  沙門氏菌菌體蛋白抗體 5-溴-2-糠酸甲酯乙酸鈉，無水    AR

Equine Serum Albumin Lyophilized Powder? >= 96%, 10gARHGAP20  Rho GTP酶激活蛋白20抗體 2-吡啶甲酸乙酯乙酸鈉，無水    GR

Equine Gamma Globulin Lyophilized Powder >= 96%, 1KGBCHE (NT)  丁酰膽堿酯酶抗體(N端) 4-氯吲哚Sodium butanoate 丁酸鈉