儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 產(chǎn)品僅供科研血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱:嗜血桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Haemophilus spp.PCR
編號(hào): FSP1724
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
G3BP1Ras GTP酶活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體特價(jià)促銷anti- HEMGN antibody組織環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒核基質(zhì)蛋白21抗體
ORP150氧氣調(diào)節(jié)蛋白150抗體特價(jià)促銷anti- Hemoglobin alpha antibody體液環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒RAS癌基因相關(guān)蛋白R(shí)ab6C抗體
AT1R/AGTR1血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體特價(jià)促銷anti- Hemoglobin epsilon antibody細(xì)胞環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒結(jié)腸癌相關(guān)基因蛋白抗體(resistin-like β)
AT1R/AGTR1血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體特價(jià)促銷anti- Hemoglobin epsilon-Specific antibody組織環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒環(huán)指蛋白111抗體
phospho-G3BP1(Ser232)磷酸化Ras GTP酶活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體特價(jià)促銷anti- Hemoglobin epsilon-Specific antibody體液環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒環(huán)指蛋白113A抗體
phospho-HMGN1(Ser20+Ser24)磷酸化高遷移率核小體結(jié)合蛋白1特價(jià)促銷anti- Hemopexin antibody動(dòng)物線粒體呼吸鏈復(fù)合物I(NADH-輔酶Q還原酶)活性定量檢測(cè)試劑盒環(huán)指蛋白121抗體
ATF1活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體特價(jià)促銷anti- HEPACAM antibody動(dòng)物線粒體呼吸鏈復(fù)合物II(琥珀酸-輔酶Q還原酶)活性定量檢測(cè)試劑盒環(huán)指蛋白43抗體
CUEDC2/CUE domain containing 2CUE結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體特價(jià)促銷anti- Hephaestin antibody動(dòng)物線粒體呼吸鏈復(fù)合物III(輔酶Q-細(xì)胞色素C還原酶)活性定量檢測(cè)試劑盒腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)記蛋白2抗體
嗜血桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒XYLENE CYANOLE F.F 二甲苯青、C.I. 42135; Acid blue 147GRAMD3/NS3TP2 丙型肝炎病毒-NS3反轉(zhuǎn)錄激活蛋白2抗體人乳頭瘤病毒16探針?lè)晒舛縋CR試劑盒Quinine;奎寧
VITAMIN B12 鈷胺素、CyanocobalaminTNIK TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白抗體人乳頭瘤病毒18探針?lè)晒舛縋CR試劑盒Dimethyl phthalate;鄰苯二甲酸二甲酯
Uridine 5′-triphosphate trisodium salt hydrate (UTP)、尿苷-5-三磷酸三鈉鹽GSTCD 谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶C段結(jié)構(gòu)域抗體人乳頭瘤病毒33探針?lè)晒舛縋CR試劑盒Zeatin;玉米素
SPERMIDINE 亞精胺GTDC1 糖基轉(zhuǎn)移酶樣1抗體人乳頭瘤病毒52探針?lè)晒舛縋CR試劑盒Sodium DeMethylcantharidate;去甲斑蝥酸鈉
RETINOIC ACID、維生素A、 Vitamin A Acid、Tretinoin; Aberel; Airol; Aknoten; Cordes Vas; Dermairol; Retin-A; Vesnaroidphospho-IKKi/IKKe(Ser172) 磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體人乳頭瘤病毒58探針?lè)晒舛縋CR試劑盒Nystose;蔗果四糖/耐斯糖
PROGESTERONE 孕酮、Corpus luteum hormone、 LuteohormonePXMP1/ABCD3 過(guò)氧化物酶膜蛋白1抗體人乳頭瘤病毒6探針?lè)晒舛縋CR試劑盒Periplocin;杠柳毒苷
JANUS GREEN B 詹納斯綠phospho-TNIK(Ser764) 磷酸化TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白抗體人多瘤病毒6探針?lè)晒舛縋CR試劑盒N-Acetylneuraminic acid;N-乙酰神經(jīng)氨酸/唾液酸
IGEPAL CA-630Arginase 1 精氨酸酶1抗體人多瘤病毒7探針?lè)晒舛縋CR試劑盒Neohesperidin;新橙皮苷
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí),吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過(guò)待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
關(guān)鍵字: 嗜血桿菌通用;PCR檢測(cè)試劑盒;50T;FSP1724;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
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