儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 產(chǎn)品僅供科研血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱:反芻獸曼氏桿菌PCR試劑盒
英文名稱:Mannheimia ruminalisPCR
編號: FSP1866
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
DCBLD2內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞衍生的神經(jīng)纖毛蛋白抗體特價(jià)促銷anti- MAGEA1 antibody體液乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測試劑盒鈉通道蛋白11α抗體
ANKHD1艾滋病病毒制約錨定蛋白抗體特價(jià)促銷anti- MAGEA1 antibody乙酰膽堿酯酶活性抑制劑篩選比色法檢測試劑盒鈉離子通道β1抗體
Deltex-1DTX1抗體特價(jià)促銷anti- MAGEA10 antibody通用型乙酰膽堿酯酶活性熒光法定量檢測試劑盒鈉通道蛋白8α抗體
envelope glycoprotein (Dengue virus type-2)登革熱病毒抗體特價(jià)促銷anti- MAGEA11 antibody細(xì)胞乙酰膽堿酯酶活性熒光法定量檢測試劑盒絲氨酸蛋白酶抑制劑B12抗體
ASAP3GTP酶激活蛋白ASAP3抗體特價(jià)促銷anti- MAGEA3 antibody組織乙酰膽堿酯酶活性熒光法定量檢測試劑盒絲氨酸蛋白酶抑制劑B10抗體
polyprotein (DHAV)鴨甲型肝炎病毒聚蛋白抗體特價(jià)促銷anti- MAGEA4 antibody血液乙酰膽堿酯酶活性熒光法定量檢測試劑盒5-羥色胺受體3C抗體
ASB2含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族2抗體特價(jià)促銷anti- MAGEA6 antibody體液乙酰膽堿酯酶活性熒光法定量檢測試劑盒SCYL結(jié)合蛋白1抗體
Desmin/DES結(jié)蛋白抗體特價(jià)促銷anti- MAGEA8 antibody通用型乙酰膽堿酯酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒5-羥色胺受體3B抗體
反芻獸曼氏桿菌PCR試劑盒FSTM Taq DNA聚合酶C1QL1 補(bǔ)體組分1q子成分樣蛋白1抗體 2-乙酰苯甲腈L-谷氨酰胺(L-Glutamine,Liquid)(200mM)
HotStart Taq DNA 聚合酶CHL1/CALL 神經(jīng)細(xì)胞粘附分子CALL抗體 3-氟-4'-丙基聯(lián)苯硼酸L-谷氨酸溶液(L-Glutamic acid ,Liquid)(200mM)
TaqPlus DNA聚合酶COL6A5/Collagen VI alpha 5 6型膠原蛋白α5抗體 4,4'-二甲氧基二苯甲酮丙酮酸鈉(Sodium Pyruvate)(100mM) 索開
Pfu DNA聚合酶CPA6 胰羧肽酶A6抗體 4-溴-3-甲基乙酰苯胺NAAS 非必需氨基酸(100×)
Taq DNA聚合酶GJC2/Connexin 47 間隙連接蛋白47抗體 3-氯-4-乙氧基-2-氟苯硼酸EDTA消化液(0.02%)
Fusion Pfu DNA聚合酶Sin3b 轉(zhuǎn)錄抑制蛋白Sin3b抗體 1-溴-3-氯-4-乙氧基-2-氟苯胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) 含酚紅
Actinomycin D 放線菌素DHAPLN2 透明質(zhì)酸及粘蛋白2抗體 4,6-二甲氧基-2-甲巰基嘧啶胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) 不含酚紅
LPS 脂多糖 sigma公司產(chǎn)品,現(xiàn)貨供應(yīng)HAS3 透明質(zhì)酸合成酶3抗體 2-甲基-5-嘧啶甲醛胰蛋白酶消化液(0.25%) 不含酚紅
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí),吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
關(guān)鍵字: 反芻獸曼氏桿菌;PCR試劑盒;50T;FSP1866;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)!
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